miR-145-5p对肾缺血/再灌注损伤大鼠的肾脏保护作用及其机制

目的 观察miR-145-5p对肾缺血/再灌注(I/R)损伤大鼠肾损伤的影响,并探讨其肾脏保护作用是否与通过蛋白激酶B/雷帕霉素靶蛋白(AKT/mTOR)信号通路而调控自噬水平有关。方法 将40只SD大鼠随机分成Sham组、I/R组、I/R+agomir组、I/R+agomir+LY组,每组10只;除Sham组外均建立肾I/R模型,I/R+agomir组和I/R+agomir+LY组在建模操作前3 d经尾静脉注射miR-145-5p agomir 10 nmol/L,I/R+agomir+LY组同时腹腔注射AKT特异性抑制剂TLY294002 50 mg/kg,Sham组和I/R组经尾静脉注射等量PBS溶液。各组分组处理2 d,比较血清尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)水平及肾组织损伤评分,肾组织miR-145-5p表达,肾组织细胞凋亡率及促凋亡蛋白Bax、抗凋亡蛋白Bcl-2表达,肾组织自噬相关蛋白LC3B荧光表达强度、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、肌球蛋白样Bcl-2结合蛋白(Beclin1)、自噬相关蛋白5(Atg5)表达,肾组织AKT/mTOR通路相关蛋白p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR。结果 与Sham组比较,I/R组大鼠肾组织miR-145-5p表达明显降低,I/R+agomir组和I/R+agomir+LY组均明显升高(P均<0.01)。与Sham组比较,其他三组肾组织细胞凋亡率及损伤评分均升高,且I/R组和I/R+agomir+LY组升高更明显(P均<0.05)。与Sham组、I/R+agomir组比较,I/R组、I/R+agomir+LY组大鼠血清BUN、Scr水平及肾组织Bax表达、LC3B荧光表达强度、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin1表达均升高,Bcl-2、Atg5蛋白表达及p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR均降低(P均<0.05);Sham组、I/R+agomir组上述指标比较,I/R组、I/R+agomir+LY组上述指标比较均无统计学差异(P均>0.05)。结论 miR-145-5p可以通过激活AKT/mTOR信号通路来抑制晚期自噬的过度激活,从而减轻肾I/R大鼠的肾损伤,发挥肾脏保护作用。

骨髓间充质干细胞来源外泌体对缺血/再灌注损伤大鼠的肾脏保护作用及其机制

目的观察骨髓间充质干细胞(BMSCs)来源外泌体对缺血/再灌注(I/R)损伤大鼠的肾脏保护作用,并探讨其机制。方法40只雄性SD大鼠随机分成4组:假手术组(Sham组)、缺血/再灌注组(I/R组)、缺血/再灌注+外泌体组(I/R+Exo组)、缺血/再灌注+外泌体转染miR-145-5p拮抗剂组(I/R+Exo antagomir组)。I/R+Exo组大鼠经尾静脉注射外泌体后制备肾脏I/R模型。I/R+Exo antagomir组大鼠经尾静脉注射转染了miR-145-5p拮抗剂的外泌体后制备肾脏I/R模型。I/R组大鼠经尾静脉注射等量的PBS溶液后制备肾脏I/R模型。Sham组大鼠经尾静脉注射等量的PBS溶液后给予切开及关闭腹腔操作,不予血管夹闭。肾组织再灌注24 h后取肾脏组织和颈动脉血,观察肾组织病理变化并进行损伤评分,检测血清血尿素氮(BUN)、血清肌酐(Scr)含量,检测肾组织miR-145-5p表达,测算肾组织细胞凋亡率,检测肾组织细胞凋亡蛋白裂解半胱氨酸蛋白酶-3(cleaved caspase 3)的表达,观察肾组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量和活性氧簇(ROS)生成情况,检测肾组织炎症因子诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)及核因子κB(NF-κB)的表达。结果与Sham组相比,I/R组和I/R+Exo antagomir组大鼠肾组织切片显示肾小球坏死和肥大,小管膨胀及铸型形成;与I/R组相比,I/R+Exo组大鼠肾小球坏死和肥大情况显著减轻,小管膨胀及铸型形成明显减少。I/R组和I/R+Exo antagomir组肾组织损伤评分均高于Sham组和I/R+Exo组(P均<0.05),且I/R+Exo组肾组织损伤评分高于Sham组(P<0.05);I/R组和I/R+Exo antagomir组血清BUN、Scr水平均高于Sham组和I/R+Exo组(P均<0.05)。I/R组、I/R+Exo antagomir组大鼠肾组织miR-145-5p相对表达量均低于Sham组和I/R+Exo组(P均<0.05),且Sham组大鼠肾组织miR-145-5p相对表达量低于I/R+Exo组(P<0.05)。I/R组和I/R+Exo antagomir组大鼠肾组织细胞凋亡率及凋亡蛋白cleaved caspase 3相对表达量均高于Sham组和I/R+Exo组(P均<0.05),且I/R+Exo组大鼠肾组织细胞凋亡率及凋亡蛋白cleaved caspase 3相对表达量高于Sham组(P<0.05)。I/R组和I/R+Exo antagomir组大鼠肾组织SOD水平均低于Sham组和I/R+Exo组(P均<0.05),I/R组和I/R+Exo antagomir组大鼠肾组织MDA水平及ROS相对生成量均高于Sham组和I/R+Exo组(P均<0.05)。I/R组和I/R+Exo antagomir组大鼠肾组织iNOS、IL-6、TNF-α、NF-κB水平均高于Sham组和I/R+Exo组(P均<0.05)。结论BMSCs来源外泌体对I/R损伤大鼠的肾脏具有保护作用,其机制可能与外泌体传递的miR-145-5p抑制了肾组织氧化应激和炎症反应有关。

别嘌醇联合非布司他对高尿酸慢性肾病患者尿酸水平及肾功能的影响

目的观察别嘌醇联合非布司他对高尿酸(HUA)慢性肾病患者尿酸(UA)水平及肾功能的影响。方法将126例高尿酸慢性肾病患者随机分为对照组和试验组,每组63例。对照组给予别嘌醇0. 25 g,每天1次,口服;试验组在对照组的基础上给予非布司他40 mg,每天1次,口服。2组均治疗6个月。观察2组患者的肾功能、电解质和生化指标变化。结果治疗后,对照组与试验组UA分别为(466. 62±95. 74),(417. 96±75. 48)μmol·L-1,血钾水平分别为(1. 64±1. 02),(1. 27±0. 87) mmol·L-1,血钠分别为(120. 42±3. 01),(118. 78±2. 69) mmol·L-1,血清中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)分别为(621. 84±167. 52),(688. 02±183. 01) ng·mL-1,差异均有统计学意义(均P <0. 05)。结论非布司他联合别嘌醇治疗高尿酸慢性肾病能有效改善患者的肾功及生化指标,纠正电解质失衡,延缓肾损害进展。