一种TMV抗性离体快速鉴定方法及其在烟草育种上的应用

烟草普通花叶病,由烟草花叶病毒(tobacco mosaic virus,TMV)引起,是烟草生产中的常见病害之一,培育和种植抗病品种是解决该病害的主要途径,育种材料的抗性鉴定是抗病育种的关键环节。为提高TMV抗性鉴定效率,本研究根据TMV与N基因作用的原理设计了一种烟草苗期离体接种快速鉴定TMV抗性的方法。该方法为研磨病害严重程度为5级的新鲜病叶(10 g)并过滤,往过滤液中加纯净水(100 m L)稀释为病毒液;摘取6~7叶期烟苗的叶片(从上往下数第3叶)进行离体摩擦接种;3 d后观察坏死斑发生情况。应用此鉴定方法对20份烟草材料的TMV抗性进行鉴定,结果表明13份材料出现免疫斑;同时,对20份烟草材料的N基因进行了检测,结果表明13份材料含有N基因。出现免疫斑的材料与含N基因的材料相一致,证明了苗期离体接种方法鉴定TMV抗性的可行性。将此方法应用于21524份育种中间材料(7047株BC_(1)F_(3)、10013株BC_(1)F_(4)、4464株BC_(1)F_(5))的TMV抗性鉴定中,结果得到9829株(3103株BC_(1)F_(3),4762株BC_(1)F_(4),1964株BC_(1)F_(5))抗性植株。鉴定结果基本符合10761株抗性植株(3523株BC_(1)F_(3),5006株BC_(1)F_(4),2232株BC_(1)F_(5))的理论值,进一步证明了此方法的可靠性。本研究对大量烟草育种中间材料的TMV抗性鉴定具有重要的应用价值。