【目的】筛选分析受棉铃虫诱导的棉花糖基转移酶(Glycosyltransferase)UGT基因家族,为UGTG01、UGTG02、UGTG o 4、UGTG o 6、UGTG o 7基因功能深入研究奠定基础。【方法】以受棉铃虫诱导筛选出的棉花糖基转移酶UGT基因组数据库为基础,...【目的】筛选分析受棉铃虫诱导的棉花糖基转移酶(Glycosyltransferase)UGT基因家族,为UGTG01、UGTG02、UGTG o 4、UGTG o 6、UGTG o 7基因功能深入研究奠定基础。【方法】以受棉铃虫诱导筛选出的棉花糖基转移酶UGT基因组数据库为基础,利用生物信息学方法分析棉花糖基转移酶UGT基因家族的理化性质、系统进化树、蛋白质的二级结构预测以及保守基序与结构域。【结果】从棉花基因组中搜索到5个推定的UTG基因家族成员,其氨基酸数目介于468~534个,理论等电点分布在4.97~5.58,相对分子质量区域为52743.1~60208.62,亚细胞定位在细胞质外,均为亲水性蛋白质。基因结构均含有1个外显子,二级结构主要由α-螺旋、无规则卷曲为主,均含3个Motif基序和有Glycosyltransferase_GTB-type superfamily结构域。5个基因在根、茎、子叶、真叶、花、棉桃中具有明显的组织表达差异性,5个基因与UGT73C家族基因,水稻的UGT707A3、大豆的GmUGT在进化树的同一分支上。【结论】糖基转移酶基因在不同组织中的表达具有显著差异,5个糖基转移酶与UGT73C、UGT707A3、GmUGT都处于进化树的同一个分支上,其可能具有相似的抗虫功能,能通过调控皂苷元、类黄酮、柚皮素等物质响应棉花的抗虫性。展开更多
【目的】建立高效的新疆早熟陆地棉田间遗传转化与室内潮霉素相结合的筛选体系。【方法】以MS为基本培养基,以去皮早熟陆地棉新陆早17号种子为材料,进行头孢霉素敏感性实验,研究其对棉花植株的影响和抑菌情况;通过在MS培养基上添加不同...【目的】建立高效的新疆早熟陆地棉田间遗传转化与室内潮霉素相结合的筛选体系。【方法】以MS为基本培养基,以去皮早熟陆地棉新陆早17号种子为材料,进行头孢霉素敏感性实验,研究其对棉花植株的影响和抑菌情况;通过在MS培养基上添加不同浓度的潮霉素和IBA,研究新陆早17号最适抗性筛选浓度及最适生根条件。【结果】新陆早17号最适的头孢霉素筛选浓度为500μg/m L,在该浓度下,植株生长不受影响且其鲜重较其他处理增重明显;其对潮霉素反应较为敏感,10μg/m L潮霉素即可抑制棉花根部生长,棉花植株生长矮小叶片发黄;其最适生根培养基为MS＋1.0μg/m L IBA,在该浓度条件下生根率为100%,平均根数8.5根;具有3~4片真叶的生根无菌苗经练苗和移栽后成活率为100%。【结论】为新疆早熟陆地棉田间进行＂喷花法＂的农杆菌遗传转化方式和室内潮霉素抗性筛选鉴定提供了理论基础。展开更多
目的以藏红花悬浮细胞为研究对象,克隆藏红花酸糖基转移酶(crocetin glycosyltransferase)UGTCs4基因,并对其进行生物信息学和表达分析。方法采用同源克隆法和5’RACE(rapid amplification of c DNA ends)技术克隆UGTCs4基因的全长c DN...目的以藏红花悬浮细胞为研究对象,克隆藏红花酸糖基转移酶(crocetin glycosyltransferase)UGTCs4基因,并对其进行生物信息学和表达分析。方法采用同源克隆法和5’RACE(rapid amplification of c DNA ends)技术克隆UGTCs4基因的全长c DNA序列。运用生物信息学方法对该基因进行分析,预测其编码蛋白的结构与功能,并通过半定量RT-PCR(semi-quantitative reverse transcription and polymerase Chain reaction)方法检测不同诱导物条件下的基因表达情况。结果UGTCs4基因的c DNA全长为1380 bp,编码459个氨基酸。分子进化树分析,该糖基转移酶基因与已知的藏红花酸糖基转移酶基因UGTCs2具有相同的糖基化藏红花酸的功能。RT-PCR的结果显示,UGTCs4基因能够响应吲哚乙酸(IAA)、脱落酸(ABA)、赤霉素(GA)、过氧化氢(H2O2)、茉莉酸甲酯(Me JA)多种处理,这些处理均能促使其进行转录。结论首次从藏红花悬浮细胞中分离并报道了UGTCs4的c DNA克隆,并证实UGTCs4对不同诱导子的响应情况,为进一步研究藏红花素的生物合成及表达调控研究奠定了基础。展开更多
文摘【目的】筛选分析受棉铃虫诱导的棉花糖基转移酶(Glycosyltransferase)UGT基因家族,为UGTG01、UGTG02、UGTG o 4、UGTG o 6、UGTG o 7基因功能深入研究奠定基础。【方法】以受棉铃虫诱导筛选出的棉花糖基转移酶UGT基因组数据库为基础,利用生物信息学方法分析棉花糖基转移酶UGT基因家族的理化性质、系统进化树、蛋白质的二级结构预测以及保守基序与结构域。【结果】从棉花基因组中搜索到5个推定的UTG基因家族成员,其氨基酸数目介于468~534个,理论等电点分布在4.97~5.58,相对分子质量区域为52743.1~60208.62,亚细胞定位在细胞质外,均为亲水性蛋白质。基因结构均含有1个外显子,二级结构主要由α-螺旋、无规则卷曲为主,均含3个Motif基序和有Glycosyltransferase_GTB-type superfamily结构域。5个基因在根、茎、子叶、真叶、花、棉桃中具有明显的组织表达差异性,5个基因与UGT73C家族基因,水稻的UGT707A3、大豆的GmUGT在进化树的同一分支上。【结论】糖基转移酶基因在不同组织中的表达具有显著差异,5个糖基转移酶与UGT73C、UGT707A3、GmUGT都处于进化树的同一个分支上,其可能具有相似的抗虫功能,能通过调控皂苷元、类黄酮、柚皮素等物质响应棉花的抗虫性。
文摘【目的】建立高效的新疆早熟陆地棉田间遗传转化与室内潮霉素相结合的筛选体系。【方法】以MS为基本培养基,以去皮早熟陆地棉新陆早17号种子为材料,进行头孢霉素敏感性实验,研究其对棉花植株的影响和抑菌情况;通过在MS培养基上添加不同浓度的潮霉素和IBA,研究新陆早17号最适抗性筛选浓度及最适生根条件。【结果】新陆早17号最适的头孢霉素筛选浓度为500μg/m L,在该浓度下,植株生长不受影响且其鲜重较其他处理增重明显;其对潮霉素反应较为敏感,10μg/m L潮霉素即可抑制棉花根部生长,棉花植株生长矮小叶片发黄;其最适生根培养基为MS＋1.0μg/m L IBA,在该浓度条件下生根率为100%,平均根数8.5根;具有3~4片真叶的生根无菌苗经练苗和移栽后成活率为100%。【结论】为新疆早熟陆地棉田间进行＂喷花法＂的农杆菌遗传转化方式和室内潮霉素抗性筛选鉴定提供了理论基础。
文摘目的以藏红花悬浮细胞为研究对象,克隆藏红花酸糖基转移酶(crocetin glycosyltransferase)UGTCs4基因,并对其进行生物信息学和表达分析。方法采用同源克隆法和5’RACE(rapid amplification of c DNA ends)技术克隆UGTCs4基因的全长c DNA序列。运用生物信息学方法对该基因进行分析,预测其编码蛋白的结构与功能,并通过半定量RT-PCR(semi-quantitative reverse transcription and polymerase Chain reaction)方法检测不同诱导物条件下的基因表达情况。结果UGTCs4基因的c DNA全长为1380 bp,编码459个氨基酸。分子进化树分析,该糖基转移酶基因与已知的藏红花酸糖基转移酶基因UGTCs2具有相同的糖基化藏红花酸的功能。RT-PCR的结果显示,UGTCs4基因能够响应吲哚乙酸(IAA)、脱落酸(ABA)、赤霉素(GA)、过氧化氢(H2O2)、茉莉酸甲酯(Me JA)多种处理,这些处理均能促使其进行转录。结论首次从藏红花悬浮细胞中分离并报道了UGTCs4的c DNA克隆,并证实UGTCs4对不同诱导子的响应情况,为进一步研究藏红花素的生物合成及表达调控研究奠定了基础。
