家兔小花棘豆中毒与血液生化指标的相关性研究

【目的】探讨家兔血清生化指标与小花棘豆中毒(Oxytropis glabra DC Poisoning,OgP)的关系,为小花棘豆中毒的诊治提供依据。【方法】以12只小花棘豆中毒家兔与10只正常家兔为研究对象,检测血清中谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(AKP)、乳酸脱氢酶(LDH)、α-甘露糖苷酶(AMA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)活性以及丙二醛(MDA)、尿素氮(BUN)、肌酐(CRE)、血糖(GLU)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLO)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)和极低密度脂蛋白(VLDL-C)含量。采用t检验对两组资料进行差异显著性比较后,再采用简单相关分析方法对各指标与小花棘豆中毒的关系进行分析。【结果】与正常对照相比,小花棘豆中毒家兔血清的AST、ALT、AKP、LDH、MDA、BUN、CRE、GLU、TC、GLO、LDL-C值均极显著升高(P<0.01),AMA、SOD、GSH-Px、CAT、TG和ALB极显著下降(P<0.01),HDL-C值显著下降(P<0.05),TP和VLDL-C含量差异不显著(P>0.05)。与小花棘豆中毒相关的主要因素有AMA、CAT、GLU、LDH、GSH-Px、AKP、TG和CRE,并建立回归方程:OgP=0.714-0.078AMA-0.069CAT+0.038GLU+0.047LDH+0.045AKP。【结论】血清AMA、CAT、GLU、LDH、GSH-Px、AKP、TG和CRE对家兔小花棘豆中毒的早期诊断、治疗、疗效观察和转归判断具有一定参考价值。

小花棘豆中毒对家兔脏器指标的影响

为探讨小花棘豆(Oxytropis glabra DC)对家兔脏器指标的影响,试验挑选健康22只,分为两组,其中,试验组12只[按照10 g/(d·kg体重)的剂量饲喂小花棘豆干粉];对照组10只(饲喂青干草和少量精料),试验期为70 d,试验结束后取其脏器,计算脏器指数。结果显示,与正常对照相比,试验组家兔脑指数、肝脏指数、肾脏指数、肾上腺指数、睾丸指数、卵巢指数和肺脏指数增大,心脏指数、脾脏指数和胰脏指数下降,部分指标差异达到显著或极显著(P<0.05或P<0.01),与小花棘豆中毒相关性最强的指标为脑指数;但小花棘豆中毒对家兔胃肠道指标无明显影响。结果表明,小花棘豆中毒导致家兔肝、肾、脑等实质性器官损伤。

小花棘豆中毒对大鼠睾丸α-甘露糖苷酶的影响

旨在探讨小花棘豆对大鼠睾丸α-甘露糖苷酶(AMA)的影响,揭示小花棘豆的毒性作用机理。将72只大鼠随机分为4组,即对照组和试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组。将小花棘豆全草粉碎后,按Ⅰ组添加150g/kg(含苦马豆素30mg/kg)、Ⅱ组添加300g/kg(含苦马豆素60mg/kg)、Ⅲ组添加450g/kg(含苦马豆素90mg/kg)的比例制作混合饲料,饲喂至典型临床症状出现为止。攻毒后每7d每组随机采集2只大鼠的睾丸,检测大鼠睾丸AMA活性及表达的变化。结果显示,在63d的试验过程中,试验组及对照组大鼠睾丸高尔基体α-甘露糖苷酶Ⅱ(AMA1)和溶酶体α-甘露糖苷酶(AMA2)均有表达,但各试验组表达转录水平与对照组差异显著,试验Ⅰ组大鼠AMA1和AMA2的表达与对照组差异不显著(P>0.05),但试验Ⅲ组大鼠AMA1和AMA2的表达均显著低于对照,随着试验的进行,抑制效果愈加明显。说明,小花棘豆中毒可影响大鼠睾丸AMA的活性及其基因的转录表达。

小花棘豆生物碱体内抗菌活性研究

【目的】研究小花棘豆总生物碱的体内抗菌活性。【方法】分别腹腔注射和皮肤感染金黄色葡萄球菌及化脓链球菌建立小鼠感染模型,皮肤感染组以皮肤细胞修复和炎性细胞浸润为评价指标,腹腔注射组以小鼠存活率为评价指标,观察不同剂量小花棘豆生物碱对感染小鼠的治疗作用。并对正常小鼠灌胃小花棘豆生物碱,观察7 d内的毒性反应。【结果】小花棘豆生物碱具有较好的抗菌活性。其保护金黄色葡萄球菌和化脓链球菌感染小鼠的ED50分别为10.38和14.51 mg/kg,小花棘豆生物碱对正常小鼠的LD50为1 644.3 mg/kg,对金黄色葡萄球菌和化脓链球菌的化疗指数分别为158.4和113.3;皮肤感染组小花棘豆生物碱的治愈率高于对照组。【结论】小花棘豆生物碱对金黄色葡萄球菌和化脓链球菌具有较强的抗菌作用,具有一定的应用前景。

小花棘豆黄酮对热应激肉仔鸡抗氧化能力的影响

为研究在热应激条件下日粮中添加不同水平的小花棘豆黄酮对肉仔鸡抗氧化能力的影响,本试验采用单因子试验设计,选用160只1日龄AA雄性肉仔鸡,随机分为4组,对照组饲喂基础日粮,试验组在基础日粮中分别添加10、30、50 mg/kg的小花棘豆黄酮,观察其对肉仔鸡自由基代谢和抗氧化酶活性的影响。结果表明,添加小花棘豆黄酮可不同程度地提高肉仔鸡的总抗氧化能力(T-AOC),提高幅度最高可达248.05%;饲喂小花棘豆黄酮可显著提高肉仔鸡血清和肌肉组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽还原酶(GR)的活性(P<0.05),显著降低丙二醛(MDA)的含量(P<0.05),并呈现出明显的时间和剂量效应。由此可见,小花棘豆黄酮可降低热应激对肉仔鸡造成的损伤。

小花棘豆生物碱对表皮葡萄球菌的抗菌作用及生物膜形成的影响

探讨小花棘豆生物碱对表皮葡萄球菌的抗菌作用及其对细菌生物膜的抑制作用。以表皮葡萄球菌为研究对象,通过微量肉汤稀释法测定最小抑菌浓度（MIC）和最小杀菌浓度（MBC）,微量板半定量法测定其对表皮葡萄球菌生物膜形成的影响,以去离子水和氯化钠检测小花棘豆生物碱对细菌细胞壁的渗透能力影响。结果表明,小花棘豆生物碱对表皮葡萄球菌的抑菌作用较强,其MIC和MBC分别为1.6mg/mL和3.2mg/mL,1~1/4MIC的小花棘豆生物碱可明显抑制表皮葡萄球菌生物膜的形成,而且1~1/8MIC的小花棘豆生物碱对表皮葡萄球菌细胞壁的渗透能力有一定的影响。说明小花棘豆生物碱对表皮葡萄球菌具有抗菌作用,对其生物膜形成具有明显的抑制作用。

小花棘豆中毒对和田羊瘤胃溶纤维丁酸弧菌的影响

通过研究小花棘豆(Oxytropis glabra DC)对和田羊瘤胃溶纤维丁酸弧菌数量的影响,探讨小花棘豆中毒对绵羊纤维素降解效率的影响。将12只和田羊随机分为对照组、试验Ⅰ组和试验Ⅱ组。试验组分别按10g/kg和20g/kg的剂量饲喂小花棘豆,至典型临床症状出现为止。攻毒前及攻毒后每隔7d取瘤胃液,利用巢式PCR技术检测瘤胃液中溶纤维丁酸弧菌数量的变化,并检测甘油三酯消失率和纤维素降解率。结果显示,与对照组相比,试验羊瘤胃液中溶纤维丁酸弧菌数、甘油三酯消失率和纤维素降解率均极显著下降。试验表明,小花棘豆中毒可显著影响和田羊瘤胃溶纤维丁酸弧菌数量和纤维素降解能力,且具有一定的时间和剂量效应关系。

一株苦马豆素降解菌的分离与鉴定

旨在从小花棘豆(Oxytropis glabra DC)生长环境中分离可降解其主要毒性成分苦马豆素(Swainsonine,SW)的微生物。通过富集驯化培养,以SW为唯一碳源,从埋置小花棘豆的土壤中分离得到1株SW降解菌。形态学观察表明该降解菌为革兰氏阴性短小杆菌,无荚膜,无鞭毛;生理生化检测发现该降解菌氧化酶阳性,不产吲哚,不水解淀粉;16SrDNA序列比对分析表明该降解菌属于假单胞菌科假单胞菌属微生物,序列比对发现与恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)同源性最高。在SW无机盐液体培养基中培养24h,菌株对100mg/L SW的降解率为30.12%,延长培养时间不能提高其降解SW的能力,但可在高质量浓度SW(1 000mg/L)的处理下生长;该降解菌在无SW刺激的条件下转接50代,对100mg/L SW的降解率无明显影响。

小花棘豆中毒对家兔脑组织α-甘露糖苷酶的影响

探讨小花棘豆对家兔脑组织α-甘露糖苷酶(AMA)的影响,进一步揭示小花棘豆的毒性作用机理。将24只家兔随机分为4组,即对照组和试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组。将小花棘豆全草粉碎后,按试验Ⅰ组添加15%,试验Ⅱ组添加30%,试验Ⅲ组添加45%的比例制作混合饲料,饲喂至典型临床症状出现为止。攻毒后第14、35、70 d每次每组随机采集2只家兔的全脑,检测家兔不同脑区AMA活性及表达的变化。结果显示,小花棘豆中毒可不同程度地导致家兔脑组织AMA活性和表达下降,从第14d起,所有试验组小脑AMA活性及mRNA表达量均显著低于对照组(P﹤0.05),试验Ⅲ组家兔大脑和丘脑AMA活性及mRNA表达量均显著低于对照组(P﹤0.05),但3个试验组海马和脑干AMA活性及mRNA表达量与对照差异均不显著(P﹥0.05)。结果表明,不同剂量小花棘豆均可降低家兔脑组织AMA活性及其mRNA表达量,小脑、大脑和丘脑是其主要作用的靶区,而且小脑的变化较大脑和丘脑明显。

和田羊大脑皮质神经细胞体外培养及鉴定

以出生24 h的和田羊羊羔为实验对象,利用胰蛋白酶消化大脑皮质组织后采用贴壁法纯化细胞后进行体外培养,并通过形态学观察、Nissl′s染色、NSE/Hoechst 33258荧光双染、Neuron-specific classⅢβ-Tublin免疫组化染色、CCK-8法和MTT法检测细胞活性及纯度,研究和田羊大脑皮质神经细胞的体外培养特性。结果表明：培养基中加入3μg/m L阿糖胞苷可提高神经细胞纯度,在体外培养至1~8 d的和田羊大脑皮质神经细胞形态和核型均为正常。结果表明成功建立了和田羊大脑皮质神经细胞体外培养模型。

盐穗木总生物碱不同提取方法的比较

为确定盐穗木总生物碱最佳提取工艺,采用超声波提取法、索氏提取法、乙醇加热提取法、酸水提取法四种方法提取盐穗木总碱,考察粗提物的提取率,确定最佳的提取方法。结果显示:超声波提取法提取率最高,总碱含量为0.993 mg/100mg,总碱质量百分数为0.23%;酸水提取法提取率其次,总碱含量为0.520 mg/100mg,总碱质量百分数为0.22%;索氏提取法,总碱含量为0.477 mg/100mg,总碱质量百分数为0.04%;乙醇加热提取法,总碱含量为0.404 mg/100mg,总碱质量百分数为0.04%。研究表明:以氯仿为溶剂,用超声波提取法提取盐穗木总碱,提取率最高。

苦马豆素单克隆抗体的制备与鉴定

本试验采用苦马豆素(swainsonine,SW)人工抗原SW-OVA免疫接种BALB/c小鼠,通过杂交瘤技术建立了1株能稳定分泌SW单克隆抗体的杂交瘤细胞1F10,杂交瘤细胞染色体数目为45~50对。经间接ELISA检测,该株细胞培养上清中抗体效价为1∶25 600,诱生腹水效价为1∶80 000。单克隆抗体的亚型为IgG1,亲和力解离常数为1.14×1010,腹水抗体纯化后纯度可达98%,回收率80%,SDS-PAGE凝胶电泳可见单克隆抗体的轻链、重链分子质量分别为25和50ku,Western blotting检测抗体能特异性的识别SW。其线性检测范围为4~128μg/mL(R2=0.9969),与BSA、明胶、多聚赖氨酸、α-甘露糖苷等无交叉反应。本试验制备的SW单克隆抗体为免疫学检测SW和免疫学防制家畜疯草中毒奠定基础。

日粮内添加盐穗木对卡拉库尔羊瘤胃内环境的影响

采用自身对照法试验设计,将9只健康的卡拉库尔公羊分为3组,即对照组、试验组Ⅰ和试验组Ⅱ,研究在日粮中添加盐穗木对卡拉库尔羊瘤胃内环境的影响,结果显示:日粮中添加100 g盐穗木有降低卡拉库尔羊瘤胃液pH值和氨氮(NH3-N)含量的趋势,但盐穗木添加量为200 g时会提高瘤胃液pH值;添加100 g盐穗木可提高瘤胃中菌体蛋白含量,添加量为200 g时会降低菌体蛋白含量;日粮中添加盐穗木对卡拉库尔羊瘤胃液总挥发性脂肪酸(TVFA)含量无影响,有增大乙酸/丙酸比的趋势。

特克斯县哈萨克羊品种资源概况

本文介绍了特克斯县哈萨克羊的品种资源、所处的自然生态环境、存栏数、分布状况、生产性能、品种形成与发展等方面的基本概况,并就该品种的存在问题与产业化发展提出了相应对策,供畜牧工作者参考借鉴。

卡拉库尔羊日粮中添加盐穗木的安全性试验

试验通过分析日粮中添加盐穗木对卡拉库尔羊机体肝功、肾功的影响,进行安全性评价。将9只羊随机分为对照组、试验Ⅰ组和试验Ⅱ组,对照组不饲喂盐穗木,试验Ⅰ组和试验Ⅱ组每日分别添加100 g与200 g盐穗木。每隔7天采血一次,分析血清中谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)、尿素氮(BUN)、肌酐(CRE)、碱性磷酸酶(AKP)、乳酸脱氢酶(LDH)的变化。结果表明,对照组与试验组的血清GPT、GOT、AKP、LDH、CRE差异均不显著(P>0.05),试验组血清BUN值低于对照组,可能为饲喂盐穗木使试验羊的饮水量增加所致。

盐穗木总生物碱提取工艺研究

目的:利用正交试验设计优选冷浸法提取盐穗木有效成分的工艺条件。方法:以盐酸小檗碱的含量为指标,通过L9(33)正交试验设计,对提取工艺的溶媒浓度、溶媒用量和浸提时间3个因素进行优选,以筛选出盐穗木的最佳提取工艺条件。结果:影响提取的主次因素为:溶媒用量>溶媒浓度>浸提时间。优选得到的最佳提取工艺条件:75%乙醇提取,物料比为1∶10,浸提3d。结论:该工艺条件不仅提高了醇浸膏得率和总生物碱含量,而且可节省溶剂用量,降低成本。

紫外分光光度法测定盐穗木生物碱含量

探讨盐穗木中有效成分生物碱含量测定方法,用紫外分光光度法测定盐穗木中生物碱的含量,选定波长为280 nm。结果显示,测定在0.079-0.573 mg/mL范围内线性关系良好,回归方程为A=69.20 C+0.019,R=0.999(n=5)。采用紫外分光光度法测定盐穗木中生物碱含量具有精度高、稳定性好、操作简便的特点,是提取盐穗木全草生物碱的有效测定方法。

特克斯县草地生态畜牧业建设的思考及建议

本文对特克斯县草地生态畜牧业发展情况进行系统分析,从保护生态环境、增加牧民收入、促进区域产业发展等方面阐述了发展草地生态畜牧业的必要性,结合当地的资源状况分析了发展草地生态畜牧业的优势所在,提出了要提高思想认识、引导多方投入、建立服务体系、提高牧民组织化程度等政策建议。

和田羊睾丸支持细胞的体外培养与分离鉴定

【目的】研究和田羊睾丸支持细胞的体外培养特性。【方法】取新生和田羊睾丸组织,利用两步酶消化后,采用差速贴壁法纯化细胞进行体外培养,并通过形态学观察、HE染色、AKP染色、油红O染色、吖啶橙染色、罗丹明123染色、免疫组化染色、RTPCR和MTT法检测细胞活性及纯度。【结果】培养基中加入2.00%血清浓度的DMEM/F-12可提高支持细胞纯度,在体外培养传至20代的和田羊睾丸支持细胞形态和核型均为正常;所培养的细胞内波形蛋白表达及标志基因SCF和GDNF的表达均为阳性。【结论】本试验成功建立了和田羊睾丸支持细胞体外培养模型。