京昆高速公路服务区绿化植物应用研究

对京昆高速公路河北段服务区绿化模式及植物应用进行了研究。根据植物应用现状提出了3类模式:(1)广场休闲绿地型:此模式以井陉服务区为代表,用于车、人停留活动较多的服务区。(2)庭院绿地型:以涿州、定兴、顺平、曲阳、行唐、石家庄服务区为代表,园林绿化充分体现庭院休闲性质。(3)农业生态观光园绿地型:以唐县为模式,适合满城、灵寿,绿化充分结合当地农业特色。同时对京昆路段服务区绿化应用的树种进行综合评价,评出一类树种27种;二类树种20种;三类树种34种;四类树种14种。针对绿化提升改造进行了树种规划,确定了不同绿化模式的基调树种、骨干树种、一般树种、1a生植物、宿根花卉、蔬菜及农作物种类,为提升改造和其相类似地区其它高速公路服务区树种选择提供了依据。

杠柳ISSR引物的筛选及PCR反应体系的优化

为建立适用于杠柳ISSR分子标记研究的扩增体系,进一步利用ISSR标记研究杠柳遗传多样性,探讨了杠柳ISSR分子标记中的各影响因素,分别对河北11个不同地区杠柳基因组DNA进行PCR扩增,在Taq MasterMix(康为世纪)基础上对影响ISSR-PCR扩增结果的模板DNA浓度、循环次数、引物退火温度进行梯度筛选。结果表明:在100条通用引物中共筛选出34条扩增条带清晰、整齐的ISSR引物;确立了适合杠柳ISSR分子标记的反应体系:总反应体积25μL,其中Taq MasterMix(含DNA聚合酶、MgCl_2、dNTPs、反应缓冲液以及稳定剂)12.5μL,模板DNA 1μL(70ng/μL),正向引物和反向引物各1μL(10μmol/L)。该体系的确立为今后利用ISSR技术对杠柳种质资源的遗传多样性分析奠定了技术基础。

河北省不同地区杠柳遗传多样性的ISSR分析

通过ISSR分子标记技术,对采自河北石家庄、保定、邢台、邯郸、张家口的11个杠柳(Periploca sepium Bunge)样品进行遗传多样性分析。结果表明,从100条通用引物中共筛选出34条适用于杠柳ISSR研究的多态性引物;对11个供试样品进行PCR检测,进一步筛选出8条多态性好、稳定性高的引物,共检测出79个ISSR位点,多态性位点63个,占79.7%;遗传相似系数(GS)变化范围在0.454 5~0.854 5,8对多态性引物多态信息含量值变化范围为0.747~0.884,平均为0.827;11份供试样品聚类分为三大类,聚类相对复杂,呈一定的地域相关性;ISSR分子标记适用于杠柳遗传多样性研究,且杠柳遗传多样性丰富。

纳米磁珠介导牡丹花粉转基因技术的初步分析

磁性纳米颗粒(magnetic nanoparticles,MNPs)可以吸附DNA,作为一种新型基因载体应用于转基因育种。本研究旨在探索MNPs介导外源基因进入牡丹花粉,为利用携有外源基因的花粉进行授粉,获得转基因种子提供依据,本研究制备了MNPs与DNA的复合物;利用扫描电子显微镜与透射电子显微镜观察了牡丹花粉的形态结构;用花粉离体萌发法测定了供试牡丹花粉磁转染前后的生活力。结果表明:MNPs与DNA的质量比为1:1~1:10时,MNPs均可以与DNA稳定结合,并可以保护DNA免受酶的消化作用;牡丹花粉为长球形,萌发孔为三孔沟类型,位于萌发沟内;‘凤丹’牡丹、‘京红’牡丹及紫斑牡丹的花粉均具有较高的萌发力,且经磁转染后的三种牡丹花粉萌发力保持在50%以上,能够用于正常杂交授粉。本研究首次采用四氧化三铁纳米磁转化技术介导牡丹花粉转基因,弥补了花粉介导牡丹转基因方法研究的空白,从而有助于牡丹分子育种进程的推进。