原生质体再生法选育耐自身代谢产物的卡那霉素链霉菌高产菌株

以卡那链霉菌株KA01为出发菌株,酶法制备原生质体,在含有高浓度的卡那霉素的培养基再生或经UV诱变处理后再生,从再生菌落中分离突变菌株。从中获得一高产突变株KA02,其摇瓶相对效价比出发株提高18%,大罐生产水平提高8%。

间歇补料发酵方法在卡那霉素发酵中的应用

卡那霉素生产发酵过程中,国内厂家长期运用的是分批不补料发酵工艺,发酵水平长期徘徊在7300r.mL-1左右。本文作者通过对卡那链霉菌发酵过程生长代谢的研究,采用间歇补料工艺,发酵水平大幅度提高,效价达8800r.mL-1以上。

粘杆菌素高产菌株的选育

以多粘芽胞杆菌BT-163为出发菌株,采用诱变与定向筛选相结合的方式,即根据粘杆菌素生物合成途径的调控机制和本身的分子结构特点,选用重金属离子和氨基酸结构类似物进行筛选,获得高产突变株。这些突变株比原菌株生产能力高出60%以上,并应用在大规模发酵生产中。平均效价从430000u/mL提高到630000u/mL。

中生菌素耐自生产物突变株的选育

以中生菌素产生菌淡紫灰链霉菌海南变种UV-69自然分离获得的A3为出发菌株,经过5h培养制备和紫外诱变60s处理后,利用其自生代谢产物,筛选耐自生产物突变株,获得突变株NV-36,其摇瓶发酵效价比出发菌株提高20%。传代试验表明,该突变株的高产性能遗传特性较稳定。在20吨发酵罐上连续5批验证,平均发酵效价比原生产水平提高35%。

锌元素对微生物合成卡那霉素A水平的影响

主要采用单因子方法设计试验方案,通过对单因素Zn2+的不同加量考查对卡那霉素链霉菌生物合成能力的影响,寻求最适的Zn2+加量。试验最终结果显示,硫酸锌加量在0.04%时,卡那霉素链霉菌生物合成能力达到最佳。

卡那链霉菌自发释放噬菌体的研究

本文发现卡那链霉菌能自发释放噬菌体 ,从而确认了卡那链霉菌LA - 7等菌株是一株溶源菌 ,对自身产生的噬菌体具有免疫性。这种噬菌体与外源噬菌体有明显不同的特征。通过对这些特征的研究 ,有助于加深认识卡那链霉菌特性 ,并对卡那霉素发酵生产起重要指导作用。

卡那霉素抗噬菌体生产菌株的选育及应用

从染上噬菌体的卡那霉素发酵液中分离纯化出P8噬菌体,并对卡那链霉菌进行诱变、纯化感染噬菌体后得到的再生菌并再进行分 离纯化;最后,对再生菌进行抗噬菌体性能测定及生产卡那霉素效价测定,检测结果说明各项指标都达到要求,效价在10 000 u/ml以上。 把抗噬菌体菌株应用在发酵生产中,连续一年多,生产近千批产品没有染上噬菌体,经济效益极为显著。