高氧致新生鼠慢性肺疾病中PDZ结合基序转录共激活因子的表达及其意义

目的探讨高氧致新生大鼠慢性肺损伤中PDZ结合基序转录共激活因子(transcriptional co-activator with PDZ-binding motif,TAZ)的表达及其作用。方法建立新生大鼠高氧致肺损伤模型,实验组和对照组分别吸入氧气(85%)和空气。分别在第1、3、7、14、21天留取肺组织,肺组织切片苏木精-伊红染色观察肺组织病理改变,应用实时荧光定量聚合酶链式反应、Western blot和免疫组织化学技术检测肺组织中TAZ、表面活性蛋白C(surfactant protein C,SPC)、水通道蛋白5(aquaporin-5,AQP5)蛋白的动态表达情况。结果实验组肺组织逐渐出现肺泡间隔增厚,肺泡棘消失,肺泡腔增大,数目减少,肺泡结构简单化。与对照组相比,实验组肺组织中第1、3天TAZ、SPC、AQP5表达无差异(P>0.05);第7、14、21天实验组肺组织中TAZ的mRNA和蛋白表达明显降低,SPC的mRNA和蛋白表达明显升高,而AQP5的mRNA和蛋白表达量下降,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论高氧可致新生大鼠肺泡结构紊乱和肺发育停滞;由SPC、AQP5表达结果说明Ⅰ型肺泡上皮细胞损伤严重,Ⅱ型肺泡上皮细胞虽然数量有所增加但其分化能力明显下降,而TAZ表达量减少可能致使大量的Ⅱ型肺泡上皮细胞失去了分化为Ⅰ型肺泡上皮细胞的功能。

长链非编码RNA转移相关肺腺癌转录本-1在高氧致新生鼠支气管肺发育不良中的表达及意义

目的探讨长链非编码RNA转移相关肺腺癌转录本-1(lncRNA MALAT1)在高氧致新生大鼠支气管肺发育不良中的表达及其对肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)的作用。方法制备新生SD大鼠高氧致肺损伤模型(模型组,n=50,吸入氧浓度为80%~85%)及对照组(吸入空气,n=50)。在第1、3、7、14、21天取材并保留肺组织,应用石蜡包埋切片及苏木精-伊红染色检测肺组织的生理及病理改变;实时荧光定量聚合酶链式反应检测肺组织中lncRNA MALAT1的动态表达情况;Western blot检测肺组织及AECⅡ中表面活性蛋白C(SPC)的动态表达情况。从正常新生鼠肺组织提取AECⅡ,应用siRNA敲减lncRNA MALAT1,收集细胞并应用Western blot、免疫荧光检测SPC的变化。结果模型组肺组织逐渐出现肺泡间隔增厚,肺泡腔增大伴随肺泡棘消失等病理结构改变。与对照组比较,模型组大鼠肺组织中第1、3天lncRNA MALAT1、SPC表达无差异(P<0.05),第7、14、21天lncRNA MALAT1与SPC的表达明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。当lncRNA MALAT1受到抑制时,SPC表现出下调的趋势。结论高氧可导致新生大鼠肺发育的停滞,且肺泡结构紊乱及功能受损。LncRNA MALAT1的表达可能参与了高氧致新生鼠支气管肺发育不良的过程,lncRNA MALAT1的增加可能促进了AECⅡ的增殖。