人胚肌硬膜桥发育的Ⅰ型胶原纤维观察及定量分析

肌硬膜桥是位于寰枕和寰枢间隙连接枕下区肌肉与硬脊膜的致密纤维结缔组织桥,众多实验表明,肌硬膜桥可能具有重要的功能。课题组前期研究已证实成年人的肌硬膜桥主要由Ⅰ型胶原纤维组成,肌硬膜桥在人胚胎中的发育还少有报道。本研究对12~28周的人胚标本(E)进行石蜡切片及天狼星红染色,在偏振光显微镜下观察寰枢间隙肌硬膜桥胶原纤维的变化,并通过ImageJ软件,沿MDB纤维走行方向,随机选取彼此互不重合且面积相同的3~5个区域(根据标本大小决定),测量并计算出几个区域的平均灰度值,并对测量结果进行定量分析。

人胚胎肌硬膜桥发育解剖学研究

肌硬膜桥(MDB)是存在于枕下区头后小直肌、头后大直肌、头下斜肌及项韧带与硬脊膜之间的致密结缔组织桥。众多研究提示MDB可能存在重要的生理作用。然而,目前关于人MDB的发育学研究还很少有报道。本研究采用石蜡切片、Masson和天狼星红染色等方法,对12~40周的人胚胎(E)进行组织学观察,以明确MDB及其相关结构的发育特点。观察人胚胎枕下区矢状切面,结果可见:①硬脊膜:从E12周开始就是多层结构,硬脊膜与寰枕和寰枢后膜紧贴附;随着发育,硬脊膜逐渐增厚;②枕下肌:寰枢间隙的肌细胞从E12周就已经很明显;而寰枕间隙的肌细胞发育明显晚于寰枢间隙,约从E13周开始才明显增多;约至20周,肌细胞形态接近成熟肌细胞;③寰枕后膜与寰枢后膜:在E12~E13周时寰枕后膜与寰枢后膜完全封闭寰枕间隙及寰枢间隙;E15周起,寰枕后膜的下方出现一个间隙,可以观察到有许多MDB纤维样结构从这个间隙通过,并融入硬脊膜;E15周MDB纤维也开始穿过寰椎后弓与头下斜肌之间的间隙,向前下走行穿过寰枢间隙进入椎管并融入硬脊膜;大约从E22周开始,穿过寰枢间隙的MDB纤维呈放射状附着在硬脊膜上;④MDB纤维成分:天狼星红染色、偏振光显微镜下,在E15周,可见微弱的Ⅰ型胶原纤维的红色双折光,在E21周强度明显增加,在之后的生长发育过程中,MDB纤维逐渐增强。

SD大鼠肌硬膜桥细胞发育及超微结构特征观察

肌硬膜桥是枕下区深层肌经寰枕后膜、寰枢后膜连接上颈段硬脊膜的结缔组织桥。目前对肌硬膜桥的组成、连接方式及纤维组成等已有详细描述,但关于肌硬膜桥发育学方面的研究甚少。本研究选取孕12~20dSD大鼠胚胎(E12~20d)为研究对象,取寰枕寰枢区域组织,通过HE及铁苏木染色、TUNEL法以及透射电镜等多种方法观察MDB的细胞组成及其超微结构的发育规律,明确细胞凋亡是否参与其发育过程。

SD大鼠肌硬膜桥的细胞发育特征

肌硬膜桥是枕下区深层肌经寰枕后膜、寰枢后膜连接上颈段硬脊膜的结缔组织桥,目前对肌硬膜桥的组成、连接方式及纤维组成等已有详细描述,但关于肌硬膜桥发育学方面的研究甚少。SD大鼠已被证实存在肌硬膜桥结构,本研究以SD大鼠胚胎(E)为研究对象,采用组织学方法观察胎鼠颈枕部及肌硬膜桥在各发育时期的细胞组成及形态变化,以揭示肌硬膜桥的细胞发育规律。胎鼠标本制作石蜡切片,并进行HE及铁苏木染色后观察枕颈部交接区的细胞组成及形态特点。结果显示:①E12~E13d,该区域的细胞成分以星形多突起状、核仁明显、胞质浅染的间充质细胞为主,同时存在少量散在的梭形成纤维细胞;②E14~E17d,该区域的细胞成分以成纤维细胞为主,可见成纤维细胞核仁明显、细胞突起交织成网状,且细胞排列呈腹侧紧密、背侧松散的分层现象;③E18~E21d,可见在该区域由紧密排列的成纤维细胞和纤维细胞组成硬脊膜,其与背侧的枕下肌组织间为排列松散、交织成网状的成纤维细胞构成的寰枕后膜和寰枢后膜,呈长梭形、胞体较小、胞质较少、胞核深染的纤维细胞也开始出现。综上,肌硬膜桥细胞在E13d以前,颈枕交界区细胞以间充质细胞为主;E13~E17d,以成纤维细胞为主;E18d开始,成纤维细胞逐渐转化为纤维细胞。