六味地黄丸对绝经后骨质疏松症肾阴虚证JAK/STAT信号通路基因的影响

目的通过观察六味地黄丸对绝经后骨质疏松症肾阴虚证JAK/STAT信号通路基因的影响,探讨六味地黄丸治疗绝经后骨质疏松症肾阴虚证的分子机制。方法随机选择绝经后骨质疏松症肾阴虚证组6例,健康绝经后妇女对照组3例。六味地黄丸治疗肾阴虚证组3个月后,用JAK/STAT信号通路芯片检测其基因表达的变化。结果治疗前肾阴虚证组与正常对照组相比,差异表达基因:PRLR、JUN、JUNB、INSR,表达均下调;肾阴虚证组治疗后与治疗前相比,差异表达基因有25条,上调11条,下调14条,其中JUN、JUNB疗后明显上调。差异表达基因生物学功能分析,免疫相关基因:PRL、PRLR、OSM、ISG15、IL4R;细胞生长增殖与细胞周期相关基因:F2、SOCS3;与STAT蛋白相互作用的转录因子和共同活化基因:JUN、JUNB、SMAD3、SMAD5、SMAD4、SP1、YY1;JAK/STAT信号通路的负反馈调节基因:PIAS1、SOCS4;衔接蛋白基因:SRC、STAM。结论六味地黄丸治疗绝经后骨质疏松症肾阴虚证的机制可能与其调控JAK/STAT信号通路的相关基因有关,这些基因的功能与免疫调节、细胞生长增殖及成骨生长关联。

绝经后骨质疏松肾阴虚证相关基因的信息学分析

背景:在绝经后骨质疏松症患者中,不同中医证型在骨质疏松易感基因不同表型中分布存在差异,但其基因组学机制尚未见报道。目的:通过基因表达谱的差比性分析,探讨绝经后骨质疏松症肾阴虚证相关基因的信息学特征。方法:随机选择绝经后骨质疏松症受试者,分为肾阴虚证组4例,肾阳虚证组3例、非肾虚证组3例,并选择健康绝经后妇女3例设为正常对照组。用人全基因组表达谱芯片检测4组基因表达谱,肾阴虚证组分别与其他3组比较,筛选共同的差异表达基因,进行GO和Pathway分析。结果与结论:肾阴虚证组与正常对照组、肾阳虚证组、非肾虚证组的差异表达基因分别为197,354和54条;肾阴虚证组与其他3组比较共同的差异表达基因有9条:PROK2,ASB1,MUC12,GSTM5,CLCF1,GPR27,C3orf35和未知基因chr3:113822408-113822347,chr18:34851804-34851745。与正常对照组相比,表达上调基因为GSTM5,MUC12,表达下调基因为GPR27,C3orf35,ASB1,CLCF1和PROK2。Pathway分析GSTM5参与谷胱甘肽代谢通路,CLCF1参与细胞因子与受体之间干扰通路和JAK-STAT信号转导通路。结果证实,绝经后骨质疏松症肾阴虚证与GPR27,ASB1,PROK2,CLCF1和GSTM5基因的表达有关,并与谷胱甘肽代谢通路、细胞因子与其受体相互作用通路和JAK-STAT信号转导通路存在关联。

绝经后骨质疏松症肾阴虚证关联基因CLCF1 mRNA的表达研究

目的研究绝经后骨质疏松症肾阴虚证差异表达基因CLCF1、ASB1和PROK2的mRNA表达水平。方法随机选择绝经后骨质疏松症患者,中医辨证肾阴虚证组30例,27例健康绝经后妇女为对照组,RT-PCR法检测外周血CLCF1、ASB1和PROK2 mRNA的表达。结果肾阴虚组CLCF1 mRNA表达水平明显低于对照组(Z=-2.621,P=0.009);肾阴虚组ASB1mRNA表达与对照组比较,有降低趋势,但差异无统计学意义;与健康对照组比较,肾阴虚组PROK mRNA表达差异无统计学意义。结论骨质疏松症肾阴虚证与CLCF1 mRNA表达下调关联。

绝经后骨质疏松症肾阴虚证差异表达基因CLCF1蛋白表达研究

目的研究绝经后骨质疏松症肾阴虚证与CLCF1、ASB1和PROK2基因蛋白表达的相关性。方法病例对照方法,中医辨证肾阴虚证组29例,28例健康绝经后妇女为对照组,Western blot法检测外周血CLCF1、ASB1和PROK2蛋白表达水平。结果骨质疏松症肾阴虚组CLCF1蛋白表达水平(0.483±0.151)明显低于对照组(0.706±0.255),P=0.0001,统计学有非常显著性差异;肾阴虚组ASB1和PROK2蛋白表达与健康对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论骨质疏松症肾阴虚证CLCF1蛋白表达水平显著低于健康对照组,骨质疏松症肾阴虚证与CLCF1蛋白下调存在关联。

绝经后骨质疏松症肾阳虚证差异表达基因分析

目的通过基因表达谱的差比性分析,探讨绝经后骨质疏松症肾阳虚证相关基因的信息学特征。方法随机选择绝经后骨质疏松症受试者,分为肾阳虚证组3例,肾阴虚证组4例、非肾虚证组3例,并选择健康绝经后妇女3例设为正常对照组。用人全基因组表达谱芯片检测4组基因表达谱,肾阳虚证组分别与其他3组比较,筛选共同的差异表达基因,并对这些差异表达基因进行相关功能分析。结果肾阳虚证组与正常对照组、肾阴虚证组、非肾虚证组的差异表达基因分别为348,355,76条;肾阳虚证组与其他3组比较共同的差异表达基因有46条:与正常对照组相比,表达上调基因有4条,表达下调基因有42条。结论绝经后骨质疏松症肾阳虚证主要与免疫、细胞信号转导、钙离子活性和神经内分泌等方面相关。

糖肾合剂治疗糖尿病肾病的临床观察

目的 :观察中药复方糖肾合剂对糖尿病肾病患者血糖、尿白蛋白定量、高凝状态及氧化损伤的影响。方法 :93例糖尿病肾病患者随机分为两组 ,通过糖肾合剂及胰岛素联合 (治疗组 )治疗与单纯用胰岛素 (对照组 )治疗的比较观察 ,评价糖肾合剂对糖尿病肾病患者空腹血糖 (FBG)、餐后 2h血糖 (PBG)、2 4h尿白蛋白、内皮素 (ET)、α 颗粒膜蛋白 14 0 (GMP - 14 0 )、红细胞超氧化物歧化酶 (ESOD)、过氧化脂质 (LPO)的影响。结果 :治疗组 2 4h尿白蛋白、ET、GMP - 14 0、LPO明显下降 ,ESOD活性显著升高 ,与治疗前比较有显著性差异 (P <0 0 1,P <0 0 5 )。对照组上述变化不明显。结论 :糖肾合剂能改善糖尿病肾病高凝状态 ,减轻肾脏自由基代谢紊乱 。

绝经后骨质疏松症肾阳虚证的关联基因LTBP1 mRNA的表达研究

目的研究绝经后骨质疏松症肾阳虚证的关联基因LTBP1及PCSK6的mRNA表达水平,探讨绝经后骨质疏松症肾阳虚证与LTBP1及PCSK6基因表达的关联性。方法随机选择绝经后骨质疏松症患者,中医辨证肾阳虚证组25例,32例健康绝经后妇女为对照组,RT-PCR法检测外周血LTBP1及PCSK6 mRNA的表达。结果肾阳虚证组LTBP1 mRNA表达水平低于健康对照组(F=7.473,P=0.008),差异有统计学意义;肾阳虚证组PCSK6 mRNA表达水平较健康对照组比较,有降低趋势,但差异无统计学意义;通过GO分析参与到的生物途径有细胞外组织形成、代谢过程、磷酸化作用、蛋白磷酸化、TGF-β的细胞外基质合成、BMP信号通路、细胞分泌等;通过Pathway分析参与到弹性纤维形成、细胞外基质组织、整合胰腺癌的通路、TGF-β信号通路、发育生物学、神经生长因子信号转导等通路相关。结论骨质疏松症肾阳虚证与LTBP1基因表达下调相关联。

绝经后妇女骨质疏松症肾阳虚证的关联蛋白LTBP1的表达及其cDNA测序的研究

目的探讨绝经后骨质疏松症肾阳虚证与LTBP1蛋白表达及cDNA变化的关联性。方法随机选择绝经后骨质疏松症患者,中医辨证肾阳虚证组27例,27例健康绝经后妇女为对照组,Western-blot法检测外周血LTBP1的蛋白表达,对cDNA片段进行测序。结果肾阳虚证组LTBP1蛋白表达水平(0.365±0.278)低于健康对照组(0.675±0.583)(P<0.05),差异有统计学意义。cDNA测序在健康对照组与肾阳虚证组中碱基无有意义的突变。结论绝经后骨质疏松症肾阳虚证与LTBP1蛋白表达下调相关联,测序发现与碱基突变无关。

维生素D受体基因多个位点多态性与绝经后妇女骨密度及骨转换生化标志物的关系

目的:观察维生素D受体基因BSMⅠ,TAQⅠ,APAⅠ多态性与绝经后妇女骨密度及骨转换生化标志物的相关性。方法:①2007-01/2008-12从福州常住汉族人中随机检测绝经后妇女576例,年龄48～84(62.17±6.37)岁。受试者均知情同意。②记录年龄、绝经年限、体质量指数和绝经后骨折情况。③双能X射线骨密度仪检测正位第2～4腰椎、左侧股骨颈、大转子和Ward’s三角区骨密度。④PCR-RFLP技术检测维生素D受体基因BSMⅠ,TAQⅠ,APAⅠ多态性。⑤用酶联免疫吸附法检测骨转换生化标志物(血清骨钙素、血清骨碱性磷酸酶、尿吡啶啉和尿脱氧吡啶啉)。结果:561例合格受试者进入结果分析。①维生素D受体基因BSMⅠ,TAQⅠ,APAⅠ多态性各基因型间骨密度比较差异无显著性意义(P>0.05)。②维生素D受体基因BSMⅠ,TAQⅠ,APAⅠ多态性各基因型间骨转换生化标志物比较差异无显著性意义(P>0.05)。③维生素D受体基因BSMⅠ,TAQⅠ,APAⅠ多态性各基因型间骨质疏松症发生率比较差异无显著性意义(P>0.05)。④维生素D受体基因BSMⅠ,TAQⅠ,APAⅠ多态性各基因型间绝经后骨折发生率比较差异无显著性意义(P>0.05)。结论:维生素D受体基因BSMⅠ,TAQⅠ,APAⅠ多态性与绝经后骨质疏松症无明显关联,不能作为福州地区绝经后妇女骨质疏松的遗传标志。

可调频脉冲电磁场促进骨折愈合的实验研究

目的探讨脉冲电磁场促进骨折愈合的机理及脉冲重复频率变化对骨折愈合的影响。方法健康雄性新西兰大耳白兔３０只，手术造成双侧桡骨中段３ｍｍ缺损，术后随机分为两组：治疗组，手术后早、中、后期分别予２Ｈｚ、１５Ｈｚ、２Ｈｚ的脉冲电磁场刺激，每天持续５小时；对照组，同样处理但治疗线圈不通电。术后２、４、６周心脏采血，处死取材，行Ｘ线、组织学、生物力学检查及血清激素放免测定，以评价骨折愈合。结果从Ｘ线、组织学、生物力学检查显示，治疗组的骨痂形成、骨愈合及弯曲强度恢复均优于对照组。其血清骨钙素（ＢＧＰ）在第２、４周高于对照组，血清甲状旁腺激素（ＰＴＨ）在第２周高于而第４周低于对照组。结论可调频脉冲电磁场可促进骨折愈合。其可能作用为：促进骨盐沉积，促进成骨细胞形成和活性及频率变化符合细胞频率窗效应。

喝茶与汉族绝经后妇女骨密度关系的临床研究

目的分析喝茶组与无喝茶组的生活饮食习惯、生育、疾病因素等基线情况可比性,观察喝茶与汉族绝经后妇女骨密度及骨折发生率的关系。方法随机调查福州常住汉族绝经后妇女623例,剔除30例,完成试验符合要求593例。分组:习惯喝茶(乌龙茶)组112例,无习惯喝茶组481例。专人调查受试者的年龄、职业、文化程度、生活习惯、生育情况、疾病因素和对骨质疏松的认识等,测量身高、体质量,计算体质量指数。用双能X线(DXA)骨密度仪检测腰椎和髋部骨密度。结果 593例绝经后妇女中,喝茶组占18.89%,无喝茶组占81.11%。比较两组年龄、职业、文化程度、生活习惯、生育情况、疾病因素和骨质疏松认识等,只有体质量两组比较有统计学意义,P<0.05,喝茶组体质量明显高于无喝茶组;其他组间比较无统计学意义。体质量作为协变量,协方差分析比较两组骨密度,喝茶组大转子骨密度(0.807±0.117 kg/cm2)高于无喝茶组(0.778±0.117 kg/cm2,F=4.167,P=0.042,),差异有统计学意义,喝茶组Ward's三角骨密度(0.676±0.130 kg/cm2)高于无喝茶组(0.643±0.138 kg/cm2,F=5.269,P=0.022),差异有统计学意义。绝经后骨折发生率比较:喝茶组13.39%,无喝茶组12.06%,P>0.05,差异无统计学意义。说明喝茶与汉族绝经后妇女高骨密度明显相关,但与绝经后骨折无相关。结论喝乌龙茶有助于汉族绝经后妇女维持高骨密度。

高血压病对绝经后妇女骨密度的影响

目的探讨高血压病和绝经后妇女骨密度的相关性。方法选择福州地区绝经后妇女464例，用双能X线骨密度仪检测正位第2～4腰椎、左侧股骨颈、大转子和Ward’s三角区骨密度；问卷调查受试者的年龄、绝经年龄、身高、体重、血压等情况。结果①高血压组绝经后妇女年龄、体重明显高于非高血压组（P〈0．01）。②高血压组骨质疏松症患病率65．71％、非高血压组骨质疏松症患病率59.88％，两者比较无明显差异（P〉0．05）。③高血压组股骨颈（0．789±0．112）、ward’s三角区（0．629±0．139）骨密度明显低于非高血压组股骨颈（0．818±0．121）、Ward’s三角区（0．655±0．138）骨密度（P〈0．05），高血压组第2～4腰椎、大转子骨密度与非高血压组比较无明显差异（P〉0．05）。结论高血压病与绝经后妇女的骨密度存在相关性，高血压病是导致绝经后妇女低骨密度的一个危险因素。

降钙素受体基因AluⅠ多态性与绝经后妇女骨密度的关系

目的观察降钙素受体基因AluⅠ多态性与绝经后妇女骨密度及骨转换生化标志物的关系。方法 ①2007-01/2008-12从福州常住汉族人中随机检测绝经后妇女623例,均知情同意。②记录年龄、绝经年限、体质量指数和绝经后骨折情况。③双能X线骨密度仪检测正位第2～4腰椎、左侧股骨颈、大转子和Ward's三角区骨密度。④PCR-RFLP技术检测降钙素受体基因AluⅠ多态性。⑤用酶联免疫吸附法检测骨转换生化标志物(血清骨钙素、血清骨碱性磷酸酶、尿吡啶啉和尿脱氧吡啶啉)。结果591例合格受试者进入结果分析,年龄48～84岁,平均62.19±6.32岁。①降钙素受体基因AluⅠ多态性各基因型间骨密度比较差异不显著(P>0.05)。②降钙素受体基因AluⅠ多态性各基因型间血清骨钙素、血清骨碱性磷酸酶和尿脱氧吡啶啉比较差异不显著(P>0.05),TT型尿吡啶啉明显低于CC型、TC型,组间比较差异显著(P<0.05)。③降钙素受体基因AluⅠ多态性各基因型间骨质疏松症例数比较差异不显著(P>0.05)。④降钙素受体基因AluⅠ多态性各基因型间绝经后骨折比较差异不显著(P>0.05)。结论 降钙素受体基因AluⅠ多态性与绝经后骨质疏松症无明显关联,不能作为福州地区绝经后妇女骨质疏松的遗传标记。

福州地区汉族老年男性维生素D受体基因多态性与骨密度的关系

目的观察福州地区汉族老年男性维生素D受体（vitaminDreceptor，VDR）基因BsmI，ApaI及TaqI多态性分布及与骨密度的关系。方法选择福州地区60岁以上汉族男性150例，检测其正位第2—4腰椎、左侧股骨颈、大转子和Ward’s区骨密度，应用聚合酶链式反应一限制性片段长度多态性（PCR—RFLP）检测维生素D受体基因BsmI，ApaI及TaqI多态性。结果受试对象中，VDRBsmI基因型分别为BB型5例（占3．3％）、Bb型11例（占7．3％），bb型134例（占89．4％），b等位基因频率为93．0％、B等位基因频率为7．0％；ApaI基因型分别为AA型12例（占8．0％）、Aa型64例（占42．7％），aa型74例（占49．3％），A等位基因频率为29．3％、a等位基因频率为70．7％；TaqI基因型分别为1Tr型136例（占90．7％）、Tt型14例（占9．3％），无tt型，T等位基因频率为95．3％、t等位基因频率为4．7％。分析基因型与骨密度的关系显示：三个多态性位点各基因型人群在腰椎、股骨颈、大转子、Ward’s区4个部位骨密度差异无统计学意义（P〉0．05）。结论维生素D受体基因BsmI，ApaI及TaqI多态性与骨密度间没有关联，尚不能作为预测福州地区老年男性发生骨质疏松危险性的遗传标志。

维生素D受体基因TaqⅠ多态性与绝经后妇女骨密度的关系

目的了解福州地区绝经后妇女维生素D受体基因TaqⅠ多态性的分布,探讨维生素D受体基因TaqⅠ多态性与绝经后妇女骨密度的关系。方法用双能X线骨密度仪检测592例绝经后妇女的腰椎、股骨颈、大转子和Ward’s三角骨密度,应用PCR-RFLP技术检测维生素D受体基因TaqⅠ多态性。结果①维生素D受体基因型分布频率为TT型90.37%,tt型0.17%,Tt型9.46%。等位基因频率为T 95.1%,t 4.9%,基因型分布符合Hardy-Weinberg定律。②分析其基因型与骨密度的关系:TT、tt、Tt 3种基因型在腰椎、股骨颈、大转子、Ward’s区4个部位骨密度差异均无显著性。结论维生素D受体基因TaqⅠ多态性与骨密度间无关联,不能作为预测福州地区绝经后妇女发生骨质疏松危险性的遗传标志。

福州地区老年男性雌激素受体α基因多态性与骨密度关系:150例数据分析

背景：关于男性骨质疏松症候选基因的研究，不同国家和地区的学者针对不同的种族和人群，得出的结论并不一致。目的：分析福州地区汉族老年男性雌激素受体α基因XbaⅠ及PvuⅡ多态性分布，进一步研究其与骨密度的关系。设计、时间及地点：骨密度及基因型相关性分析，于2007-02/2008-09在福建省中医药研究院门诊部及中医药管理局经络三级实验室完成。对象：福州地区60岁以上汉族男性150例，年龄（68.92±5.33）岁，体质量（66.47±9.08） kg，体质量指数（24.23±3.12） kg/m2。方法：双能X射线骨密度仪检测受试者正位L2~4、左侧股骨颈、大转子和Ward’s区骨密度，应用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）检测雌激素受体α基因XbaI及PvuⅡ多态性。主要观察指标：骨密度；雌激素受体α基因型；年龄；身高；体质量。结果：150例受试对象中，雌激素受体α XbaI基因型分别为XX型10例（占6.7%）、Xx型56例（占37.3%），xx型84例（占56.0%），X等位基因频率为25.3% 、x等位基因频率为74.7% ；PvuⅡ基因型分别为PP型18例（占12.0%）、Pp型78例（占52.0%），pp型54例（占36.0%），P等位基因频率为38.0% 、p等位基因频率为62.0% ；基因型分布均符合Hardy-Weinberg定律。分析基因型与骨密度的关系显示：与XX基因型相比，xx基因型人群在Ward’s区、大转子具有较高骨密度值，差异具有显著性 （P 分别为0.0192及0.087）；xx基因型人群在大转子比Xx基因型具有较高骨密度值 （P 〈 0.05）；PvuⅡ多态性各基因型间骨密度值均无差异。结论：雌激素受体α基因XbaⅠ多态性与福州地区汉族老年男性骨密度相关，x基因是骨密度保护因素。

福州地区汉族妇女绝经后维生素D受体基因BsmⅠ多态性与骨密度的关系

目的观察福州地区绝经后汉族妇女维生素D受体（VDR）基因Bsm I多态性分布，研究其与骨密度（BMD）的关系。方法选择福州地区绝经后汉族妇女290例，检测正位第2～4腰椎、左侧股骨颈、大转子和Ward’s区骨密度，应用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）检测维生素D受体基因Bsm I多态性。结果VDR基因型分别为BB型7例（2．4％），Bb型39例（13．5％），bb型244例（84．1％）；b等位基因频率90．9％，B等位基因频率9．1％，基因型分布符合Hardy-Weinberg定律。分析基因型与骨密度的关系，BB、Bb与bb3种基因型在腰椎、股骨颈、大转子、Ward’S区4个部位的骨密度差别无统计学意义（P〉0．05）；b或B等位基因与四部位骨密度无相关性（P〉0．05）。结论维生素D受体基因BsmI多态性与BMD间无关联，不能作为预测福州地区绝经后妇女发生骨质疏松危险性的遗传标志。

绝经后妇女甲状旁腺素基因多态性与骨密度:福州地区的调查

背景:有研究证实,绝经后妇女骨密度与甲状旁腺素基因有密切关系,但在不同地区人群中结果存在差异性。目的:探讨福州地区绝经后妇女甲状旁腺素基因(PTH)BstBⅠ多态性与骨密度的关系。方法:用双能X射线骨密度仪检测福州地区150例绝经后妇女的腰椎、股骨颈,大转子和Ward’s三角骨密度,应用PCR-RFLP技术检测甲状旁腺素基因BstBⅠ多态性。结果与结论:①甲状旁腺素基因型分布频率为BB型68.8%、Bb型24.1%、bb型7.1%。等位基因频率为B81%,b 19%,基因型分布符合Hardy-Weinberg定律。②分析其基因型与骨密度的关系:BB、Bb、bb 3种基因型在股骨颈、大转子、Ward’s三角区4个部位骨密度差异均无显著意义(P>0.05)。甲状旁腺素基因BstBⅠ位点多态性与骨密度间无关联,尚不能作为预测福州地区绝经后妇女发生骨质疏松危险的遗传标志。

福州地区绝经后妇女骨钙素基因Hind Ⅲ多态性与骨密度的关系

目的探讨绝经后妇女骨钙素基因（OC）HindⅢ多态性与骨密度的关系。方法用双能X线骨密度仪检测247例绝经后妇女的腰椎、股骨颈、大转子和Ward s三角骨密度,应用PCR-RFLP技术检测OC基因HindⅢ多态性。结果①OC基因型分布频率为HH型4.9%,hh型49%,Hh型46.1%。等位基因频率为H27.94%,h72.06%,基因型分布符合Hardy-Weinberg定律。②HH基因型与hh型在股骨颈、大转子、Ward s三角区骨密度有显著性差异（P〈0.05）;HH基因型与Hh型在大转子、Ward s三角区骨密度也有显著性差异（P〈0.05）。③有h等位基因的股骨颈、大转子、Ward s三角区骨密度显著低于无h等位基因（P〈0.05）。结论福州地区绝经后妇女OC基因多态性与骨密度存在相关性,有h等位基因绝经后妇女在股骨颈、大转子、Ward s三角区有低骨密度风险。