CRISPR/Cas9系统的脱靶效应

在细菌中发现的免疫系统CRISPR/Cas9,已经成为最有效的基因工程编辑工具,甚至大有希望可以治疗人类遗传性疾病。但是CRISPR/Cas9系统在使用时会产生严重的脱靶问题,导致假表型和错误的解释。提高与靶点结合的高效率,同时减少脱靶效应,将是今后CRISPR/Cas9技术的挑战。综述关注与CRISPR/Cas9脱靶效应相关的内容,总结了影响其靶点专一性的因素,减少CRISPR/Cas9脱靶效应的可行性方法和设计工具等,供大家学习讨论。

红肉苹果果皮类黄酮组分及抗氧化活性分析

以红肉苹果杂种优系2010-5果皮为试材,p H示差法测定总花青苷含量,超高压液相色谱串联四极杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS/MS)分析推定类黄酮组分,对其抗氧化活性进行了评价。结果表明:红肉苹果2010-5果皮总花青苷含量为390.2 mg·kg^(-1)(FW),是其果肉总花青苷含量的1.4倍;质谱技术推测出果皮中类黄酮主要有12种成分物质:杨梅酮、儿茶素、矢车菊素-3-O-半乳糖苷、山奈酚-3-O-芸香糖苷、山奈酚衍生物、矢车菊素-3-O-琥珀酸-阿拉伯糖、花葵素-3-甲酰葡萄糖苷、矢车菊素-3-O-阿拉伯糖苷、矢车菊素-3-O-葡萄糖苷、槲皮素苷元、飞燕草素-3-乙酰芸香糖酰-5-葡萄糖苷和槲皮素衍生物。与对照维生素C(Vc)相比,红肉苹果果皮类黄酮提取物对3种自由基表现出较好的清除效果,尤其是对DPPH的清除效果最好,达90%以上。当红肉苹果果皮类黄酮提取物和Vc浓度为35 mg·L^(-1)时,对DPPH清除率分别为92.77%和79.87%,对·OH-清除率分别为52.11%和37.55%,对O_2~ˉ·清除率分别为33.98%和13.44%。这为今后红肉苹果的选育及天然抗氧化剂的开发和保健功能的研究提供理论依据。