神经纤毛蛋白-1的干扰RNA通过诱导结直肠癌细胞p27核转位影响细胞自噬与凋亡水平的研究

目的探究RNA干扰神经纤毛蛋白-1(neuropilin-1,NRP-1)对结直肠癌(colorectal cancer,CRC)细胞自噬与凋亡的影响及其机制。方法将人结直肠癌细胞系DLD-1随机分为对照组、sh-NC组、sh-NRP-1组,进行慢病毒感染后收集各组细胞,实时荧光定量PCR和Western blotting测定细胞的感染效果,CCK-8法检测细胞增殖活性,免疫荧光染色观察细胞内p27蛋白的亚细胞定位,Western blotting检测细胞质与细胞核内p27蛋白表达变化,透射电子显微镜观察细胞自噬情况,Western blotting检测细胞自噬相关蛋白表达水平,流式细胞术检测细胞凋亡水平。结果感染sh-NRP-1慢病毒液的细胞中NRP-1 mRNA相对表达量与蛋白相对表达量均显著降低(P<0.05);与对照组和sh-NC组比较,sh-NRP-1组细胞增殖活性显著下降,细胞核内p27荧光染色明显增强,细胞质内p27蛋白相对表达量显著下调,而细胞核内p27蛋白相对表达量显著上调,可见较多双层膜的自噬小体,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值显著升高,Beclin-1蛋白表达显著上调而p62蛋白表达显著下调,同时,细胞凋亡率显著增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论RNA干扰NRP-1能够抑制CRC细胞增殖活性,促进细胞自噬与凋亡,该作用可能与其调控p27蛋白的亚细胞定位有关。

基于FAK/ERK途径探讨NRP-1对结直肠癌细胞的影响

目的探究神经纤毛蛋白-1(neuropilin-1,NRP-1)对结直肠癌(colorectal cancer,CRC)细胞行为的作用,及其对黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)/胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinases,ERK)信号途径的影响。方法将CRC细胞系DLD-1随机分为对照组、CT-707组、sh-NRP-1组、sh-NRP-1+CT-707组,按分组使用sh-NRP-1慢病毒液感染细胞与FAK抑制剂CT-707处理细胞,通过荧光显微镜观察感染慢病毒后细胞内增强型绿色荧光蛋白表达情况,实时荧光定量PCR和Western blot法检测细胞内NRP-1mRNA与蛋白的表达变化。CCK-8法和EdU染色检测细胞增殖能力,细胞划痕实验观察细胞划痕愈合率,Transwell实验检测细胞迁移与侵袭,Western blot法测定细胞内FAK/ERK相关蛋白表达情况。结果感染sh-NRP-1重组慢病毒的DLD-1细胞中可见明显绿色荧光,细胞内NRP-1mRNA相对表达量和蛋白相对表达量均显著下调(P<0.05),表明转染成功。与对照组比较,CT-707组和sh-NRP-1组的细胞增殖活性显著下降,EdU阳性百分比显著降低,细胞划痕愈合率显著降低,细胞迁移数目与侵袭数目均显著减少,FAK蛋白磷酸化水平和ERK蛋白磷酸化水平均显著下调(P<0.05);与sh-NRP-1组比较,sh-NRP-1+CT-707组细胞增殖活性显著下降,EdU阳性百分比和细胞划痕愈合率均显著降低,细胞迁移数目与侵袭数目也均显著减少,FAK蛋白磷酸化水平和ERK蛋白磷酸化水平均显著下调(P<0.05)。结论下调NRP-1表达能够发挥抑制CRC细胞增殖、迁移及侵袭的作用,该机制可能与调控FAK/ERK信号转导途径有关。

GLP-1受体激动剂与肿瘤的研究进展

糖尿病和肥胖与多种癌症的风险增加有关。随着糖尿病和肥胖在全球的发病率持续上升,肿瘤负担的加重将有令人担忧的趋势。GLP-1受体激动剂具有良好的控制血糖、减轻体重的作用,近年来广泛应用于糖尿病及肥胖患者中,但其对糖尿病或肥胖患者的肿瘤风险和获益尚不明确。本文就GLP-1受体激动剂在甲状腺癌、胰腺癌、前列腺癌及肥胖、糖尿病相关肿瘤中的研究及进展做一综述。