库尔勒香梨脱萼、宿萼果果实发育动态及大小差异分析

为探明库尔勒香梨脱萼、宿萼果果实发育过程变化及大小差异,用尼康R3相机拍摄果实发育动态,同时测算果实纵横径、果肉厚度、果实体积与质量等相关指标,并用石蜡切片法研究了果肉细胞体积、数目与果实大小的关系。结果发现细胞数目增长主要集中在盛花后第56天前;后期以果肉细胞体积增长为主。同时期脱萼果纵径、横径、果实质量、果实体积、果肉部分体积、果核体积、果肉部分细胞数目均低于宿萼果;果肉厚度高于宿萼果;盛花后第70天前脱萼果果肉细胞体积与宿萼果果肉细胞体积大小差异不显著。脱萼果和宿萼果果实大小差异是由果肉部分细胞体积和细胞数目共同造成的,其中细胞数目的影响比细胞体积的影响大。

梨幼果FWL1膜系统酵母双杂交三框cDNA文库构建及互作蛋白的筛选

【目的】筛选与FWL1互作的蛋白,为研究FWL1基因调节果实大小机理提供依据。【方法】以杜梨、库尔勒香梨、鸭梨、早美香为材料,提取4个梨品种果实细胞分裂关键时期的果肉组织混样RNA。构建梨幼果FWL1膜系统酵母双杂交三框cDNA文库,并鉴定文库质量。构建诱饵载体并转化酵母菌,筛选与FWL1互作的蛋白,对初步筛选出的阳性酵母克隆进行测序并在NCBI中进行Blast比对,确定候选互作蛋白。【结果】文库库容约为3×10^(7) CFU,大于1×10^(7) CFU,平均插入片段大于1000 bp,阳性率为≥98%。诱饵载体无自激活功能,利用共转化方法,筛选出272个与FWL1互作的蛋白质。【结论】梨幼果膜系统酵母双杂交三框cDNA文库符合酵母双杂文库的基本条件,适用于后期筛选相互作用的蛋白。筛选出的272个互作蛋白在果实发育过程中表达不同,其中collagen and calcium-binding EGF domain-containing protein 1和metallothionein-like protein可能与梨果实大小发育有关。