纤维素直接发酵乙醇微生物的选育──Ⅲ.里氏木霉与运动发酵单胞原生质体融合的研究

用聚乙二醇（PEG）作为诱导剂，可使钝化的里氏木霉（Tri－chodermareesei）QM9414的原生质体和运动发酵单胞（Zymomonasmobilis）ATCC29191的原生质球之间可以产生远缘的细胞融合子。融合率可达1．9×10－2融合子能利用羧甲基纤维素为唯一碳源而产生羧甲基纤维素酶和乙醇。羧甲基纤维素酶活性高和乙醇产量高的融合子不稳定。这些融合子的产酶能力很容易大部分丧失，而产乙醇的能力亦很低。而酶活及乙醇产量较低的融合子，可能才是真正的基因重组子。

纤维素直接发酵乙醇微生物的选育──Ⅱ.运动发酵单胞原生质体的形成与再生最佳条件的研究

运动发酵单胞（ZymomonasmobillisATCC29191）在不同的条件下产生的菌体其形成原生体所需的条件亦不同，而且原生质体的再生亦有差异．经过最佳化的条件选择，原生质体的再生率最高可达79.03×10-2水平。

纤维素直接发酵乙醇微生物的选育──Ⅰ.里氏木霉原生质体钝化与检测

液体培养16至20h的里氏木霉（TrichodermaTeeseiQM9414）菌体，用0．9mol·L-1的氯化钾或20％的蔗糖为高渗缓冲液时，2．5g／L或5．0g／L质量浓度的纤维素酶和蜗牛酶混合液，30℃处理60～180Amin，可以获得稳定的原生质体。用50～55℃处理60min，或紫外线处理5min或0．1％碘乙酸30℃处理40min，原生质体全部失活。用0．03％～0．1％的中性红染色，钝化的原生质体全部着色，这是一种简便检测原生质体失活的新方法。