参杞强精颗粒对慢性疲劳综合征脾肾阳虚证大鼠免疫调节作用研究

目的:探讨参杞强精颗粒对慢性疲劳综合征(CFS)脾肾阳虚证模型大鼠的影响以及免疫调节作用。方法:将50只无特定病原体(SPF)级健康雄性斯泼累格·多雷(SD)大鼠随机分为正常对照组,模型对照组,参杞强精颗粒高剂量组、中剂量组、低剂量组,采用游泳力竭实验造成大鼠体力疲劳,慢性束缚应激造成大鼠心理疲劳,同时给予番泻叶煎煮液灌胃造成脾肾阳虚证候,构建CFS脾肾阳虚证大鼠模型,造模成功后分别按照各组剂量灌胃,连续给药21 d后,测定各组大鼠的胸腺和脾脏指数,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白A(IgA)浓度以及细胞因子白细胞介素2(IL-2)、白细胞介素6(IL-6)和γ干扰素(IFN-γ)含量,MTT法检测脾脏T、B淋巴细胞增殖能力,流式细胞法检测各组大鼠外周血T淋巴细胞亚群分布情况。结果:行为学结果显示,模型大鼠的体质量增长缓慢,精神萎靡,摄食水量减少,活动减少,便质稀软,力竭游泳时间减少,悬尾静止时间增加。药物干预后,与模型组比较,各给药组大鼠精神状态、体质量、摄食水量均显著改善,力竭游泳时间增加、悬尾静止时间减少(P<0.01或P<0.05);参杞强精颗粒各剂量组能显著提升大鼠胸腺和脾脏指数,提高IgG、Ig M、IgA浓度和IL-2、IL-6、IFN-γ的含量,显著提高脾脏T、B淋巴细胞增殖能力,也能提高CD3+、CD4+T淋巴细胞百分率和CD4+/CD8+T比值,降低CD8+T淋巴细胞百分率,差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。结论:参杞强精颗粒能显著改善慢性疲劳综合征脾肾阳虚证大鼠免疫功能,缓解疲劳症状,且具有很好的免疫调节作用。

薄层色谱法定性鉴别小柴胡颗粒中的柴胡、甘草

目的完善小柴胡颗粒的质量标准。方法采用薄层色谱法分别鉴别小柴胡颗粒中的柴胡、甘草。结果各供试品色谱中,在与对照品及对照药材色谱相应的位置上显相同颜色的斑点,色谱清晰,附近无杂质斑点干扰。结论本方法专属性强,可更好地控制小柴胡颗粒制剂质量。

剑麻皂素降血糖作用的研究

采用四氧嘧啶致糖尿病小鼠模型、肾上腺素引起的高血糖大鼠模型以及正常小鼠研究剑麻皂素的降血糖作用,在口服给药后,测定各模型动物的血糖水平。结果显示,剑麻皂素能明显降低四氧嘧啶糖尿病小鼠的血糖水平,对肾上腺素高血糖大鼠也有降血糖作用,对正常小鼠血糖没有影响。剑麻皂素对糖尿病动物具有明显的降血糖作用。

剑麻皂素对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用及其机制

目的探讨剑麻皂素对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。方法采用大脑中动脉闭塞法制备局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠模型,模型建立成功后,选取大鼠60只,按随机数字表法分为模型组、三七通舒组,剑麻皂素高、中、低剂量组,每组12只。模型组灌服蒸馏水,三七通舒组灌服三七通舒胶囊,剑麻皂素高、中、低剂量组分别按450、225、113 mg/(kg·d)灌服剑麻皂素。对比各组神经行为学评分、脑梗死体积、脑组织含水量及血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、乳酸(LA)水平。结果剑麻皂素高、中剂量组大鼠神经行为学评分明显低于模型组(P<0.05),绝对脑梗死体积和相对脑梗死体积明显小于模型组(P<0.05),剑麻皂素高剂量组脑含水量明显低于模型组(P<0.05)。剑麻皂素高剂量组大鼠血清SOD、GSH-Px水平明显高于模型组,MDA、LA水平明显低于模型组(P<0.05);剑麻皂素中剂量组大鼠血清SOD水平明显高于模型组(P<0.05),MDA水平低于模型组(P<0.05)。结论剑麻皂素对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤具有明显保护作用,其机制可能与清除自由基、减轻LA性酸中毒程度有关。

参杞强精颗粒对H_(2)O_(2)诱导小鼠睾丸间质细胞氧化应激损伤的作用

目的探讨参杞强精颗粒对过氧化氢H_(2)O_(2)诱导的小鼠睾丸间质细胞TM3氧化应激损伤的作用。方法以小鼠睾丸间质细胞为细胞模型,用MTT法检测参杞强精颗粒对正常TM3的细胞毒性作用;以500µmol/L H_(2)O_(2)诱导损伤TM3细胞4 h后复制氧化应激损伤模型,采用CCK-8法检测不同浓度参杞强精颗粒对H_(2)O_(2)损伤TM3细胞增殖活力的影响;分别给予参杞强精颗粒(0.4、0.8和1.6mg/mL)干预处理24h后,用酶联免疫吸附试验检测细胞上清液中睾酮分泌水平、一氧化氮(NO)、乳酸脱氢酶(LDH)、8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)含量及谷胱甘肽-S转移酶(GST)的活性;同时检测细胞内活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)及总抗氧化能力(TAOC)的含量;实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测睾酮合成酶类固醇合成快速调节蛋白(StAR)、胆固醇侧链裂解酶(P450scc)、17β-羟基固醇脱氢酶(17β-HSD)mRNA表达。结果参杞强精颗粒在浓度为0.05~2.50 mg/mL时对正常TM3细胞无毒性作用。与H_(2)O_(2)损伤模型组比较,参杞强精颗粒各剂量组能提高TM3细胞增殖活率(P<0.05)。与H_(2)O_(2)模型组比较,参杞强精颗粒各剂量组提高细胞上清液中睾酮水平和NO含量,增加GST活性,降低LDH和8-OHdG含量(P<0.05)。与H_(2)O_(2)损伤模型组比较,参杞强精颗粒各剂量组降低细胞内ROS、MDA含量,同时增强CAT、SOD和TAOC的活性(P<0.05)。与H_(2)O_(2)模型组比较,参杞强精颗粒各剂量组能提高睾酮合成酶StAR、P450scc、17β-HSD mRNA相对表达量(P<0.05)。结论参杞强精颗粒对H_(2)O_(2)诱导睾丸间质细胞氧化应激损伤具有保护作用,其机制可能通过清除氧自由基、抗氧化应激损伤及促进睾酮合成有关。

美迪紫檀素及其衍生物的植物来源及药理作用的研究进展

美迪紫檀素是一种紫檀类母核结构的黄酮类化合物,为鸡血藤的主要活性成分之一,具有抗肿瘤、促进骨生长、保护神经系统等药理作用,开发潜力较大。本文对美迪紫檀素及其衍生物的植物来源分布、药理作用、药物动力代谢学的研究进展进行综述,为促进美迪紫檀素的开发利用提供参考。

高效液相色谱法测定广西壮药毛郁金中姜黄素的含量

采用Ultimate(XB-C18)色谱柱,以乙腈-4%冰乙酸(48∶52)为流动相,流速1.0 ml/min,检测波长430nm,柱温为室温,建立高效液相色谱法(HPLC)测定广西壮药材毛郁金中姜黄素含量的方法。结果表明,姜黄素在0.00992～0.08928μg范围内的峰面积与其浓度呈良好线性关系(r=0.9995),平均回收率为101.28%,RSD为1.67%(n=6)。本方法准确,快速,重现性好,可以作为广西壮药材毛郁金的含量测定方法。

岗松总黄酮对脂多糖诱导RAW264.7细胞炎症的影响

为探讨岗松总黄酮(GSH)的抗炎活性机制,通过NF-κB信号通路,研究脂多糖(LPS)诱导RAW264.7细胞炎症的保护作用。实验采用噻唑蓝(MTT)法检测GSH对RAW264.7细胞增殖活性的影响,采用酶联免疫法(ELISA)检测GSH对白介素(IL-1β、IL-8)及转换生长因子β(TGF-β)的影响,采用蛋白印迹法(WB)检测细胞中IκBα蛋白相对表达,采用实时定量基因扩增荧光检测法(QPCR)检测细胞中NF-κB p65的mRNA基因表达。研究结果表明,GSH处理细胞后,可促进RAW264.7细胞增殖(P<0.05),抑制IL-1β、IL-8、TGF-β含量(P<0.01),上调IκBα蛋白的相对表达(P<0.05或P<0.01),抑制NF-κB p65的mRNA基因表达(P<0.01)。推测岗松总黄酮抑制NF-κB信号通路可能是其抗炎活性作用机制之一。

HPLC法测定广西壮药血风藤中大黄素的含量

目的:建立广西壮药材血风藤中大黄素含量测定方法。方法:采用HPLC法,Inertsil ODS-SP(5μm,4.6 mm×150 mm)为色谱柱,流动相:甲醇-0.1%磷酸(70∶30),流速:1.0 mL/min,检测波长:254 nm,柱温:室温。结果:大黄素在9.92-89.28(μg/mL)范围内,峰面积与其浓度呈良好线性关系(r=0.9999),平均加样回收率为101.28%,RSD%=1.67%(n=6)。结论:本法准确,快速,重现性好,可作为血风藤的含量测定方法。

腹针“引气归元”穴组治疗脾虚证的临床研究

目的:探讨腹针"引气归元"穴组治疗脾虚证的临床疗效。方法:将60例脾虚证患者随机分为腹针治疗组20例、体针对照组20例和中药四君子汤对照组20例,进行治疗观察。结果:腹针治疗组对脾虚证主症食欲减退、神疲懒言、肢体倦怠、食后腹胀、大便溏泻等有明显疗效,腹针治疗组总有效率为95.8%,优于体针对照组(P﹤0.05),与中药四君子汤对照组相近(P>0.05)。该法对脾虚证舌象、脉象、红细胞及血色素、唾液负荷分泌水平亦有改善作用。结论:腹针"引气归元"穴组治疗脾虚证有较好疗效。

腹针治疗慢性腹泻的临床观察

目的:观察腹针"调脾气"、"引气归元"治疗慢性腹泻的临床疗效。方法:将78例慢性腹泻病人随机分为腹针治疗组43例,体针对照组35例,进行治疗观察。结果:腹针"调脾气"、"引气归元"治疗组对患者每日腹泻次数、粪便性状、纳差、腹痛、腹胀、倦怠乏力、腰膝酸软等症状有明显疗效,腹针治疗组总有效率为92.5%,体针对照组总有效率为81.6%(P<0.05)。结论:腹针疗法对慢性腹泻有很好疗效。

中医药治疗牙周炎概况

牙周炎是侵犯牙龈和牙周支持组织的慢性破坏性疾病。其主要特征为牙周袋形成和袋壁的炎症。牙槽骨吸收和牙齿松动，同时伴见牙龈红肿出血等症状。它是导致成年人牙齿丧失的主要原因。由于牙周炎是口腔中最常见的疾病，成年人中患病率高达90％，病程长，治愈率低，给患者造成极大的痛苦，损害健康，影响生命质量。

基于NF-κB/TNF-α/IL-6通路探讨拟黑多刺蚁活性组分对脂多糖诱导抑郁小鼠神经炎症的影响

目的:探讨拟黑多刺蚁活性组分对脂多糖(LPS)所诱导抑郁小鼠神经炎症的影响及其可能的作用机制。方法:将60只雄性C57BL/6J小鼠随机分为正常对照组、模型组、氟西汀(20 mg/kg)阳性对照组及拟黑多刺蚁活性组分高(8 g/kg)、中(4 g/kg)、低(2 g/kg)剂量组,连续给药10 d,第11、12天采用LPS(1 mg/kg)腹腔注射诱导小鼠抑郁模型。对小鼠进行行为学实验(强迫游泳实验、悬尾实验),ELISA法检测小鼠血清神经递质和炎症因子,HE、Tunel染色观察小鼠脑组织病理损伤和凋亡情况,Real-time PCR检测小鼠脑组织中IL-6 mRNA表达,Western Blot检测小鼠脑组织中NF-κB/TNF-α/IL-6通路相关蛋白表达。将RAW264.7细胞分为空白对照组、模型组及拟黑多刺蚁活性组分高(2 mg/mL)、中(1 mg/mL)、低(0.5 mg/mL)浓度组,加入脂多糖(1μg/mL)造模,Western Blot检测各组细胞中NF-κB/TNF-α/IL-6通路相关蛋白表达。结果:动物实验中,与正常对照组比较,模型组小鼠的游泳不动时间、悬尾不动时间、血清TNF-α水平及脑组织IL-6 mRNA和p-NF-κB、IL-6、TNF-α蛋白表达显著升高(P<0.05或P<0.01),脑组织病理变化明显,脑组织神经元凋亡增加。与模型组比较,除拟黑多刺蚁活性组分低剂量组小鼠血清TNF-α水平及中剂量组小鼠血清TNF-α、DA、BDNF水平差异无统计学意义(P>0.05)外,拟黑多刺蚁活性组分各组小鼠游泳不动时间、悬尾不动时间、血清TNF-α水平、脑组织IL-6 mRNA表达及脑组织IL-6、TNF-α、p-NF-κB蛋白表达显著降低,血清5-HT、DA、BDNF水平显著升高(P<0.05或P<0.01),脑组织病理学明显改善,脑组织神经元凋亡明显减少。体外实验中,与空白对照组比较,模型组RAW264.7细胞IL-6、TNF-α、p-NF-κB蛋白表达显著升高(P<0.05或P<0.01),与模型组比较,拟黑多刺蚁活性组分各组RAW264.7细胞TNF-α、p-NF-κB蛋白表达显著降低,高浓度组IL-6蛋白表达显著降低(P<0.05或P<0.01)。结论:拟黑多刺蚁活性组分可通过抑制NF-κB/TNF-α/IL-6通路的激活,改善小鼠抑郁症神经炎症。

壮药透骨香对胶原诱导型关节炎大鼠的干预效果及作用机制

目的探讨壮药透骨香对类风湿性关节炎大鼠的干预效果及作用机制。方法将70只SD大鼠随机分为空白组10只及胶原诱导型关节炎(CIA)模型组60只。造模21 d后将10只足趾肿胀度较轻的大鼠剔除,将剩余50只大鼠随机分为模型组、雷公藤多苷组及低、中、高剂量透骨香组各10只。雷公藤多苷组给予雷公藤多苷(0. 01 g/kg)灌胃,高、中、低剂量透骨香组分别给予73. 79 g生药/kg、36. 89 g生药/kg、18. 45 g生药/kg透骨香水溶部位灌胃,空白组与模型组分别予以等体积蒸馏水灌胃。灌胃28 d后,计算各组大鼠足趾肿胀度,评价关节炎指数(AI),测定大鼠血清及关节组织匀浆中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素1β(IL-1β)水平。结果造模21 d后,CIA模型组的足趾肿胀度高于空白组(P <0. 05)。灌胃28 d后,与模型组比较,各干预组大鼠足趾肿胀度降低(P <0. 05),雷公藤多苷组和高剂量透骨香组AI降低(均P <0. 05)。与雷公藤多苷组比较,低、中剂量透骨香组AI升高(均P <0. 05),而高剂量透骨香组AI差异无统计学意义(P> 0. 05),且高剂量透骨香组大鼠AI低于低剂量透骨香组(P <0. 05)。与空白组比较,模型组大鼠血清与关节组织匀浆中TNF-α、IL-1β水平均升高(P <0. 05)。灌胃28 d后,与模型组比较,中剂量透骨香组大鼠的血清TNF-α、IL-1β水平及关节组织匀浆中TNF-α水平均降低,高剂量透骨香组大鼠血清及关节组织匀浆中TNF-α、IL-1β水平降低(均P <0. 05)。结论壮药透骨香水溶部位对CIA大鼠有治疗作用,且高剂量(73. 79 g生药/kg)的透骨香水溶部位效果最佳,其作用机制可能与调节炎症因子TNF-α和IL-1β的表达有关。

三种药用算盘子属植物的化学成分及药理活性的研究进展

算盘子系大戟科算盘子属植物的果实,在我国有悠久的用药历史。算盘子有活血散瘀、消肿解毒之功效,可用于治疗痢疾、腹泻、感冒发热、咳嗽、食滞腹痛、湿热腰痛、跌打损伤、疝气等疾病;毛果算盘子有收敛止泻、祛湿止痒之功效,可以用于治疗荨麻疹、肠炎、痢疾等疾病;香港算盘子有止咳平喘之功效,可以用于治疗咳嗽、肝炎、跌打损伤等。本文对上述3种药用算盘子属植物的化学成分及药理活性的研究进展进行综述,以期为算盘子属植物的深入开发和应用提供参考依据。

壮药拟草果中3,5-二羟基-7,4’-二甲氧基黄酮候选化学对照品的制备及其质量控制研究

目的:从壮药拟草果中制备纯化3,5-二羟基-7,4’-二甲氧基黄酮候选化学对照品并建立其质量分析方法。方法:采用硅胶柱色谱、重结晶和高效制备液相色谱等,从拟草果中制备纯化得到高纯度的3,5-二羟基-7,4’-二甲氧基黄酮,通过红外、紫外、核磁共振等综合波谱解析方法及质谱确定其化学结构,采用薄层色谱法、高效液相色谱法检测色谱纯度,炽灼残渣法测定灰分,质量平衡法计算3,5-二羟基-7,4’-二甲氧基黄酮的含量。采用高效液相色谱法对建立的3,5-二羟基-7,4’-二甲氧基黄酮候选化学对照品质量分析方法进行方法学考察。结果:3,5-二羟基-7,4’-二甲氧基黄酮候选化学对照品用高效液相色谱法面积归一化法测定的含量均值为99.85%,炽灼残渣法测得灰分值为0.02%,以质量平衡法计算的含量为99.83%。建立的含量测定方法专属性强,精密度良好。结论:制备得到的3,5-二羟基-7,4’-二甲氧基黄酮候选化学对照品符合化学对照品的质量标准要求,可作为拟草果及其他含有此成分的药材与制剂质量控制的对照品。建立的质量分析方法准确、可靠,可为该对照品质量标准研究与制定提供科学依据。

基于网络药理学与实验验证探讨鸡血藤总黄酮抑制破骨细胞分化的作用机制

目的:对鸡血藤总黄酮提取物中的黄酮类成分进行辨识和鉴定,并对其治疗骨质疏松的靶点进行预测,观察其对核因子κB受体活化因子配体(sRANKL)诱导RAW264.7向破骨细胞分化的影响,并对破骨细胞分化产生影响的作用成分及作用机制进行探讨。方法:采用液相色谱-离子阱-静电轨道阱杂交质谱(HPLC-LTQ/Orbitrap MS)法采集数据后,对各色谱峰的质谱图高分辨一级和二级质谱数据进行解析,与文献数据库进行对比,对各色谱峰进行结构推测和确认。运用Swiss Target Prediction、GeneCards、String平台预测鸡血藤总黄酮18个成分与骨质疏松相关的潜在靶点,在DAVID 6.8平台进行基因功能富集和KEGG通路富集分析,Cytoscape软件构建“成分-靶点”网络。体外培养RAW264.7细胞,sRANKL诱导破骨细胞分化,鸡血藤总黄酮干预后,通过抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)活性检测盒TRAP染色法评价破骨细胞形成和分化能力,Western blot法检测雌激素受体(Estrogen receptor, ESR)相关蛋白的表达。结果:从鸡血藤总黄酮提取物中共鉴定了18个黄酮类化合物(芒柄花素、染料木素及美迪紫檀素等),网络药理学预测共得到鸡血藤黄酮化合物治疗骨质疏松的潜在共同作用靶点33个,筛选出16条与骨质疏松相关的信号通路。GO分析和KEGG分析显示关键靶点涉及催乳素(Prolactin)、内分泌(Endocrine)、雌激素(Estrogen)、缝隙连接(Gap junction)、酪氨酸激酶受体(ErbB)、等信号通路,生物过程主要涉及以DNA为模板的转录调控、蛋白质自磷酸化、血管收缩的正向调节、等;分子功能涉及蛋白酪氨酸激酶活性、跨膜受体蛋白酪氨酸激酶活性及类固醇结合等;细胞组分涉及细胞膜上的膜筏、原生质膜、神经元末端、等。实验验证结果显示:与正常对照组相比,sRANKL 50 ng/mL组耐酒石酸盐酸性磷酸酶(TRAP)活性明显升高,ESR1、ESR2蛋白表达明显下调(P<0.05或P<0.01),与sRANKL 50 ng/mL组比较,鸡血藤总黄酮50μg/mL组TRAP活性明显降低(P<0.05);TRAP阳性细胞随着鸡血藤总黄酮组浓度的增大逐渐减少;鸡血藤总黄酮25、 50μg/mL组ESR1、ESR2蛋白表达明显上调(P<0.05或P<0.01)。结论:鸡血藤总黄酮中多种黄酮成分具有调节雌激素的作用,其通过与雌激素受体结合,抑制sRANKL诱导RAW264.7向破骨细胞分化,从而起到预防骨质疏松的作用。