临床分离金黄色葡萄球菌的耐药特点和MRSA分子分型

目的研究耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的耐药性及其基因分型。方法收集某院2014年1月—2015年11月检出的非重复金黄色葡萄球菌967株,检测其药敏结果及mecA抗性基因、杀白细胞素(PVL)基因;MRSA菌株经多重PCR进行葡萄球菌盒式染色体mec(SCCmec)分型、多位点序列分型(MLST)、金黄色葡萄球菌蛋白A基因(spa)分型、金黄色葡萄球菌附属因子调节子(agr)分型。结果 967株金黄色葡萄球菌共检出210株MRSA,MRSA检出率为21.72%;痰标本MRSA检出率高于皮肤软组织标本(68.09%vs 11.83%,P<0.05);金黄色葡萄球菌中未发现对万古霉素和利奈唑胺耐药菌株,MRSA对庆大霉素、四环素、红霉素、克林霉素、左氧氟沙星、环丙沙星、莫西沙星、呋喃妥因、利福平的敏感率均低于MSSA,差异均有统计学意义(均P<0.05);MRSA对复方磺胺甲口恶唑的敏感率高于MSSA,差异有统计学意义(P<0.05)。皮肤软组织分离的MRSA对庆大霉素、左氧氟沙星、环丙沙星、莫西沙星、利福平的敏感率为86.90%~95.24%,而痰分离的MRSA仅为1.56%~15.63%。967株金黄色葡萄球菌检测出210株携带mecA基因,10株携带PVL基因,210株MRSA中有8株未分型,占3.81%。MLST主要以ST239(177株)为主;SCCmec分型主要以Ⅲ型(177株)为主;spa分型主要以t 030(177株)为主;agr分型主要以Ⅰ型(196株)为主。结论该院MRSA菌株主要流行克隆ST239-MRSA-SCCmecⅢ-t030,耐药形势严峻,应加强医院内耐药菌株的监测。

汉坦病毒H8205株G1-人源IL-2融合基因疫苗的免疫效应

目的探讨汉坦病毒H8205株G1人源IL2融合基因疫苗(pcDNA3.1/HisB IL2G1)的免疫效应。方法将pcDNA3.1/HisB IL2G1融合基因疫苗通过肌肉注射途径免疫BALB/c小鼠,每隔3周免疫1次,共免疫3次;酶联免疫法(ELISA)检测抗汉坦病毒(HTNV)抗体;空斑减少中和试验检测免疫血清中和抗体效价;淋巴细胞增殖试验(MTT法)检测免疫小鼠的细胞免疫反应;动物保护试验以BALB/c小鼠为感染动物模型,在第3次免疫后2周,腹腔内注射100TCID50(半数感染量)HTNV,然后以免疫荧光法观察鼠肾切片,评价其保护力。结果pcDNA3.1/HisB IL2G1融合基因疫苗免疫后可刺激机体产生特异性抗体和中和抗体,中和效价为1∶20～1∶80。MTT法结果表明,免疫小鼠的脾淋巴细胞有特异性增殖反应。动物试验表明pcDNA3.1/HisB IL2G1融合基因疫苗能保护小鼠免受HTNV感染。结论pcDNA3.1/HisB IL2G1融合基因疫苗可诱导特异性体液免疫应答和较强的细胞免疫应答。

临床不同标本分离金黄色葡萄球菌的药物敏感性

目的了解某院金黄色葡萄球菌感染分布及药物敏感性。方法对2011年1月—2012年8月该院分离的520株金黄色葡萄球菌标本来源和药敏结果进行分析。结果 520株金黄色葡萄球菌中,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)总检出率为23.27%(121/520),其中痰标本MRSA检出率最高,达80.82%,其次是尿液(33.33%)、血液(25.00%)、引流物标本(18.31%),皮肤组织检出率最低,仅11.38%。未发现对万古霉素和利奈唑胺耐药的金黄色葡萄球菌;金黄色葡萄球菌对万古霉素、利奈唑胺、复方磺胺甲口恶唑、呋喃妥因均较敏感。皮肤组织来源的MRSA对庆大霉素、左氧氟沙星、环丙沙星、莫西沙星、利福平、四环素的敏感率高于其他标本来源的MRSA(P<0.05);对红霉素、克林霉素敏感率低于其他标本来源MRSA(P<0.05)。MRSA对青霉素完全耐药,其中社区感染MRSA对庆大霉素、左氧氟沙星、环丙沙星、莫西沙星、利福平、四环素的敏感率高于医院感染MRSA(P<0.05);对红霉素、克林霉素、复方磺胺甲口恶唑的敏感率低于医院感染MRSA(P<0.05)。结论金黄色葡萄球菌是该院分离的重要病原菌,耐药性强,临床应根据药敏试验结果合理使用抗菌药物。

全国省级卫生监督机构传染病及医疗领域现场检测能力分析

目的评价全国省级卫生监督机构在紫外线辐照度和表面洁净度现场快速检测专业的能力现状。方法全国29家省级卫生监督机构各派一名参赛选手,进行理论笔试和现场操作考核,现场考核模拟医疗机构监督检测现场,进行紫外线灯管辐照强度检测和物体表面洁净度的检测。比武满分100分,其中理论部分满分40分,现场操作各30分。结果综合成绩平均得分为84.6分,其中笔试成绩平均分为31.5分,紫外线辐照度平均得分为25.6,主要失分点为照度计探头放置位置和测量结果相对误差,表面洁净度检测平均得分为27.6,主要失分原因为结果表述不正确以及采样过程不规范。结论卫生监督机构应提高对现场快速检测工作的重视程度,推动现场快速检测能力的提高。

穴位疗法防治支气管哮喘缓解期的临床研究

目的:探讨穴位疗法防治支气管哮喘缓解期的临床研究。方法:本研究病例来源于2014年1月—2015年3月期间本院针灸门诊及住院的支气管哮喘缓解期患者60例,依据随机数字表法随机分为治疗组30例与对照组30例。对照组给予舒利迭治疗,治疗组在西医常规治疗之上结合穴位注射和穴位贴敷治疗。两组均以1周为1个疗程,共治疗4个疗程。比较两组哮喘症状积分、总有效率、肺功能指标、ECP、IL-5、IL-10、免疫功能指标水平。结果:治疗组哮喘症状积分治疗后和治疗后3个月低于同期对照组(P<0.05);治疗组治疗后总有效率(93.33%)高于对照组(70.00%)(P<0.05);治疗组治疗后随访3个月总有效率(100.00%)高于对照组(90.00%),但无统计学差异(P>0.05);治疗组FEV1、PEF治疗后和治疗后3个月高于同期对照组(P<0.05);治疗组ECP、IL-5、IL-10水平治疗后3个月明显低于治疗后(P<0.05);治疗组ECP、IL-5、IL-10水平治疗后和治疗后3个月低于同期对照组(P<0.05);治疗组CD_4^+、CD_4^+/CD_8^+水平治疗后和治疗后3个月高于同期对照组(P<0.05),而CD_8^+明显低于对照组(P<0.05)。结论:穴位疗法防治支气管哮喘缓解期临床疗效显著,可明显改善患者肺功能和免疫功能,降低患者ECP、IL-5、IL-10水平,具有重要研究价值。

电针对膝关节骨性关节炎的疗效以及对骨性关节炎患者血浆CXCL10、IL-1β含量的影响

目的：观察电针治疗膝骨关节炎的临床疗效及其对KOA患者血浆CXCL10及IL-1β浓度的影响。方法：将39名KOA患者均采用电针疗法,每天电针1次,6次为一个疗程,一共治疗2个疗程,疗程间休息1天。分析比较治疗前后WOMAC、NRS评分及患者血浆CXCL10、IL-1β含量。结果：（1）电针治疗前与治疗后比较,WOMAC、NRS评分均有统计学意义（P〈0.05）;（2）电针治疗后患者血浆CXCL10含量升高,具有统计学意义（P〈0.05）;（3）电针治疗后患者血浆IL-1β含量降低,与治疗前比较,具有显著性差异（P〈0.05）。结论：电针疗法能有效地缓解KOA患者的临床症状,特别是在镇痛方面。

电针治疗膝关节骨性关节炎的细胞分子机制研究进展

膝关节骨性关节炎（knee osteoarthritis,KOA）是一种退行性骨关节病,临床上多发于中老年人,尤其是肥胖的中老年女性。其临床表现多样,包括关节疼痛、关节活动受限、关节畸形等。目前认为其发病机制是由构成膝关节的各骨关节骨质增生、关节老化,膝关节发生退行性改变或慢性积累性关节磨损,导致关节局部产生无菌性炎症。由于本病发病率、致残率高,病程较长,目前临床上尚缺乏统一有特效的治疗手段[1]。

鲍曼不动杆菌体外药敏试验方法评价及敏感性分析

目的:评价纸片扩散法和仪器法检测鲍曼不动杆菌药敏试验可靠性,分析鲍曼不动杆菌对常用抗菌药物敏感性。方法:VITEK2-compact和纸片扩散法检测鲍曼不动杆菌对12种抗菌药物敏感性。结果:纸片法与VITEK2-compact检测鲍曼不动杆菌对阿米卡星药敏结果差异有显著性,其他抗菌药物药敏结果没有显著性差异;鲍曼不动杆菌对亚胺培南,美罗培南敏感率最高,高于50%,对其他所测抗菌药物敏感率均小于35%。结论:VITEK2-compact用于鲍曼不动杆菌药物敏感性检测存在缺陷;治疗鲍曼不动杆菌引起感染可选亚胺培南,美罗培南。

泌尿系感染的病原菌分布及大肠埃希菌耐药性分析

目的通过对泌尿系感染(UTI)病原菌进行统计分析,了解其种属分布以及耐药性规律,为临床用药提供参考依据。方法对送检尿液标本中分离出的884株病原菌进行鉴定和药敏试验,并进行统计学分析。结果分离出的病原菌中主要为大肠埃希菌(578株),占总数的65.4%,肠球菌和肺炎克雷伯菌分别排在第2位和第3位。大肠埃希菌中超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)阳性菌株384株,阳性率高达66.4%;其对亚胺培南、美罗培南、呋喃妥因、头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦、阿米卡星等抗菌药物的耐药率低于5.5%;对喹诺酮类抗菌药物的耐药率高于69%;对哌拉西林和氨苄西林的耐药率超过70%。结论 UTI患者感染的大肠埃希菌对常用的抗菌药物的耐药情况十分严峻,临床医生应当参考药敏结果,科学使用抗菌药物。

结直肠癌组织乳脂肪球表皮生长因子8蛋白表达与临床病理特征和患者生存率的关系

目的:探讨乳脂肪球表皮生长因子8(MFG-E8)蛋白在结直肠癌(CRC)组织中的表达及其与临床病理特征和患者生存率的关系。方法:留取手术切除CRC癌组织(CRC组)及相应癌旁组织(Control组)各88例,应用免疫组织化学法(SP法)检测癌组织及癌旁组织MFG-E8蛋白表达,统计分析各组MFG-E8蛋白高表达率的差异,以及CRC组中MFG-E8低表达组、阳性表达组和强阳性表达组患者临床病理因素和总生存率的差异。结果:CRC组癌组织MFG-E8蛋白高阳性表达率为73.86%(65/88),显著高于Control组28.41%(25/88)(P<0.01)。MFG-E8蛋白表达强度仅与淋巴结转移有关(P<0.05),而与患者年龄、临床T和M分类、临床分期及肿瘤分型无显著相关(P>0.05);MFG-E8阴性表达组及强阳性表达组患者总生存率均显著低于阳性表达组(P<0.01)。结论:MFG-E8在CRC患者癌组织中阴性表达及强阳性表达均可促进CRC的淋巴结转移,并提示预后较差。

脑钠肽和超敏C反应蛋白检测与慢性心力衰竭预后的相关性

目的探讨脑钠肽(BNP)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)联合检测在慢性心力衰竭(CHF)患者长期预后评估中的临床价值。方法检测武汉市第一医院2011年9月至2012年9月住院的慢性心力衰竭患者126例血浆BNP、hs-CRP水平,并与52例健康体检者对比,出院后随访1年,观察CHF患者心脏事件的发生情况。结果 CHF患者BNP、hs-CRP水平明显增高,CHF患者BNP、hs-CRP水平与对照组比较均有统计学意义。不同心功能分级患者之间BNP、hs-CRP水平随NYHA分级的增高而增高,且都高于对照组。结论血浆BNP、hs-CRP水平监测对CHF患者的预后评估具有重要的临床意义。

中国汉坦病毒H8205株G1、G2-人源IL-2融合基因免疫效果的实验研究

汉坦病毒属于布尼亚病毒科，可致人类肾综合征出血热和汉坦病毒肺综合征。我国是世界上受其危害最为严重的国家，寻找安全有效的疫苗是控制该病流行和发生的关键，很多学者对此已有所研究。因病毒存在较广泛的变异，故有着良好社会效益的汉坦病毒疫苗应是多价的，因为多价疫苗才能提供最大程度的交叉保护性。

区域性大型活动卫生保障现场快速检测指标体系的建立

目的探讨建立区域性大型活动卫生保障现场快速检测指标体系,为大型活动卫生保障及风险评价提供参考依据。方法选择22名专家进行Delphi咨询,对指标重要性赋分,确立餐饮食品、公共场所和生活饮用水指标体系及其权重。结果 22名专家的平均专业年龄为(17.0±7.9)年,两轮的应答率均为100%,权威系数分别为(0.85±0.07)、(0.86±0.07),协调系数分别为0.275(x^2=181.223,P=0.000),0.304(x^2=227.547,P=0.000),最终确定餐饮食品、公共场所、生活饮用水3个为一级指标,餐饮食品包括3个二级指标,9个三级指标;公共场所包括4个二级指标,10个三级指标;生活饮用水包括4个二级指标,4个三级指标,餐饮食品、公共场所、生活饮用水的平均权重依次为4.77、2.01、3.23。结论利用Delphi法建立的现场快速检测指标体系,将为区域性大型活动卫生保障和风险评价提供有效的参考依据。

全国省级卫生监督机构传染病及医疗领域现场检测能力分析

目的评价全国省级卫生监督机构在紫外线辐照度和表面洁净度现场快速检测专业的能力现状。方法全国29家省级卫生监督机构各派一名参赛选手,进行理论笔试和现场操作考核,现场考核模拟医疗机构监督检测现场,进行紫外线灯管辐照强度检测和物体表面洁净度的检测。比赛满分100分,其中理论部分满分40分,现场操作各30分。结果综合成绩平均得分为84.6分,其中笔试成绩平均分为31.5分,紫外线辐照度平均得分为25.6,主要失分点为照度计探头放置位置和测量结果相对误差,表面洁净度检测平均得分为27.6,主要失分原因为结果表述不正确以及采样过程不规范。结论卫生监督机构应提高对现场快速检测工作的重视程度,推动现场快速检测能力的提高。

汉坦病毒H8205株IL-2/G1融合基因在Vero细胞中的稳定表达

目的探讨外源性IL-2/G1融合基因在非洲绿猴肾细胞(Vero)获得稳定表达的可行性,为汉坦病毒基因工程疫苗的研制提供一定的实验基础。方法将汉坦病毒H8205株G1的cDNA重组人源IL-2基因后克隆到真核表达载体pcDNA3.1/His,形成重组真核表达质粒pcDNA3.1/His-IL-2-G1,在脂质体介导下,将其导入Vero细胞,通过G418筛选获得阳性克隆,并继续培养6周,然后通过间接免疫荧光、ELSIA、SDS-PAGE电泳等方法检测IL-2-G1基因在Vero细胞中的稳定表达情况。结果成功构建重组质粒pcDNA3.1/His-IL-2-G1,其片段插入方向正确。经间接免疫荧光和SDS-PAGE电泳证实,转染了真核表达质粒pcDNA3.1/His-IL-2-G1后在Vero细胞培养上清和胞浆中有融合蛋白的表达,其相对分子量为78000u,与预期的相符合。经人IL-2ELISA检测试剂盒检测证实在培养上清和细胞裂解物所表达的融合蛋白有IL-2特性。结论在脂质体介导下,外源性IL-2/G1融合基因能够成功导入Vero细胞并获得稳定表达。

肺腺癌中MFG-E8的表达及其临床意义

目的探讨乳脂球表皮生长因子-8(milk fat globule epidermal growth factor-8,MFG-E8)在肺腺癌中的表达及其临床意义。方法采用组织芯片及免疫组化法检测90例肺腺癌组织及癌旁组织中MFG-E8的表达,分析其与临床病理学特征和预后的相关性。结果MFG-E8蛋白在癌旁组织和肺腺癌组织中的阳性率分别为14.44%(13/90)、94.44%(85/90)。MFG-E8在肺腺癌组织中的表达明显高于癌旁组织,差异有显著性(P<0.001)。MFG-E8高表达与肿瘤大小密切相关(P<0.05)。MFG-E8高表达患者的总生存率明显低于低表达患者(P<0.001)。结论MFG-E8在肺腺癌的发生、发展中具有一定作用,可能是肺腺癌不良预后的潜在标志物。

Ghrelin促进乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖的分子机制

目的:探讨生长激素释放肽(Ghrelin)促进乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖的分子机制。方法:乳腺癌细胞MDA-MB-231经Ghrelin、Ghrelin受体(growth hormone secretagogue receptor,GHSR)抑制剂[DLys3]-GHRP-6或哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of Rapamycin,m TOR)抑制剂雷帕霉素(Rapamycin)处理后,MTT或Brd U实验检测MDA-MB-231细胞的增殖能力;Western blot检测MDA-MB-231细胞GHSR表达及m TOR、p70S6K和S6磷酸化水平。结果:增殖实验结果表明Ghrelin增强MDA-MB-231细胞增殖能力;Western blot检测发现Ghrelin激活MDA-MB-231细胞m TOR、p70S6K和S6磷酸化,[DLys3]-GHRP-6或Rapamycin消除Ghrelin促进MDA-MB-231细胞增殖效应,同时抑制Ghrelin诱导的m TOR、p70S6K和S6磷酸化。结论:Ghrelin通过与GHSR结合激活MDA-MB-231细胞m TOR/p70S6K/S6信号途径促进MDA-MB-231细胞增殖。