小鼠载脂蛋白E基因的组织表达谱分析

目的:探讨小鼠载脂蛋白E(apoE)基因的组织表达特点。方法:提取小鼠的肝、脑和心等17个组织的RNA,采用RTPCR的方法对apoE基因在上述组织中的表达进行研究。结果:apoE基因在肝组织表达最强,其次是脊髓和脑,肺、肾、心、脾、胸腺、小肠、胃、膀胱、血液、肾上腺、子宫、胰腺和主动脉也有不同程度的表达,但在腹肌中几乎不表达。结论:小鼠的apoE基因组织表达谱与人的apoE基因组织表达谱有较高的一致性,与猪的相比差异也不大。

广西一脊髓小脑共济失调3型家系SCA3/MJD基因突变和多态性的分析

常染色体显性脊髓小脑型共济失调（Autosomal dominant spinocerebellarat axias，ADCAs）是一种神经系统退行性疾病，具有高度的遗传异质性，其中脊髓小脑型共济失调3型（Spinocerebellarat axiastype3，SCA3）是一种常见的类型。文章通过PCR扩增广西一个脊髓小脑共济失调家系SCA3／MJD基因片段，用毛细管电泳和测序方法检测了SCA3／MJD基因的CAG重复序列大小、传递特点以及SCA3／MJD基因的变异。结果显示：家系的所有4名患者和3名无症状携带者（Asymptomati ccarrier）的SCA3／MJD基因第10外显子中存在异常扩增的CAG重复序列，重复次数为64～71次；CAG重复次数在具有cgg等位基因的正常个体间传递时保持不变，提示cgg等位基因不是正常个体两代间CAG重复序列稳定性的影响因素。SCA3／MJD基因中另有两个单碱基点突变，一个是内含子区的杂合性突变（IVS9．113T〉c），另一个是外显子区域的错义突变（220G〉A，220Glu〉Gly）。这两个点突变为首次报道，但尚不能明确这两个新的点突变对SCA3表型的影响。

小鼠TIE2基因启动子的克隆及转录活性分析

克隆小鼠TIE2基因的启动子并分析其转录活性。设计并合成引物,以小鼠肝脏组织DNA为模板,巢式PCR扩增小鼠TIE2基因启动子区。将扩增获得的系列截短片段克隆入荧光素酶(Luc)报告基因表达载体pGL3-Basic中,构建系列启动子区转录活性报告质粒pGL3-TIE2-Luc。报告质粒与内参质粒共转染SVEC4-10、NIH3T3、HUVEC及NIT-1细胞系,48 h后收获细胞检测双荧光素酶的表达情况。构建的pGL3-TIE2-Luc系列报告质粒经过酶切鉴定及DNA测序分析都显示正确;转染4种细胞系后进行双荧光素酶活性检测的结果表明,TIE2基因启动子区域(-2056-+1)具有较强的转录活性。成功构建小鼠TIE2基因启动子报告质粒,证实TIE2基因上游区域(-2056-+1)具有较强的启动子活性。

拉曼光谱法鉴别盐酸左氧氟沙星注射液的影响因素探究

目的通过制备不同厂家相同规格的盐酸左氧氟沙星注射液的拉曼光谱图,以经典最小二乘法求得相关系数进行鉴别,探究配方、包装、检测仪器差异这几个因素对鉴别结果的影响。方法分别收集由3个厂家生产,规格为100 mL:200 mg的盐酸左氧氟沙星注射液,扫描获得拉曼光谱图,采用Essential FTIR软件进行基线校正、一阶导数等预处理后建立模型,使用RFDI软件,以经典最小二乘法获得相关系数,进行结果判定。结果相关系数显示配方差异不影响盐酸左氧氟沙星注射液鉴别结果判定,仪器差异对鉴别结果有影响,非PVC共挤膜包装和聚丙烯输液瓶包装对结果判定无影响,玻璃瓶包装会导致结果的误判。结论为保证现场抽检时鉴别结果的准确性,对包装为非PVC共挤膜或聚丙烯输液瓶的样品可进行无损测定,对包装为玻璃瓶的样品应当去包装直接测定,且在抽检之前必须先进行预实验以选择更稳定的拉曼光谱仪。

液-质串联法测定软胶囊中药用油辅料内黄曲霉毒素B_1的含量

目的:尝试利用液相色谱-串联质谱法对软胶囊中药用油辅料内黄曲霉毒素B_1含量进行测定。方法:以甲醇-0.1%甲酸水溶液为溶剂提取软胶囊中花生油所含黄曲霉毒素B_1,离心后取上清液过中性氧化铝固相萃取小柱净化,浓缩后进样测定,以甲醇-0.1%甲酸流动相梯度洗脱,流速为0.3 ml·min^(-1),柱温:30℃,进样量:25μl。采用电喷雾离子化四极杆串联质谱,多反应监测方式测定样品的浓度。结果:黄曲霉毒素B_1在0.098~1.960μg·L^(-1)范围内线性关系良好(r=0.999 5),检出限为0.05μg·L^(-1),平均加样回收率为97.73%,RSD=4.625%(n=6)。结论:此法灵敏准确,专属性强,干扰少,重现性佳,对含油药物制剂中黄曲霉毒素B_1含量检测有参考意义。

药物分析领域拉曼光谱表面信号增强剂应用研究进展

表面增强拉曼光谱法(SERS)以其独特优势在药物分子研究中具有巨大的应用价值,其中拉曼光谱活性表面增强剂与药物分子结合效果的好坏是该方法的关键所在。该文介绍了拉曼光谱表面信号增强剂与药物分子结合的效果及其应用研究进展,总结了SERS增强剂对信号放大的特点,并展望了其在药学方面的应用前景。

政府发布食品安全信息的特征与公众持续关注意愿之间的关系研究:基于多群组结构方程模型分析

本文旨在研究政府所发布食品安全信息的特征与公众持续关注意愿之间的关系,以HSM和ECM-ISC模型为理论框架,通过构建政府食品安全信息发布与公众对食品安全信息持续关注意愿之间的结构方程模型,以认知动机和认知能力为调节变量进行多群组分析。结果显示食品安全信息质量、互助性、表达方式、实用性、满意度可影响公众持续关注食品安全信息行为,其中满意度是最主要的影响因子。多群组分析结果显示,购买频率、遇到频率、教育程度三个调节变量在不同群组之间差异有统计学意义。政府监管部门应该加强食品安全信息的披露,强化发布的内容、方式、途径等。

LC-MS/MS法追踪测定人血浆中克伦特罗的浓度

目的用液相色谱-质谱串联法测定人血浆中的克伦特罗含量并对其舌下片剂与气雾剂的疗效进行比较。方法血浆离心后过玻璃纤维滤膜,经酶解加入氘代克伦特罗内标溶液,用C18小柱净化后以3%的氨水甲醇溶液对Oasis MCX小柱进行洗脱,吹干,以0.1%甲酸水溶液-甲醇溶液（95：5）溶解残余物,用液相质谱串联法测定,以0.1%甲酸乙腈溶液和0.1%甲酸溶液为流动相梯度洗脱。结果克伦特罗在0.25-10.0ng·mL^-1与峰面积线性关系良好,定量下限为0.10 ng·mL^-1。结论本法灵敏准确、重现性与特异性强、干扰少,作为研究人血浆中克伦特罗浓度变化的检测方法很理想。

中老年居民保健食品风险认知及其影响因素——基于广西7个城市的数据调查分析

文章对广西7个城市的中老年民众进行随机抽样调查,研究中老年民众对保健食品风险认知基本状况,以及在个体特征、知识理解、健康意识、信任信心、消息来源几个方面的影响。采用风险认知的6个维度测量风险认知情况,并采用因子分析、多元阶层回归分析对保健食品风险认知及其影响因素进行分析。研究显示中老年民众对保健食品有较高的风险认知水平,个体属性(教育)、知识水平、健康意识、信任信心(政府、企业品牌)、信息来源(专业医务工作者、标签说明、亲朋好友)对保健食品风险认知呈负向影响;个体属性(经济)、信任(专家)、信息来源(媒体广告)呈正向影响。要让中老年民众合理健康食用保健食品,科学认知保健食品风险,应从积极引导提高认识,监管覆盖多面角,企业自律等方面多管齐下。

表面增强拉曼光谱法检测人尿液、粪便中马来酸依那普利的浓度及其临床应用

目的:建立检测人尿液和粪便中马来酸依那普利浓度的方法,并将其应用于临床。方法:尿液和粪便样品经前处理后,与表面信号增强剂胶体银溶胶按1∶1(V/V)的比例混合,采用表面增强拉曼光谱法检测。激发功率为400 mW,激发波长为785 nm,分辨率为4.5 cm^(-1),用于定性的拉曼位移为(800±2)、(1 050±2)、(1 330±2)、(1 450±2)和(1 630±2)cm^(-1),用于定量的拉曼位移为(1 050±2)cm^(-1)。结果:马来酸依那普利尿药、粪药浓度分别在0.50~100.00μg/ml和2.00~100.00μg/g范围内线性关系良好(r分别为0.989 3和0.978 0,n=6),定量下限分别为0.50μg/ml和2.00μg/g,检测限分别为0.10μg/ml和1.30μg/g;日内、日间RSD<5%,方法回收率分别为95.24%~99.38%、86.73%~94.57%,提取回收率分别为84.29%~90.43%(RSD=0.84%)、82.36%~87.70%(RSD=1.84%)。采用该法检测15例高血压患者马来酸依那普利的尿药浓度为15.31~33.46μg/ml,粪药浓度为5.08~41.79μg/g;疗效判定为"有效"的患者平均尿药、粪药浓度与"未见好转"的患者比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:表面增强拉曼光谱法用于人尿液和粪便中马来酸依那普利浓度的检测简便、快速。

一个儿童早老症家系临床特征分析和致病基因研究

目的 通过对一个罕见早老症家系的分析,探讨早老症患者的临床病理学特征和遗传学因素.方法 收集1个早老症家系（2代共5名家庭成员,子女3人均为患者）3例患者的基本资料,对其进行临床检查,并对患者手部、肺脏和下颌骨进行影像学分析;同时对3例患者进行染色体核型分析,对该家系进行LMNA基因突变分析.结果 家系中的3例患者半岁左右即可见皮肤硬化症,并表现出生长严重迟缓,极度衰老面容.年长患者影像学检查显示骨质疏松,下颌骨发育不全.染色体核型分析显示,3例患者及其父母核型正常.基因突变分析显示,3例患者均为LMNA基因第9号外显子的纯合突变1579C＞T（R527C）,父母均为LMNAR527C杂合突变.结论 该早老症家系患者符合儿童早老症表型,为LMNA基因R527C纯合突变所致.

人与鼠源内皮抑制素不同标签重组蛋白的表达纯化及活性分析

根据文献报道和NCBI数据库确定人源内皮抑制素(HE)和鼠源内皮抑制素(ME)DNA序列,以DNA合成法分别获得长度为554 bp的人源内和长度为565 bp的鼠源内皮抑素基因;分别构建携带谷胱甘肽巯基转移酶(GST)表达标签的原核表达质粒pGEX-4T1-HE和携带硫氧还蛋白A(TrxA)表达标签的原核表达质粒pET-32a-ME,在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,获得不同表达标签的HE、ME重组蛋白.最后通过鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)试验验证重组蛋白的抗血管生成活性.结果表明,构建了人与鼠源内皮抑制素基因不同标签表达载体,在大肠杆菌中成功诱导表达.获得具有活性的人与鼠源ES重组蛋白.纯化复性后的重组蛋白能明显抑制新生血管的生长.GST和TrxA标签对增进重组ES可溶表达没有显著差异,两组标签的重组蛋白都主要存在于包涵体内.

金、银纳米颗粒溶胶对三种瘦肉精分子拉曼表面信号增强效果及性质比较研究

采用柠檬酸钠还原法制备了银溶胶以及三种不同粒径大小的金溶胶作为拉曼表面增强剂,通过紫外-可见吸收光谱及透射电镜(TEM)比较其尺寸、粒度、分散性及稳定性,后选取盐酸氯丙那林、硫酸特布他林和盐酸班布特罗三种β受体激动剂类药物作为检测对象,观察拉曼信号增强效果。结果表明,金、银溶胶对β受体分子的表面增强拉曼信号增强信号基本上没有干扰。金溶胶的纳米粒子大小对于吸附能力有一定程度的影响,其颗粒大小更易于通过加入柠檬酸钠的方式进行调节,而银纳米溶胶颗粒粒径较不易控制。金溶胶能较长时间保持稳定,而银溶胶较易发生沉淀,但银纳米颗粒与目标分子结合后能产生更为强烈的共振现象,与金溶胶相比具有更强的表面增强活性,在拉曼信号增强目标分子时效果更好。

表面增强拉曼光谱法研究β受体激动剂在生猪体内代谢与残留

探索用表面增强拉曼光谱法检测盐酸克伦特罗等β受体激动剂于给药和停药期间在猪尿液、毛发、粪便和组织中的浓度,为快速检出在饲养和市场流通环节中的瘦肉精提供方法支持。在生猪饲料中以10mg/kg的量添加一种β受体激动剂,并连续喂养14d,然后停止给药,使用正常饲料。在给药期间于l、2、3、4、6、8、10和14d分别采集尿液、毛发和粪便,通过前处理后与表面信号增强剂等体积混合,测定其中的β受体激动剂浓度。停药后每天剪去少量毛发,前处理后测定其中的主药的蓄积浓度。结果显示,样品回收率在94.0%以上,相对标准偏差小于2%。盐酸克伦特罗、硫酸沙丁胺醇、硫酸特布他林、班布特罗、盐酸氯丙那林、富马酸福莫特罗的标准溶液在0.05~50μg/L质量浓度范围呈良好线性关系,定量下限为0.05μg/L;尿液、粪便、毛发样品中在1~50μg/L质量浓度范围呈良好线性关系,定量下限为1μg/L。盐酸莱克多巴胺的标准溶液在0.1~50μg/L质量浓度范围呈良好线性关系,定量下限为0.1μg/L。结果表明,该研究测试方法便捷灵敏,用于β受体激动剂在猪体内代谢分析,以及检测其在猪各组织部位残留情况尤为适宜。

人尿液中盐酸氯丙那林的表面增强拉曼光谱法测定

建立了表面增强拉曼光谱法检测人尿液中的盐酸氯丙那林。以银纳米颗粒溶胶作为表面信号增强剂,选择800~850 cm^(-1)和1 450 cm^(-1)处拉曼特征峰作为定性依据,并选择在800~850 cm^(-1)处进行定量检测。人尿液中盐酸氯丙那林在0.1~0.9 mg/ml范围内线性关系良好,最低检测限为0.05 mg/ml。与高效液相色谱法相比,本法迅速简便,可实现无损检测。

液-质串联法测定深海鱼油胶丸中的黄曲霉毒素B_1

目的：尝试利用液相色谱-串联质谱法对深海鱼油胶丸中黄曲霉毒素B．含量进行测定。方法：以甲醇-0．1％甲酸水溶液为溶剂提取胶丸中鱼油所含黄曲霉毒素B1，离心后取上清液过中性氧化铝固相萃取小柱净化，浓缩后进样测定，以甲醇-0．1％甲酸流动相梯度洗脱，流速为0．3mL／min，柱温30℃，进样量25μL。采用电喷雾离子化四极杆串联质谱，多反应监测方式测定样品的浓度。结果：黄曲霉毒素B，在0．098～1．96ng／mL范围内线性关系良好，r=0．9992，检出限为0．05ng／mL，平均加样回收率为97．73％，RSD=4．625％（n=6）。结论：此法灵敏准确，专属性强，干扰少，重现性佳，对含油保健食品中黄曲霉毒素B，含量检测有参考意义。

表面增强拉曼光谱法对3种β受体激动剂化合物的定性和定量检测

目的以硫酸特布他林、盐酸班布特罗与盐酸氯丙那林为例,研究并建立利用表面增强拉曼光谱检测β受体激动剂的定性与定量方法。方法选择800~850,1 050,1 450 cm^-1处的3个特征峰作为快速鉴定样品中β受体激动剂类药物的定性依据,并选择盐酸氯丙那林为代表,在800~850 cm^-1信号处进行定量检测。结果盐酸氯丙那林在1~9 mg·L^-1内线性关系良好,相关系数为R2=0.997 2,最低检出限为0.1 mg·L^-1。结论本法迅速简便,可实现无损检测,确证性高。

高通量测序技术在肉类掺假检测中的应用进展

肉类掺假现象普遍存在,导致严重的公共卫生风险和侵犯宗教信仰行为。快速、有效、准确和可靠的检测技术是有效监管肉类掺假的关键手段。近年来,基于高通量测序的DNA宏条形码技术发展迅速,具有高通量、高精度和速度快等特点,并且可以实现复杂样品中多个物种的同时检测,因而在肉类及其制品的掺假检测方面具有明显的优势。文中介绍了近20年来高通量测序技术的主要发展历程、DNA宏条形码的技术特点和研究方法,综述了近年来DNA宏条形码技术在肉类掺假检测中的应用,讨论分析了DNA宏条形码技术应用于肉类掺假检测领域面临的挑战,并对该技术的未来发展趋势进行了展望。

表面增强拉曼光谱法跟踪研究苯磺酸左旋氨氯地平片的体内代谢消除

目的 探索用表面增强拉曼光谱法追踪苯磺酸左旋氨氯地平片的体内消除过程,并对其安全用药提出建议。方法分别采集15例患者的尿液与粪便,通过前处理后与表面信号增强剂等体积混合,以1470±2 cm^-1氨氯地平特征峰强度进行检测,计算患者体内消除部分的主药浓度,作出相关分析。结果 方法回收率高,RSD在3%以内,尿样中5～100μg·m L^-1主药呈良好的线性关系,最低检测限为0.5μg·m L^-1;粪样中1～50μg·m L^-1主药呈良好的线性关系,最低检测限为1.3μg·m L^-1。15例患者中,临床观察到11例患者显效,4例显效不明显。结论 所用方法简便迅速,用于二氢吡啶类降压药的体内代谢分析与临床评价尤为适宜。

表面增强拉曼光谱法跟踪分析马来酸依那普利片体内代谢消除的研究

目的研究用表面增强拉曼光谱法追踪马来酸依那普利片的体内消除过程,并对其安全用药提出建议。方法分别采集15例患者的尿液与粪便,通过前处理后与表面信号增强药等体积混合,以(1470±2)/cm依那普利特征峰强度进行检测,计算病人体内消除部分的主药浓度,作出相关分析。结果方法回收率高,相对标准偏差在3%以内,尿样中主药浓度在5~100μg·m L^(-1)呈良好线性关系,最低检测限为0.5μg·m L^(-1);粪样中主药浓度在1~50μg·m L^(-1)呈良好线性关系,最低检测限为1.3μg·m L^(-1)。11例患者(共纳入15例)显效,4例显效不明显。结论本研究方法简便迅速,可以用于血管紧张素Ⅰ转化酶抑制药的体内代谢分析与临床评价。