多糖及其硫酸化衍生物的抗病毒及免疫增强活性研究进展

近年来,人们发现多糖具有广泛的生物活性,并且越来越多的多糖被投入临床应用。其中,增强免疫和抗病毒作用是绝大多数多糖的主要药理作用,是多糖的共性。其中硫酸多糖因其显著的抗病毒和增强免疫活性而具有广阔的应用前景。文章就近年来国内外多糖分类及其硫酸化产物在抗病毒、增强免疫作用进行了综述。

南疆部分地区土壤-牧草-畜体系统中主要微量元素含量的初步调查研究

【目的】从动物微量元素营养角度，调查研究新疆南疆部分地区，土壤一牧草一畜体系统中主要微量元素含量。【方法】对库尔勒市普惠牧场、沙雅县塔里木第一牧场、新和县牧场和尉犁县礅阔坦乡等采样点的32份土壤、牧草样品中的铜、钼、锰、锌和硒等5项微量元素；沙雅塔里木第一牧场、库尔勒市普惠牧场32只放牧患摇背症绵羔羊的肝、脊髓和脂肪等组织的铜、锌、钼等3种微量元素含量进行分析，并且对沙雅县塔里木第一牧场1000多头绵山羊进行流行病学调查数据统计。【结果】土壤、牧草样品的分析显示，铜钼比值明显低于对反刍动物比较安全的范围（2～3：1），土壤中铜含量处于正常水平范围内（15～60mg／kg），但新和县牧场和尉犁县礅阔坦乡生长牧草含铜量明显低于正常水平（3．5mg／kg）；锌、锰、硒含量基本处在正常范围之内（100、400、0．03～0．05mg／kg）；对患摇背症羔羊内脏组织元素含量分析显示：羊肝铜、锌都处于低水平。但钼处于高水平（正常值2-4mg／kg），提示该两个地区绵羊处于低铜、低锌和高钼的营养状况。【结论】调查区域羔羊摇背症发病率在沙雅第一牧场高达75％以上、成年绵山羊的流产率达到40％左右，显示所调查区域部分地区处于条件性铜营养缺乏，有些地方处于原发性铜缺乏状态。

新疆阿魏多糖和药桑多糖及其硫酸化产物体外抗新城疫病毒作用研究

为研究新疆阿魏多糖、药桑多糖及其硫酸化产物体外抗新城疫病毒(NDV)作用,用MTT测定各多糖对鸡胚成纤维细胞(CEF)的安全浓度,选择安全浓度范围内的5种浓度的各多糖与NDV用3种不同的加药方式(先加多塘、后加多塘、多糖和病毒混合后同时加入)加入到CEF中,用MTT法测定各多糖对NDV感染CEF能力的影响。结果表明,各多糖均有一定的抗NDV作用,其中先加病毒后加多糖组抗病毒效果最好,各多糖中药桑多糖的硫酸化修饰物(sMP2.5)抗NDV作用最强,病毒抑制率达到87.69%,具有较好的研发前景。

育肥肉牛微量元素盈缺状况调查研究

【目的】有效地防治新疆阿克苏地区东三县家畜微量元素代谢病,合理使用微量元素添加剂,检测土壤-牧草-家畜生态系统中微量元素的水平。【方法】采取调查、实地采样和实验室分析相结合的方法,对库车县、沙雅县、新和县(采样地区)舍饲肉牛进行流行病学调查数据统计,并且对进行采样的135份土壤、牧草、水、牛毛、牛肝样品中的铜、锌、钼、锰、硒、钴和铁等7项微量元素含量进行分析。【结果】三地各样品的分析显示,各个体系内土壤中硒含量正常,其余元素缺乏。库车县牧草中铜处于临界值水平,锌、锰、钴处于适宜水平内,铜钼比例和硒含量过高,沙雅和新和县牧草铜、锌、锰、钴含量缺乏,铜钼比例和硒处于安全范围内。三地水样各元素含量处于正常水平。三地牛毛中铜含量处于继发性缺铜状态,锌缺乏状态,锰、硒处于发病临界值。三地牛肝中各元素含量的分析表明,铜含量明显低于临界值,三地锌、钼、锰、钴含量缺乏,沙雅县牛肝硒含量处于发病临界值,其余两地处于正常水平。【结论】所调查区域部分地区处于条件性铜营养缺乏,有些地方处于原发性铜缺乏状态,三地区所发生的育肥肉牛异嗜癖的主要原因是由于当地舍饲肉牛体内铜、锌、钼、锰、钴营养不足引起。建议改善饲养条件,饲料中填加微量元素预混料或舔砖来补充需要量,否则会导致巨大的经济损失。

2种穴位治疗技术在兽医临床上的应用

针灸疗法是一种起源于我国的传统治疗技术,并广泛应用于各种动物疾病的治疗上,具有治疗范围广泛、疗效迅速、安全、节省药品、携带方便、便于推广等特点。根据多年的教学和临床经验,将兽医临床上常用的穴位注射疗法和放血疗法的相关内容进行了综述,以期更好地发扬和使用针灸治疗技术。

石榴皮多糖对小鼠免疫功能的影响

【目的】从石榴皮中提取多糖,研究其对正常小鼠免疫功能调节作用的影响。【方法】利用传统水煎醇沉法提取得到80%的乙醇粗提物,并绘制葡萄糖标准曲线,将实验小鼠随机分为3组:石榴皮多糖按大剂量组、小剂量组和对照组,分别灌注石榴皮多糖,于实验第7 d进行免疫功能测试。【结果】石榴皮多糖含糖量为58.24%。石榴皮多糖能提高小鼠免疫器官重量和巨噬细胞的吞噬功能。【结论】石榴皮多糖有明显的增强小鼠免疫功能的作用。

阿魏根粗多糖对鸡脾脏和外周血淋巴细胞体外增殖作用的影响

为研究新疆阿魏多糖(FSP)对鸡外周血T淋巴细胞和脾脏B淋巴细胞增殖作用的影响。本研究用水提醇沉法得到阿魏总多糖(FSPt)和3种分级多糖(FSP30、FSP50、FSP70),并通过苯酚—硫酸法和红外光谱对FSP进行检测。通过MTT法测定各级FSP的安全浓度及其对鸡外周血T淋巴细胞及脾脏B淋巴细胞的增殖能力。结果显示,提取的FSP均具有多糖的特征峰,为多糖类化合物。外周血T淋巴细胞增殖试验表明,除FSP50外,所有多糖在一定浓度下均能单独和协同PHA刺激T淋巴细胞增殖,其中FSPt的增殖作用较强。脾脏B淋巴细胞增殖试验表明,除FSP50外,所有多糖在一定浓度下均能单独和协同LPS刺激B淋巴细胞增殖,其中FSP70和FSPt增殖作用较强。综上所述,各级FSP中,FSPt对脾脏B淋巴细胞和外周血T淋巴细胞的增殖作用最强,可以作为进一步研究的材料。

响应面法优化葫芦多糖提取条件

【目的】采用响应面法优化葫芦多糖提取工艺,为葫芦多糖的深入研究提供参考依据。【方法】以葫芦为原材料,在单因素试验的基础上,以提取温度、水料比及提取时间为自变量,采用响应面法进行3因素3水平的中心组合试验,分析3个因素及其交互作用对多糖提取率的影响,确定最佳提取工艺条件。【结果】二次元回归方程为:Y=5.54+0.14A+0.43B+0.36C十0.016AB-0.081AC-0.13BC-0.34A^2-0.23B^2-0.21C^2(R^2=0.9956;A为提取温度,B为水料比,C为提取时间,Y为葫芦多糖提取率)。葫芦多糖提取率影响因素排序为:水料比>提取时间>提取温度,3个因素及水料比与提取时间的交互作用对多糖提取率影响极显著(P<0.01),提取温度与提取时间的交互作用影响显著(P<0.05)。葫芦多糖最佳提取工艺条件为:提取温度82℃、水料比24:1(mL/g)、提取时间2.3 h、提取次数2次,在此条件下,多糖提取率可达(5.810±0.240)%,与模型预测值5.820%接近。【结论】通过响应面法优化的葫芦多糖提取工艺模型具有可行性,优化后的工艺条件可提高葫芦多糖提取率。

葫芦多糖体外抗鸡新城疫病毒作用的研究

为研究葫芦多糖抗新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)活性,本试验采用水提醇沉法提取葫芦总多糖及4种分级多糖,通过苯酚—硫酸法及红外光谱对葫芦多糖进行检测,MTT法测定各级多糖对鸡胚成纤维细胞(CEF)的安全浓度,多糖的安全浓度统一定为78.125μg/mL,以3种加药方式(先加多糖后接种病毒、先接种病毒后加多糖、多糖和病毒感作后加药),检测葫芦多糖对NDV的阻断、抑制及直接杀灭作用。结果表明,葫芦总多糖及4种分级多糖均具有抗NDV活性,其中对NDV的抑制作用及直接杀灭作用强于对NDV的阻断作用。70%、80%梯度醇沉的葫芦多糖(LSP70、LSP80)及总多糖(LSPt),抑制作用下的病毒抑制率分别为40.41%、44.54%、61.85%,杀灭作用下的病毒抑制率分别为44.74%、58.76%和59.38%,阻断作用下对NDV的抑制率,其中LSP80组最高达37.14%,其余各组均低于25%。综上可知,70%、80%梯度醇沉的葫芦多糖及葫芦总多糖的抗NDV活性较好,可作为进一步研究的材料。

葫芦粗多糖对小鼠红细胞及细胞因子免疫功能的影响

为了观察维吾尔药源性多糖[4种分级葫芦粗多糖(LSP)]对正常小鼠红细胞免疫功能及血清中白细胞介素-2(IL-2)和小鼠转化生长因子beta1(TGF-β1)含量的影响,试验采用红细胞花环形成法和ELISA法测定了LSP对正常小鼠红细胞免疫功能和血清中IL-2和TGF-β1含量的影响。结果表明:LPS能剂量依赖性地提高小鼠红细胞C3b受体花环形成率,提高小鼠血清中IL-2水平,同时降低血清中TGF-β1含量。在4种分级LSP中,LSP80%高剂量组和LSP30%高剂量组的免疫作用显著高于空白对照组(P<0.05)。说明LSP可通过调节小鼠红细胞免疫功能和细胞因子免疫而发挥对机体的免疫调节作用。

多糖铜络合物的制备与小鼠口服急性毒试验研究

为了制备多糖铜络合物并测定其半数致死量(LD_(50)),试验采用水提醇沉法从阿里红中提取总粗多糖,并通过苯酚-硫酸法和红外光谱法对阿里红多糖进行检测;用GB/T5009.13—2003法对多糖和络合物中的铜元素含量进行测定;利用红外光谱法和电镜对多糖和络合物进行扫描观察;给小鼠口服多糖络合物,测定半数致死量。结果表明:多糖含量为32.92%、铜含量为0.558 g/kg,多糖铜络合物中铜含量为51.05 g/kg(相对多糖);阿里红多糖铜络合物半数致死量为602.56 mg/kg,可信限是464.52~781.63 mg/kg。说明阿里红多糖络合物是低毒性药物。

列当多糖对鸡新城疫病毒在鸡成纤维细胞中增殖的抑制作用

为研究列当多糖抗新城疫病毒(NDV)活性,用水提醇沉法提取列当总多糖及4种分级多糖,并通过苯酚硫酸法及红外光谱对列当多糖进行检测。通过MTT法测定各级多糖对鸡胚成纤维细胞(CEF)的安全浓度。以3种加药方式(先加多糖后接种病毒、先接种病毒后加多糖、多糖和病毒感作后加)加药,检测列当多糖对新城疫病毒的阻断作用、抑制作用及直接杀灭作用。结果表明,列当总多糖及4种分级多糖均具有抗NDV活性,其中对NDV的抑制作用及阻断作用强于对NDV的直接杀灭作用。50%、80%梯度醇沉的列当多糖(OSP50、OSP80)及总多糖(OSPt),阻断作用下的病毒抑制率分别为19.50%、33.10%和22.30%,抑制作用下的病毒抑制率分别为19.00%、21.90%和22.60%,杀灭作用下对NDV的抑制率分别为,14.70%、17.50%和13.30%,其余各组多糖阻断作用、抑制作用及杀灭作用下的病毒抑制率均低于上述3组多糖。说明OSP50、OSP80及OSPt的抗NDV活性较好,可以作为进一步研究的材料。

阿里红活性部位提取物体外抑制奶牛乳房炎致病菌研究

为研究阿里红各活性部位对奶牛乳房炎致病菌的抑菌活性。提取阿里红多糖、多酚、黄酮、生物碱及挥发油,并对各有效部位成分进行了含量测定。通过体外抑菌试验,检测各有效部位对奶牛乳房炎常见致病菌金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、大肠埃希菌(Escherichia coli)及链球菌(Streptococcus)的抑菌作用。结果表明,阿里红黄酮和生物碱对3种致病菌均具有一定的抑菌作用,且对金黄色葡萄球菌和链球菌的抑菌作用最强,可以作为抗金黄色葡萄球菌和链球菌进一步研究的材料。

异常黑胆质调节药和成熟药对奶牛乳房炎致病菌体外抑菌试验

为研究异常黑胆质调节药和成熟药对奶牛乳房炎致病菌的抑菌活性,分别筛选10味属于异常黑胆质调节药和异常黑胆成熟药,并以乙醇和水为溶媒分别进行提取,通过体外抑菌试验,检测引起奶牛乳房炎常见致病菌金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、链球菌的抑菌作用。结果表明,欧烟堇水提物对3种致病菌均具有广谱的抗菌作用,达到中敏,抑菌圈直径为12.60mm±0.62mm^10.45mm±0.33mm。甘草和欧烟堇醇提物对金黄色葡萄球菌抑菌效果最好,抑菌圈直径为18.03mm±0.60mm^18.77mm±0.21mm。本试验为研究治疗奶牛乳房炎维药制剂及抗菌维药的开发提供科学依据。

列当不同提取物降糖作用研究

目的研究列当不同提取物的降糖作用。方法本试验提取列当多糖、醇提物及水提物,应用四氧嘧啶建立小鼠糖尿病模型,并对列当提取物的降血糖作用进行综合评价。结果多糖和醇提物的低剂量、水提物中剂量均可显著降低小鼠的血糖值(P<0.05)。其中醇提物低剂量组效果明显,对糖尿病具有一定的预防及治疗作用。多糖低剂量、醇提物和水提物的高剂量对体重的作用比较明显,其中水多糖低剂量组对糖尿病小鼠的体重有明显的提高。多糖3个剂量和醇提物中剂量、水提物高剂量组显著降低小鼠血脂(P<0.05)。结论列当不同提取物多糖、水提物、醇提物具有明显的降血糖作用。

列当多糖对鸡淋巴细胞体外增殖能力的影响

为探讨列当多糖(OSP)对鸡脾脏淋巴细胞和外周血淋巴细胞增殖作用的影响,试验用水提醇沉法提取列当多糖,通过苯酚硫酸法和红外光谱对列当多糖进行检测,采用MTT法测定列当多糖的安全浓度及对鸡淋巴细胞的增殖能力。结果显示:试验所提取的列当多糖均具有多糖的特征峰为多糖类化合物。外周血T淋巴细胞增殖试验表明,OSP30和OSP80的增殖作用强且对T淋巴细胞增殖的浓度范围最大。脾脏B淋巴细胞增殖试验表明,OSP30和OSP80的增殖作用强且对B淋巴细胞增殖的浓度范围最大。结果表明,OSP30及OSP80对脾脏淋巴细胞和外周血T淋巴细胞的增殖作用最强。

维药阿里红5种活性成分体外抗鸡新城疫病毒作用

为了研究维药阿里红各活性成分抗鸡新城疫病毒(NDV)的活性,本试验分别提取了阿里红多糖、多酚、黄酮、生物碱、挥发油并测定其含量。通过MTT法测定阿里红各活性成分对鸡胚成纤维细胞的最大安全浓度。以3种加药方式将药物与NDV加入已制备好的鸡胚成纤维细胞上,即先加药后接种病毒,先接种病毒后加药,病毒和药物混合作用后加入,以检测各组分对NDV的阻断作用、抑制作用以及直接杀灭作用。结果表明,多糖、多酚、黄酮、生物碱、挥发油均有抗病毒活性,其中多糖对NDV的直接杀灭作用及抑制作用强于对NDV的阻断作用。多糖、多酚、黄酮、生物碱、挥发油在抑制作用下的病毒抑制率分别为49.12%,39.64%,42.45%,40.00%,18.59%;杀灭作用下的病毒抑制率分别为45.35%,35.71%,38.57%,35.71%,41.07%;阻断作用下的病毒抑制率分别为15.58%,8.57%,32.98%,43.11%,31.42%。综上可知,维药阿里红的活性成分多糖和生物碱的抗NDV活性较好,可以作为进一步研究的材料。

葫芦多糖体外对鸡脾脏和外周血淋巴细胞增殖作用的影响

为探讨葫芦多糖(LSP)对鸡脾脏淋巴细胞和外周血淋巴细胞增殖作用的影响,本试验采用水提醇沉法,提取葫芦总多糖(LSPt)及30%、50%、70%、80%乙醇浓度下分步醇沉的4种分级多糖(LSP30、LSP50、LSP70、LSP80),并通过苯酚硫酸法及红外光谱对葫芦多糖进行检测。通过M T T法测定各级葫芦多糖的安全浓度及对鸡脾脏及外周血淋巴细胞的增殖能力。结果表明,试验所提取的葫芦多糖均具有多糖的特征峰为多糖类化合物。脾脏B淋巴细胞增殖试验表明,除LSP30外的所有多糖在一定浓度下能单独和协同LPS刺激B淋巴细胞增殖,其中LSP50的增殖作用最强且对B淋巴细胞增殖的浓度范围最大。外周血T淋巴细胞增殖试验表明,所有多糖在一定浓度下能单独和协同Con A刺激T淋巴细胞增殖,其中LSP50的增殖作用最强且对T淋巴细胞增殖的浓度范围最大。综上所述,各级葫芦多糖中LSP50对脾脏B淋巴细胞和外周血T淋巴细胞的增殖作用最强,可以作为进一步研究的材料。