β-catenin基因多态性与乙型肝炎病毒相关肝细胞癌易感性的关系

背景与目的:Wnt信号通路在乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)相关肝细胞癌(肝癌)发生发展中起重要作用,β-catenin基因编码的β-catenin是该通路的关键因子,已在肝癌组织检测到β-catenin基因变异且存在于exon3的condons32～45之间。本研究旨在探讨β-catenin宿主基因多态性与人肝癌易感的关系。方法:对162例有慢性HBV感染的肝癌患者进行肝癌家系和流行病学调查后,对有和无肝癌家族史病例按匹配条件进行1:1配对。采用DNA聚合酶链反应-基因测序方法对入选患者进行β-catenin基因exon3扩增及序列检测,并结合肝癌家系调查结果比较分析SNP rs28931588、rs28931589和codons31～46基因序列。结果:162例中有肝癌家族史者16例(9.87%)。选择24例(包括有肝癌家族史12例和与之匹配的无肝癌家族史12例)进行基因exon3扩增及测序。24例患者在SNP rs28931588、rs28931589位点均为"G",其中3例exon3的codons32～46序列有差异,存宿主基因多态性。但是未能见到明确的突变规律和特异性热点突变位点。结论:β-catenin基因exon3中SNP rs28931588、rs28931589和codons31～46序列可能不是HBV相关肝癌的遗传学标志。

乙型肝炎血清HBV-DNA含量与肝纤维化、实质病变程度的关系

目的探讨慢性乙型病毒性肝炎患者不同肝纤维化分期的肝实质内HBV-DNA的复制状态。方法85例慢性乙型病毒性肝炎患者均同期接受血清HBV-DNA核酸扩增（PCR）荧光定量、肝活检组织学肝纤维化分期及B型超声波仪测量肝脏径线。结果肝组织肝纤维化分期从S1～S4期，患者血清HBV-DNA定量、右肝斜径和左肝上下径的均数值均呈趋势下降，差异具有统计学意义（P〈0．05），不同分期HBV-DNA含量两两比较，S1期与S4期、S2期与S4期差异有统计学意义（P〈0．05），S1期与S2、S2期、S3与S2、S4期差异无统计学意义（P〉0．05）。将HBV-DNA定量及其肝实质系数（右肝斜径和左肝上下径乘积）联合考虑，相同量系数的肝实质所承担产生血清HBV-DNA数量的差异无统计学意义（P〉0．05）。结论慢性乙型肝炎不同纤维化分期中“健存”肝细胞内HBV-DNA的复制状态可能并无改变，患者血清HBV-DNA含量下降与提供HBV-DNA复制场所的肝细胞总量减少有关。

肝衰竭程度对拉米夫定治疗HBeAg阴性ACLF生存率的影响

【目的】探讨在HBeAg阴性慢加急性肝衰竭(ACLF)患者,拉米夫定治疗开始时肝功能衰竭程度对其转归的影响。【方法】分析71例接受拉米夫定+内科基础治疗患者在治疗开始时、治疗后或临终前的MELD值和血清HBV DNA载量,比较不同MELD值范围者生存率。【结果】MELD高分值组(≥31分)25例,治疗开始和临终前MELD值(log10 copies/mL)依次为34±4和39±9,HBV DNA载量分别为5.6±1.9和3.6±1.0;MELD中分值组(23～31分)27例,MELD值(log10copies/mL)由治疗前25±3升至治疗后30±10,HBV DNA载量由5.5±1.8降为3.2±1.1;MELD低分值组(≤23分)19例,MELD值(log10copies/mL)由治疗前19.5±2.0降至治疗后15.7±8.0,HBV DNA载量由6.3±1.6降为3.1±1.0。各组内比较,治疗前后MELD值、HBV DNA载量的差异均有统计学意义(P<0.05)。3组间比较,治疗前后HBV DNA载量的差异均无统计学意义(P>0.05),但患者生存率依次为8.00%(2/25),55.56%(15/27)和84.20%(16/19),组间两两比较的差异均有统计学意义(P<0.05)。【结论】治疗开始的肝衰竭程度显著影响HBeAg阴性ACLF患者拉米夫定+内科基础治疗转归。当MELD值≥31分,生存率低。

空洞型肺隐球菌病并脑膜炎一例报告

空洞型肺隐球菌病并脑膜炎临床少见,且无特异性表现,易误诊为结核病。该文报告1例以空洞为突出表现的肺隐球菌病并发脑膜炎患者的临床资料,并与文献对比,结果提示:①空洞型肺隐球菌病的发生率低,肺结核误诊率较高;②隐球菌肺炎和脑膜炎的临床和影像学均无特异性,早期病原学或病理组织检出新生隐球菌是提高该病诊断率的关键。

血清HA、HPCⅢ、Ⅳ-C对肝纤维化评估的意义

我们对1996年3月—1997年5月在本科住院的217例患者,有放射免疫法检测其血清透明质酸酶(HA)、前胶原纤维Ⅲ(HPCⅢ)和胶原纤维Ⅳ(Ⅳ-C)三项指标值从急性肝炎到慢性重症肝炎总体呈上升趋势,可作为评估肝纤维化的指标,其中HA敏感性优于HPCⅢ及Ⅳ-C,联合检测优于单项检测,而且肝纤维化存在可逆性及活动性。

ITP病人外周血中T细胞免疫抑制性受体Tim-3、LAG-3和BTLA的表达特点

免疫性血小板减少症（Immune thrombocyt-openia,ITP）是一种自身免疫性出血性疾病,T细胞免疫调控在ITP的发生发展中起重要作用。我们前期研究发现了ITP中存在异常的TCR亚家族克隆增殖和TCR信号通路。近几年系列研究发现ITP的T细胞免疫异常与一些介导免疫耐受的分子表达异常相关。

妊娠中晚期重型肝炎对孕妇及胎儿预后影响的研究

目的研究妊娠中晚期重型病毒性肝炎(以下简称重肝)对孕妇及胎儿预后的影响。方法观察引起妊娠中晚期重肝的感染病原体,比较各型各期患者的病死率、存活组和死亡组之间各项指标、并发症发生的差异以及胎儿病死率与HBV感染的关系。结果HBV相关、HEV相关、重叠感染率分别为66.67%、25.93%、29.63%。总病死率为68.52%,急性、亚急性及慢性妊娠中晚期重肝在病死率方面比较差异无显著性(P>0.05);中期、晚期妊娠重肝患者病死率比较差异无显著性(P>0.05)。存活组和死亡组在凝血酶原时间(PT)、血清总胆固醇(TC)及肝脏体积缩小等指标上差异有显著性(P<0.05)。病死率随着并发症增加而升高。胎儿总病死率48.15%,其中HBV感染相关的病死率占55.56%。结论引起妊娠中晚期重肝的病原体以HBV、HEV为主;该组病例的孕产妇及胎儿病死率高;其孕妇转归与PT、TC、肝脏体积大小及并发症相关;胎儿预后可能与HBV感染有关。

慢性乙型肝炎患者血清AFP水平与肝组织炎症分级和纤维化分期的关系

目的探讨慢性乙型肝炎自然病程中血清AFP水平变化与肝组织炎症分级和肝纤维化分期的关系。方法在189例慢性乙型肝炎患者行肝活检,并检测血清甲胎蛋白水平。结果在HBeAg阳性者,肝组织炎症1、2、3和4级血清AFP水平分别为4.09±1.94μg/L、6.51±3.42μg/L、19.71±23.72μg/L和33.88±24.29μg/L;在HBeAg阴性者,分别为3.99±2.65μg/L、6.74±4.22μg/L、22.21±23.83μg/L和40.02±45.32μg/L;在HBeAg阳性者,肝纤维化Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ期血清AFP水平分别为5.28±3.00μg/L、6.97±3.46μg/L、18.16±20.26μg/L和35.06±28.56μg/L;在HBeAg阴性者,肝纤维化Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ期血清AFP水平分别为4.89±3.20μg/L、5.62±3.40μg/L、19.51±23.00μg/L和32.89±37.88μg/L。结论在慢性乙型肝炎的自然病程中,血清AFP水平的轻度升高与肝组织炎症分级和肝纤维化分期相关,而与HBeAg状态无关。

促红细胞生成素通过激活ERK和p38 MAPK抑制小鼠骨髓间充质干细胞成脂分化

目的:探讨促红细胞生成素(EPO)是否抑制小鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)分化为脂肪细胞及其机制。方法:分离提取小鼠骨髓MSCs,用3-异丁基-1-甲基黄嘌呤、胰岛素和地塞米松联合诱导成脂分化,实验组加入不同浓度EPO干预,诱导分化第20天油红O染色观察并进行定量分析细胞分化程度;MTT法观察不同浓度EPO对MSCs增殖能力的影响。实时荧光定量PCR检测过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)、CCAAT/增强子结合蛋白α(C/EBPα)、脂肪酸结合蛋白4(FABP4)和脂联素mRNA表达水平;Western blotting检测PPARγ及细胞外信号调节激酶(ERK)和p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)磷酸化水平。结果:诱导分化20 d,EPO能显著抑制MSCs的成脂分化,降低油红O染色后的吸光度值,诱导分化过程中各浓度的EPO不影响MSCs增殖活性。EPO能够下调成脂过程中PPARγ、C/EBPα、FABP4和脂联素mRNA表达,增加分化过程中ERK、p38 MAPK及PPARγ蛋白磷酸化。结论:EPO可能通过增加p38 MAPK和ERK蛋白磷酸化,下调PPARγ、C/EBPα、FABP4和脂联素mRNA表达,从而抑制MSCs成脂分化。

姜黄素对耐格列卫人慢性粒细胞白血病细胞凋亡的诱导作用

目的探讨姜黄素对格列卫耐药人慢性粒细胞白血病细胞株K562/Glv的促凋亡作用及其机制。方法采用cck-8的方法检测姜黄素对K562/Glv细胞的剂量-效应曲线及时间-效应曲线,台盼蓝染色观察细胞存活率;流式细胞仪检测姜黄素作用K562/Glv细胞的周期、凋亡变化、线粒体膜电位(Ψm△);比色法检测Caspase-3酶活性变化。结果姜黄素对K562/Glv细胞的生长抑制作用呈剂量依赖性,1.0μmol/L即有明显作用,5.0μmol/L增殖抑制率为(45.60±2.23)%,10.0μmol/L为(77.95±3.84)%;姜黄素作用于K562/Glv细胞,细胞周期阻滞于G2/M期,线粒体膜电位Ψm△在1 h时显著升高,12 h时恢复至正常水平,24 h时下降至其79%,Caspase-3酶活性增加。结论姜黄素通过使线粒体膜电位Ψm△异常,并激活Caspase-3,诱导耐格列卫人慢性粒细胞白血病细胞K562/Glv的凋亡。

乙型肝炎自然病程中不同纤维化分期及癌变时乙型肝炎病毒的复制状态

目的为了阐明慢性乙型肝炎自然病程中不同纤维化分期及癌变时乙型肝炎病毒(HBV)e系统状态和HBV DNA载量的变化状态。方法使用酶联免疫吸附试验和荧光多聚酶链反应分别检测并比较了慢性乙型肝炎不同纤维化分期和癌变病人血清的HBVe系统状态和HBVDNA载量。结果慢性乙型肝炎肝纤维化Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期和癌变时的年龄分别为27·1±7·8、29·3±7·1、35·5±7·4、39·1±9·3和50·8±9·6岁。HBeAg的阳性率分别为80%(20/25)、70.9%(22/31)、47·8%(11/23)、25%(7/28)和17·5%(11/63);抗-HBe阳性率分别为8%(2/25)、16.1%(5/31)、30·4%(7/23)、53·6%(15/28)和71·4%(45/63)。HBVDNA载量分别为2·3×107±0·2×102、7·1×106±1·2×102、5·7×105±1·9×102、1·2×105±0·7×102和4·7×104±4·1×102(copies/m1)。年龄,HBeAg和抗-HBe阳性率以及HBVDNA载量在肝纤维化Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期和癌变五组之间的两两比较存在统计学差异。结论随着慢性乙型肝炎肝纤维化从Ⅰ期向Ⅳ期发展以及部分病人发生癌变,病人的年龄逐渐地增加。HBeAg的阳性率逐渐降低,抗-HBe阳性率逐渐升高,可能与部分病人由于长期受到机体的免疫压力,HBV相继发生HBV前C区或基本核心区启动子双变异有关;另外,HBVDNA载量也呈逐渐下降的趋向,可能与肝纤维化逐步的加重造成肝实质细胞逐渐的减少,导致提供HBV复制的场所进行性减少有关。

长学制传染病教学中TBL(Team-Based Learning)模式的应用和改进

目的:研究TBL教学在八年制学生传染病教学中的应用成效及存在的问题,为改进和推广该教学方法提供参考依据。方法:对2006级八年制学生部分理论课采用TBL教学,进行闭卷考试及问卷调查。结论:与传统教学模式相比,TBL教学对提高学生学习兴趣,培养学分分析问题、解决问题、沟通能力和团队协作精神以及提高考试成绩均有帮助。

散发性布鲁菌病一例

散发性布鲁菌病临床表现复杂多样、无特异性,极易漏诊、误诊。该文报道1例辗转多间三甲医院诊断的散发性布鲁菌病患者,由于症状以发热、腰痛等非特异性症状为主,流行病学史不典型,诊断较困难,曾多次被误诊、漏诊,最后通过血培养布鲁菌阳性确诊,使用利福平联用复方磺胺甲唑治疗效果好,获临床痊愈。该例诊治过程提示,对长期反复发热的患者应考虑布鲁菌病的诊断,提高对布鲁菌病认识水平是减少误诊、漏诊的关键。

HBeAg阴性慢性乙型肝炎急性发作缓解过程MELD评分变化与HBV DNA载量的关系

目的弄清HBeAg阴性慢性乙型肝炎不同程度肝病急性发作的极期及缓解期HBV DNA载量的变化及其差别。方法观察并比较62例乙型肝炎慢加急性肝衰竭和48例慢性乙型肝炎重度肝病急性发作极期和缓解期的MELD评分和HBV DNA载量。结果乙型肝炎慢加急性肝衰竭组和慢性乙型肝炎重度组极期和缓解期的MELD评分及HBV DNA载量均存在差别。乙型肝炎慢加急性肝衰竭组缓解期HBV DNA载量水平低于慢性乙型肝炎重度组。结论无论乙型肝炎慢加急性肝衰竭还是慢性乙型肝炎重度,随着肝病急性发作极期至缓解期MELD评分的减少,HBV DNA载量发生自发性下降,而且,慢加急性肝衰竭下降水平大于慢性乙型肝炎重度。

非甲～非丙型急性肝炎抗-HEVIgM、IgG的血清学规律

目的探讨非甲～非丙型急性肝炎中抗-HEVIgM和抗-HEVIgG的血清学规律。方法由酶联免疫吸附方法 ,用戊型肝炎病毒基因开放读区2和3重组多肽抗原检测472例非甲～非丙型急性肝炎病人血清的抗-HEVIgM、IgG。结果出现戊型肝炎病毒血清学应答的病人有80.51%(380/472),抗-HEVIgM和IgG均阴性占19.49%(92/472)。在380例有戊型肝炎病毒血清学应答的病人中,抗-HEVIgM和IgG均阳性占57.11%(217/380);仅抗-HEVIgG阳性占31.84%(121/380);仅抗-HEVIgM阳性占8.95%(34/380);抗-HEVIgM阴性仅出现抗-HEVIgG从阴性转阳性占2.11%(8/380)。结论用戊型肝炎病毒基因开放读区2和3重组多肽抗原检测抗-HEVIgM、IgG存在4种阳性模式,抗体反应的敏感性有待提高。

慢性乙型肝炎重度和慢加急性肝衰竭患者MELD评分与HBV DNA载量的变化

目的了解慢性乙型肝炎重度和肝衰竭患者极期与缓解期HBV DNA载量的变化。方法观察并比较51例慢性乙型肝炎重度和56例慢加急性肝衰竭患者病情极期和缓解期的MELD评分和HBV DNA载量变化。结果慢加急性乙型肝炎肝衰竭患者极期和缓解期MELD评分分别为20.5±4.4分和12.2±6.1分,HBV DNA载量为6.2±1.5log10 copies/ml和4.5±1.5log10 copies/ml,而慢性乙型肝炎重度患者极期和缓解期MELD评分则分别为11.9±3.2分和6.4±3.1分,HBV DNA载量为6.5±1.5log10 copies/ml和4.9±1.8log10 copies/ml。慢加急性乙型肝炎肝衰竭和慢性乙型肝炎重度患者极期和缓解期之间MELD评分和HBV DNA载量均存在差别(t=6.692～13.215,P均<0.000)。结论不论慢加急性乙型肝炎肝衰竭还是慢性乙型肝炎重度患者,随着肝病的缓解,其MELD评分明显下降,HBV DNA载量出现显著的自发性下降。

单项抗-HEV-IgG阳性对急性戊型肝炎的临床诊断价值及其血清学特征

目的探讨单项抗-HEV-IgG阳性对急性戊型肝炎的临床诊断价值。方法收集连续收治的非甲～非丁型急性肝炎患者168例,其中仅抗-HEV-IgG阳性而抗-HEV-IgM阴性者53例,而抗-HEV-IgM/抗-HEV-IgG阳性115例,分析比较了他们的年龄、肝功能、肝脾B型超声波检查情况。结果在168例非甲～非丁型急性肝炎患者中,有31.55%(53/168)患者从第1病周至第6病周以上仅检测到抗-HEV-IgG阳性,而抗-HEV-IgM阴性;68.45%(115/168)患者抗-HEV-IgM/抗-HEV-IgG阳性。53例单项抗-HEV-IgG阳性者与115例抗-HEV-IgM/抗-HEV-IgG阳性者的年龄、肝功能和肝脾B型超声波检查指标的比较,两组之间均无显著性差异(P=0.311～0.976)。结论使用人工合成的戊型肝炎病毒开放阅读区1和2编码的重组多肽抗原检测抗-HEV-IgM和IgG,如果单项抗-HEV-IgG阳性、有急性病毒性肝炎的肝功能改变,并能排除其他病因者,可以临床诊断急性戊型肝炎。

人脐带间充质干细胞向Raji细胞迁移并促进其增殖的研究

目的:体外研究人Burkitt淋巴瘤细胞系Raji细胞和人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUC-MSC)间的相互作用,探讨MSC在恶性肿瘤治疗中的潜在应用前景。方法:将Raji细胞和hUC-MSC进行直接接触和非接触共培养,观察MSC对Raji细胞的作用,采用CCK-8法观察Raji细胞的增殖情况,流式细胞术检测Raji细胞周期的变化,同时应用siRNA干扰技术分析血管内皮生长因子(VEGF)在MSC向Raji细胞迁移过程中的作用(即用siRNA阻断Raji细胞VEGF的表达),ELISA法检测Raji细胞培养上清VEGF的分泌量,qRT-PCR法检测Raji细胞VEGF mRNA表达的变化。结果:MSC及其条件培养基(MSC-conditioned medi-um,MSC-CM)均促进Raji细胞的增殖,72 h MSC-CM培养的Raji细胞增殖活性为0.99±0.05,而对照组为0.71±0.07(P<0.01)。无论是直接接触还是条件培养基均促使Raji细胞从G0/G1期向S期的转化,MSC-CM的作用尤其明显,S期的细胞数目由16.33±1.37增加到28.50±1.41,而G0/G1期细胞数目则由77.70±1.57下降到54.40±1.57(P<0.01)。siRNA干扰Raji细胞后,VEGF无论是在蛋白水平还是mRNA水平都明显下降,且MSC向Raji细胞的趋化能力也显著降低(96.00±5.28 vs 143.00±7.20,P<0.01)。结论:MSC具有向Raji细胞趋化的作用,其机制与Raji细胞分泌VEGF呈正相关;MSC可促进Raji细胞从G0/G1期向S期转化,从而促进Raji细胞的增殖。

肝肺吸虫病致嗜酸粒细胞增多症1例

嗜酸粒细胞增多症(Eosinophilia)是指外周血嗜酸粒细胞绝对值>0.5×10^9/L,临床上常与寄生虫感染、过敏性疾病和肿瘤等疾病有关。肺吸虫病(Paragonimiasis)属人兽共患蠕虫病,肺外型肺吸虫病发病率低,肝脏则更少见[1]。由于症状缺乏特异性,常误诊为肝癌、肝脓肿、肝结核病等[2]。现将本院收治的1例肝肺吸虫病致嗜酸粒细胞增多症的临床资料进行报道并进行相关文献复习。