IL-17和Th17细胞信号通路参与高原低氧环境小鼠肾脏组织炎症发生的作用机制

目的基于转录组学测序技术研究高原低氧条件下IL-17与Th17细胞信号通路诱导小鼠肾脏组织炎症发生机制。方法C57BL/6小鼠分别饲养于海拔4200 m(高原组)和海拔400 m(平原组)的环境下30 d,无菌取小鼠肾脏组织采用转录组测序技术(RNA-Seq)测序,对差异表达基因(DEGs)进行KEGG通路富集分析与GO注释分析;采用HE染色法观察小鼠肾脏组织病理学改变;分析AmiGO数据库获得炎症反应基因;RT-qPCR法验证通路中炎症因子的mRNA表达量。结果转录组学测序结果显示,高原低氧环境共鉴定出3007个DEGs,相比于平原组,高原组中1349个DEGs上调(P<0.05),1658个DEGs下调(P<0.05)。HE染色结果显示,与平原组小鼠相比,高原组小鼠肾间质中炎细胞浸润,肾小管上皮细胞不规则排列,部分肾小管上皮细胞肿胀。KEGG富集分析显示,DEGs主要富集于IL-17信号通路、Th17细胞信号通路、B细胞受体信号通路、T细胞受体信号通路、MAPK信号通路、TNF信号通路、麻疹信号通路等多个炎症相关通路,其中IL-17信号通路和Th17细胞信号通路显著富集。RT-qPCR结果显示,高原组IL-17信号通路和Th17细胞信号通路中TGFβ-R、RoRyt、TRAF6、MAPK9、mTOR、CHUK等关键基因均出现上调或下调差异表达(P<0.05),下游炎症因子S100A8、S100A9和MMP9发生显著上调(P<0.01)。结论高原低氧条件通过促进IL-17信号通路和Th17细胞信号通路下游炎症因子的表达从而诱导小鼠肾脏组织炎症反应发生。

老挝万象省纳勐铜多金属矿床花岗岩化学特征分析

在前人资料的基础上通过野外勘察和室内分析,对老挝国万象省纳勐铜多金属矿床地质背景进行总结,并对从该区采集的矽卡岩样品开展了地球化学特征研究,进而探究该矿床的成因及规律.主要侵入体岩性为黑云母二长花岗岩,地球化学研究表明,过铝质钙碱性花岗岩对成矿有利,Pb、Co、Sn、Mo、Ba等成矿元素可能来源于侵入体,但花岗岩并不是理想的成矿母岩.岩浆岩具有多期的特征,大部分属于I型岛弧花岗岩.岩浆活动具有一定的规律.

早期胃癌血清特异标志物过氧化物酶4核酸适配体的筛选、鉴定与应用

胃癌是世界上死亡率第三的重大疾病,而在早期阶段却有着良好的治愈率和生存率。因此,找到针对早期胃癌的特异性标志物从而提高早期胃癌的检出率,是目前亟待解决的问题。在本实验室的早期研究中,发现过氧化物酶4(peroxiredoxin-4,PRDX4)有极大的潜能作为早期胃癌的特异性标志物,并且由于蛋白质结构的特殊性,能够分泌至血清中,为早期胃癌的无创化诊断提供了可能。本文为寻找血清中PRDX4蛋白的特异性适配体,通过消减-SELEX方法找到9种适配体。经特异性和亲和力分析后,证实其中Ap-EGACS-11在9种适配体中具有最高的特异性和亲和力。随后在适配体的验证研究中证实,相对于进展期胃癌病人血清、结直肠癌病人血清和正常人血清,Ap-EGACS-11对早期胃癌病人血清的检出率最高。该结果表明,PRDX4具有早期胃癌特异性血清标志物的潜能,且Ap-EGACS-11可直接作为早期胃癌的检测试剂。

胃癌生物标志物的相关研究进展

根据2012年国际癌症研究机构首次公布的全球癌症统计结果,胃癌是最常见的癌症,仅低于肺癌、乳腺癌、结肠直肠癌和前列腺癌。胃癌的治疗手段效果有限,虽然中晚期的胃癌通过化疗能延长部分患者的生存期,但大多数化疗疗效局限且维持时间短,2年生存率小于10%。

低氧对鼠枸橼酸杆菌感染小鼠肠道固有免疫功能的影响

目的 探讨低氧对细菌感染小鼠肠道固有免疫功能的影响。方法 将C57BL/6野生型小鼠随机分为常氧对照组(NC)、常氧感染组(NB)、低氧对照组(HC)和低氧感染组(HB)。以感染肠道鼠枸橼酸杆菌的小鼠为模型,分别在海拔2 260 m(大气压582mmHg, PO;121.6mmHg)和海拔5 000 m(大气压405mmHg, PO;84.7mmHg)处建立细菌感染模型,观察小鼠体重和结肠形态学变化;同时检测小鼠结肠、脾脏和血清中的中性粒细胞和巨噬细胞的相关细胞因子水平。结果 (1)HB组体重明显低于NB组(P<0.05);(2)HB组结肠组织有明显的黏膜破损和严重的炎细胞浸润,且HB组病理组织评分明显高于NB组(P<0.05);(3)HB组血清和结肠、脾脏中的中性粒细胞、巨噬细胞的炎性细胞因子及趋化因子明显低于NB组(P<0.05);(4)各感染组血清和结肠、脾脏中的中性粒细胞与巨噬细胞相关细胞因子及趋化因子水平均与相应对照组存在差异,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 低氧会降低小鼠肠道中性粒细胞和巨噬细胞的趋化性,造成小鼠肠道固有免疫功能的降低;低氧可加重鼠枸橼酸杆菌感染导致的小鼠肠道病理变化。

新早期胃癌标志物PRDX4通过清除ROS促进胃癌的发生发展（英文）

胃癌是全球第四大最常见的癌症,也是全球癌症中引起死亡的第二大原因。为了降低胃癌的死亡率,目前亟需解决的问题是发现新的早期胃癌特异性的标志物,提高早期胃癌的检出率,从而从根本上解决胃癌死亡率高的问题。实验室前期研究发现过氧化物酶4 (Peroxiredoxin 4,PRDX4)具有早期胃癌标志物的潜能,文中通过建立恶性转化模型及转化细胞过表达等方法,研究PRDX4在转化细胞中的作用。结果显示PRDX4通过减少转化细胞中活性氧(Reactive oxygen species,ROS)含量,使细胞处在利于生长增殖的微环境中,从而促进细胞发生恶性转化,即PRDX4通过清除ROS促进胃癌的发生发展。

SELEX法筛选宫颈癌前病变核酸适配子

构建随机ssDNA文库,通过SELEX技术,以正常、炎性宫颈脱落细胞为反筛细胞,以上皮内低级别病变(CIN1)、上皮内高级别病变(CIN2、CIN3)和鳞状细胞癌脱落细胞为正筛细胞,经过12轮筛选特异性适配子高度富集得到宫颈癌前病变适配子库,经特异性、亲和力分析和细胞免疫荧光确立高特异性适配子CIN-Ap4可作为诊断宫颈癌前病变生物标志物,为宫颈癌前病变分子诊断奠定理论基础,提供新思路。利用Prime Premier 5.0设计构建了随机ssDNA文库并根据文库两端固定序列设计引物,对对称PCR和间接不对称PCR中的退火温度、循环数以及上、下游引物浓度比等条件进行优化,分析确定50μL反应体系中对称PCR的最佳反应条件为:最佳退火温度为49.5℃,最佳循环数为15个循环;间接不对称PCR的最佳反应条件为:50μL反应体系中上、下游引物浓度的最佳比例为80∶1,最佳循环数为35个循环。实验结果表明成功构建了寡核苷酸文库,在最适PCR条件下可获得理想的dsDNA和ssDNA,并具有良好的重复性,为顺利筛选适配子提供保证。

过氧化物酶-4与胃癌发生发展的相关性

目的分析过氧化物酶-4(peroxidase-4,Prx4)与胃癌发生发展的相关性。方法利用甲基硝基亚硝基胍(N-methyl-N′-nitro-N-nitrosoguanidine,MNNG)诱导正常胃黏膜细胞GES-1构建癌变细胞模型,通过细胞形态、增殖率、迁移能力及集落形成能力的改变,确定MNNG最适浓度及最适诱变时间;经划痕试验、MTT法、集落形成试验、Western blot法和RT-PCR法进一步检测Prx4与胃黏膜上皮细胞恶性转化过程及转化细胞发展过程的相关性。结果MNNG最适浓度为8×10-5 mol/L,最适诱变时间为16 h。细胞恶性转化过程中呈现出细胞相对增殖率、迁移能力、集落形成能力整体升高的趋势;Prx4蛋白表达水平在0~16 h逐渐升高,16~24 h有所下降,而此时Prx4基因mRNA转录水平明显升高。转化细胞发展过程中呈现出细胞相对增殖率、迁移能力、集落形成能力整体逐渐升高的趋势;随着培养时间的增加,Prx4蛋白表达水平逐渐降低,Prx4基因m RNA转录水平无明显变化;但培养24 h时,恶性转化细胞mRNA基因转录水平显著高于正常胃黏膜细胞和胃腺癌细胞(P <0. 01)。结论正常胃黏膜细胞GES-1诱变16 h时已基本发生转化。细胞水平上,Prx4在转化过程中高表达,因此,Prx4主要参与并促进细胞转化过程。