热疗联合CTL对裸鼠移植瘤的抑瘤效应研究

目的:研究热疗(HT)联合CTL(致敏的T淋巴细胞)对裸鼠移植瘤的抑瘤效应。方法:建立50只裸小鼠舌癌Tca8113移植瘤动物模型,随机分为5组(对照组、加热处理组、致敏CTL处理组、加热+致敏CTL处理组、致敏CTL+加热组)。于肿瘤接种后8周处死各组动物,提取肿瘤组织标本,行病理学检查。并采用TUNEL法检测肿瘤组织的凋亡情况,运用流式细胞仪检测肿瘤细胞的凋亡率,采用SABC法检测裸鼠移植瘤HSP70的表达水平。结果:HT+CTL+IL-2组和CTL+IL-2+HT有显著的抑瘤效应,抑瘤率为68.85%和61.48%,且该组的肿瘤细胞凋亡率和HSP70表达OD值与其余对照组比较均有显著性差异(P<0.01)。结论:热疗联合致敏CTL的免疫治疗有显著的抑瘤效应,HSP70-PC(热休克蛋白70免疫复合物)起到了抗原提呈和肿瘤抗原疫苗作用。

基于MAPK信号通路研究miR-218对牙髓干细胞增殖及成牙分化的作用

目的基于丝裂原活化蛋白激酶/细胞外信号调节激酶(MAPK/ERK)信号通路研究微小RNA(miR)-218对牙髓干细胞(DPSCs)增殖及成牙分化的影响。方法将含miR-218抑制物的重组质粒、阴性对照质粒转染至DPSCs,分别设为Anti-miR-218组、空载组,采用p38 MAPK抑制剂SB203580(5 mmol/L)处理12 h,设为SB203580组,取不作处理细胞为空白组;转染8 h后p38 MAPK抑制剂SB203580处理Anti-miR-218组,设为Anti-miR-218+SB 203580组,培养至48 h进行后续实验。观察转染效率,测定4组miR-218相对表达量;测定各组继续培养24、48、72 h细胞增殖情况;比较各组诱导分化3、5、7 d碱性磷酸酶(ALP)活性;观察诱导分化情况,比较诱导21 d矿化结节面积百分比、结节数量;测定各组诱导14 d牙本质涎磷蛋白(DSPP)、骨桥蛋白(OPN)表达水平,p38 MAPK、p-p38 MAPK、ERK、p-ERK蛋白相对表达量,计算p-p38 MAPK/p38MAPK、p-ERK/ERK。结果稳定转染48 h后,Anti-miR-218组、空载组转染效率均> 75%;转染含miR-218抑制物的重组质粒后,Anti-miR-218组miR-218表达明显降低;与空白组、空载组比较,Anti-miR-218组细胞继续培养24、48、72 h时细胞增殖能力增强,诱导分化3、5、7 d ALP活性增强,诱导21 d矿化结节面积百分比升高,结节数量增加,诱导14 d DSPP、OPN表达水平升高,p-p38 MAPK/p38 MAPK、p-ERK/ERK升高;SB203580组、Anti-miR-218+SB203580组、Anti-miR-218组对DPSCs增殖与分化的促进作用依次增强。结论敲减miR-218基因可促进DPSCs增殖、分化,其作用机制可能与激活MAPK信号通路,上调p38 MAPK、ERK磷酸化有关。

正畸片段弓技术在牙再植过程中的应用

目的：回顾性分析正畸片段弓技术应用于牙再植过程中的疗效。方法收集2010～2012年就诊的恒前牙全脱位患者共20例（36颗牙），应用正畸片段弓技术固定再植牙，评价其疗效。结果按照疗效评价的标准，显效有29颗牙，占80．6％；有效有5颗牙，占13．9％；失败有2颗牙，占5．5％。结论将正畸片段弓技术运用于牙全脱位后的牙再植过程中，效果显著，有利于再植牙的存活。

细胞膜片技术修复大鼠颅骨缺损的实验研究

目的探讨利用大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)体外构建成骨细胞膜片并用于修复大鼠颅骨缺损的可行性。方法将大鼠BMSCs以高密度接种于培养皿中,并在体外向成骨细胞诱导3周,待形成膜片后用细胞刮刮起膜片,实验组将成骨细胞膜片植入大鼠8 mm直径颅骨缺损区,在非成骨诱导条件下诱导形成的细胞膜片植入大鼠8 mm直径颅骨缺损区为对照组,同时设置空白组。术后6、12周每组分别取材,进行大体观察、X线检测和组织学检查。结果在体外成功构建出成骨细胞膜片,将膜片植入大鼠颅骨缺损处12周后观察到实验组较对照组有更多的新骨形成,组织学检查证实为新骨。结论本实验成功构建成骨细胞膜片,为人类骨缺损的修复提供了新的方法。