[目的]研究不同的胚龄、移植季节以及胚胎数量对转人乳铁蛋白基因(hLF)体细胞克隆山羊生产效率的影响.[方法]用奶山羊的转hLF基因成纤维细胞为供体细胞生产克隆胚胎,并以不同的胚龄、胚胎数量,在不同的季节移植给同期的受体山羊.[结果...[目的]研究不同的胚龄、移植季节以及胚胎数量对转人乳铁蛋白基因(hLF)体细胞克隆山羊生产效率的影响.[方法]用奶山羊的转hLF基因成纤维细胞为供体细胞生产克隆胚胎,并以不同的胚龄、胚胎数量,在不同的季节移植给同期的受体山羊.[结果]移植1细胞期和2-8细胞期胚胎受体羊的妊娠率(分别是17.95%和28.57%)、产羔率(分别是12.82%和14.29%)显著高于移植桑椹胚、囊胚的受体羊(3.70%和0,P〈0.05);转hLF基因克隆胚胎在秋季移植效率最高,虽然秋季和春季受体羊妊娠率(分别是19.57%和18.18%)与冬季(10.34%)差异不显著,但秋季受体羊产羔率(13.04%)显著高于冬季(1.72%,P〈0.05);虽然移植10-20枚克隆胚胎的受体羊妊娠率(18.18%)显著高于移植5-9枚胚胎的受体羊(7.89%),但是由于其流产率高,两者产羔率差异并不显著(7.89% vs 6.36%,P〉0.05).[结论]转基因克隆山羊胚胎移植试验的最适季节是秋季,最好移植激活后体外培养2 d内的胚胎.展开更多
为开发能高效检测卵泡刺激素(follicle-stimulating hormone,FSH)制品生物活性的新方法,选取猪卵泡颗粒细胞,利用转录组测序技术对比FSH处理组(40 m IU/m L)和空白对照组细胞中基因的表达情况,分析并获得大量受FSH调控的候选基因,运用...为开发能高效检测卵泡刺激素(follicle-stimulating hormone,FSH)制品生物活性的新方法,选取猪卵泡颗粒细胞,利用转录组测序技术对比FSH处理组(40 m IU/m L)和空白对照组细胞中基因的表达情况,分析并获得大量受FSH调控的候选基因,运用荧光定量聚合酶链式反应验证FSH处理后显著上调的基因,并进一步利用FSH浓度梯度(0、20、40、60、80、100 m IU/m L)处理卵泡颗粒细胞。结果显示,基因OLR1、LHCGR、SCARA5和S100A12的表达量呈现FSH浓度依赖性升高。在3倍递增的FSH浓度梯度(0、1、3、9、27、81、243、729 m IU/m L)下观察各基因表达量的变化,发现在0~243 m IU/m L的FSH浓度范围内,LHCGR基因的表达量与FSH浓度呈高度线性相关(R2=0.982)。因此,可通过检测FSH刺激条件下细胞中LHCGR基因的表达量,来评估FSH制品的生物学效价。展开更多
文摘[目的]研究不同的胚龄、移植季节以及胚胎数量对转人乳铁蛋白基因(hLF)体细胞克隆山羊生产效率的影响.[方法]用奶山羊的转hLF基因成纤维细胞为供体细胞生产克隆胚胎,并以不同的胚龄、胚胎数量,在不同的季节移植给同期的受体山羊.[结果]移植1细胞期和2-8细胞期胚胎受体羊的妊娠率(分别是17.95%和28.57%)、产羔率(分别是12.82%和14.29%)显著高于移植桑椹胚、囊胚的受体羊(3.70%和0,P〈0.05);转hLF基因克隆胚胎在秋季移植效率最高,虽然秋季和春季受体羊妊娠率(分别是19.57%和18.18%)与冬季(10.34%)差异不显著,但秋季受体羊产羔率(13.04%)显著高于冬季(1.72%,P〈0.05);虽然移植10-20枚克隆胚胎的受体羊妊娠率(18.18%)显著高于移植5-9枚胚胎的受体羊(7.89%),但是由于其流产率高,两者产羔率差异并不显著(7.89% vs 6.36%,P〉0.05).[结论]转基因克隆山羊胚胎移植试验的最适季节是秋季,最好移植激活后体外培养2 d内的胚胎.
文摘为开发能高效检测卵泡刺激素(follicle-stimulating hormone,FSH)制品生物活性的新方法,选取猪卵泡颗粒细胞,利用转录组测序技术对比FSH处理组(40 m IU/m L)和空白对照组细胞中基因的表达情况,分析并获得大量受FSH调控的候选基因,运用荧光定量聚合酶链式反应验证FSH处理后显著上调的基因,并进一步利用FSH浓度梯度(0、20、40、60、80、100 m IU/m L)处理卵泡颗粒细胞。结果显示,基因OLR1、LHCGR、SCARA5和S100A12的表达量呈现FSH浓度依赖性升高。在3倍递增的FSH浓度梯度(0、1、3、9、27、81、243、729 m IU/m L)下观察各基因表达量的变化,发现在0~243 m IU/m L的FSH浓度范围内,LHCGR基因的表达量与FSH浓度呈高度线性相关(R2=0.982)。因此,可通过检测FSH刺激条件下细胞中LHCGR基因的表达量,来评估FSH制品的生物学效价。