p38MAPK信号通路在鼠伤寒沙门菌spvB基因影响Henle-407细胞自噬中的作用

目的探讨p38MAPK信号通路在鼠伤寒沙门菌spv B基因影响肠上皮细胞自噬中的作用。方法分别使用携带spv B基因的鼠伤寒沙门氏菌野生株STM-211、敲除spv B基因的鼠伤寒沙门氏菌突变株STM-Δspv B和回补株STM-c-spv B与处于生长对数期的肠黏膜上皮细胞Henle-407细胞进行共培养,并加入p38MAPK通路抑制剂SB203580进行干预。于共培养后的不同时间点收集细胞,通过免疫印迹法检测p38的磷酸化水平和自噬标志蛋白LC3、P62的表达水平;稀释涂板作胞内细菌计数;免疫荧光染色观察自噬蛋白LC3的表达及分布。结果共培养后1、2、4 h,STM-211组和STM-c-spv B组p38蛋白的磷酸化水平均低于STM-Δspv B组(P<0.05);在共培养后的2 h和4 h,STM-211组和STM-c-spv B组胞内活菌计数明显多于STM-Δspv B组(P<0.05);在1 h时间点使用SB203580干预后,STM-211组和STM-c-spv B组LC3Ⅱ和P62表达量未见明显改变,而STM-Δspv B组LC3Ⅱ表达量降低(P<0.05),P62表达量升高(P<0.05),3 h时该趋势更加明显(P<0.05)。结论鼠伤寒沙门氏菌spv B基因对肠上皮细胞自噬的抑制作用,可能与其对细胞p38MAPK通路的负调控相关。

鼠伤寒沙门菌质粒毒力基因对耐药表型的影响

目的:探讨沙门菌质粒毒力基因(spv)表达改变对鼠伤寒沙门菌耐药表型的影响。方法:在e GFP基因序列上下游增加启动子及终止子并在两端位点上、下游设计酶切位点,以p ACYC184-e GFP为载体,构建spv基因回补质粒,电转化至前期构建的鼠伤寒沙门菌spv B及spv C基因共同缺陷株获得基因回补株,检测菌株间耐药性的差异及acr AB表达的差异。结果:成功构建鼠伤寒沙门菌spv B、spv C基因荧光回补株,连续培养12代质粒未发生丢失。与野生型菌株及回补株相比,spv基因缺陷变异株对哌拉西林他唑巴坦、头孢噻肟、头孢西丁、四环素、氯霉素及环丙沙星的MIC值下降。spv基因缺陷变异株Acr A周质蛋白水平低于野生菌株及回补株(P<0.05)。结论:在spv B及spv C基因共同缺陷鼠伤寒沙门菌基础上的基因回补株构建成功,spv下调能改变鼠伤寒沙门菌的耐药表型,这可能是通过影响外排泵Acr A来完成的。

肺力咳合剂对呼吸道合胞病毒所致下呼吸道感染疗效观察

目的:探讨肺力咳在呼吸道合胞病毒所致下呼吸道感染的疗效,以期对临床疾病的中医药诊断和治疗起到一定的指导作用。方法:将2021年6月至2022年6月来自江西省儿童医院呼吸科住院的1月至5岁呼吸道病毒感染引起的下呼吸道感染儿童作为研究对象,将52例入组儿童随机分为组(观察组27例,对照组25例)进行研究。对照组患者给予常规治疗,观察组患者在对照组的基础上加用肺力咳合剂进行治疗,对两组有效率,住院时间,入院第3天、第5天咳嗽评分以及不良反应发生情况进行研究。结果:治疗后,观察组有效率92.59%(25/27)与对照组有效率88.00%(22/25)比较,差异无统计学意义(P>0.05);观察组住院时间(6.33±1.75)d与对照组住院时间(6.54±1.82)d比较,差异无统计学意义(P>0.05);入院第3天观察组日间咳嗽评分(2.04±0.34)分、夜间咳嗽评分(2.07±0.67)分与对照组日间咳嗽评分(2.04±0.54)分、夜间咳嗽评分(2.16±0.69)分比较,两组差异无统计学意义(P>0.05);入院第5天观察组日间咳嗽评分(1.55±0.50)分、夜间咳嗽评分(1.00±0.48)分低于对照组日间咳嗽评分(1.84±0.37)分、夜间咳嗽评分(1.32±0.63)分,两组差异有统计学意义(P<0.05);两组不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:肺力咳合剂可有效治疗呼吸道合胞病毒所致的下呼吸道感染。