miR-17-5p和MMP2在百草枯致肺上皮-间质转化中的机制研究

目的揭示miR-17-5p和MMP2在百草枯(Paraquat,PQ)中毒所致的肺上皮-间质转化(Epithelial-mesenchymal transition,EMT)中的作用。方法构建PQ中毒致肺EMT的细胞模型(A549细胞),经15、30、60μmol/L的PQ染毒6 d,采用Western blot或qRT-PCR检测模型中EMT相关基因E-钙黏附蛋白(Epithelia cadherin,E-cadherin)和α平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)的表达情况。采用Western blot或qRT-PCR检测模型中基质金属蛋白酶2(Matrix metalloproteinase 2,MMP2)、miR-17-5p的表达情况,通过转染miR-17-5p的类似物(mimic)或抑制剂(inhibitor)来研究miR-17-5p对MMP2的调控作用。结果Western blot结果显示,E-cadherin在30μmol/L PQ染毒组表达下调(P=0.018),在60μmol/L PQ染毒组下调更明显(P=0.009);α-SMA在30μmol/L PQ染毒组α-SMA表达上调(P=0.037),在60μmol/L PQ染毒组上调更明显(P=0.008);MMP2在30μmol/L PQ染毒组MMP2表达上调(P=0.016),在60μmol/L PQ染毒组上调更明显(P=0.007)。qRT-PCR结果显示,E-cadherin在30μmol/L PQ染毒组表达下调(P=0.010),在60μmol/L PQ染毒组下调更明显(P<0.001);α-SMA在30μmol/L PQ染毒组表达上调(P=0.003),在60μmol/L PQ染毒组上调更明显(P<0.001);MMP2在30μmol/L PQ染毒组表达上调(P=0.004),在60μmol/L PQ染毒组上调更明显(P=0.002)。qRT-PCR结果提示,30μmol/L PQ染毒组miR-17-5p表达下调(P=0.010),60μmol/L PQ染毒组miR-17-5p表达下调更明显(P=0.001)。mimic作用后MMP2表达下调(P=0.002),而inhibitor作用后MMP2表达上调(P=0.005)。结论MMP2可作为miR-17-5p靶基因,其表达受miR-17-5p调控,其相互作用参与PQ致肺EMT的过程中。

非编码RNA及竞争性内源RNA调控网络在肺纤维化中的研究进展

非编码RNA(Non-protein-coding RNA,ncRNA)及竞争性内源RNA(Competing endogenous RNA,ceRNA)调控网络是近年来国内外的研究热点,它们可参与多种疾病相关基因的转录及转录后调控。肺纤维化是一种预后极差的慢性肺间质疾病,本文就ncRNA及ceRNA调控网络在肺纤维化中的研究进展进行综述,为肺纤维化的诊治提供新的研究思路。