性传播疾病高危人群淋球菌及沙眼衣原体感染状况调查

对２３２名有性乱史妇女的生殖道分泌物标本进行了淋球菌培养和沙眼衣原体的检测，并分析了该组病人的人群特点。结果：淋球菌、沙眼衣原体、淋球菌合并沙眼衣原体感染的感染率分别为２７．２％、３０．２％和２０．６％。提示：性传播疾病高危人群中淋球菌和沙眼衣原体感染率高，易传播，应引起高度重视。

PCR指纹法及PCR/SSO技术用于骨髓移植供者选择的比较研究

在１１个家系内进行了骨髓移植的配型工作。用ＰＣＲ分别扩增了供受者最具多态性的ＤＲＢ和ＤＱＢ基因的第二外显子，这些ＰＣＲ产物在非变性的聚丙烯酰胺凝胶电泳上显示具有单倍型特异性的，各不相同的带型格局，称为ＰＣＲ指纹。同时进行了ＰＣＲ指纹的交叉配型，及ＤＲＢ１和ＤＱＢ１基因的ＰＣＲ／ＳＳＯ杂交。ＰＣＲ指纹和交叉配型具有简单、经济、灵敏、准确、快速等优点，对骨髓移植供者的选择，有突出的优越性。

宫颈鳞状上皮癌蜡块中 HPV16 感染检测方法的比较研究

分别用原位杂交（ＩＳＨ）、多聚酶链反应（ＰＣＲ）和原位多聚酶链反应（ＩＳ－ＰＣＲ）方法，检测３９例宫颈鳞状上皮癌石蜡切片中ＨＰＶ的感染。ＩＳＨ的检出率为４６．２％（１７／３９），明显低于ＩＳ－ＰＣＲ的６６．７％（２６／３９，Ｐ＜０．０１）和ＰＣＲ的８４．６％（３３／３９，Ｐ＜０．０１）。用常规ＩＳＨ和地高辛标记探针能检出宫颈鳞状上皮癌ＨＰＶ１６感染的表皮细胞，而用ＩＳ－ＰＣＲ方法在同样标本中可显示出更多的ＨＰＶ１６阳性表皮细胞，并且着色更深。ＰＣＲ方法敏感性最高，但它不能用于组织细胞内的ＨＰＶ１６ＤＮＡ精确定位。

聚合酶链反应在诊断肺结核中的应用

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术对７８例患者的痰、支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）和胸水标本进行结核菌检测；并同时进行涂片抗酸染色、皮肤结核菌素试验及血结核菌抗体检测。结果：ＰＣＲ阳性率为４６．１５％，与涂片镜检、结核菌素试验强阳性、血结核菌抗体阳性率（分别为３．８５％、１７．９５％、１１．５４％）相比均有显著性差异（Ｐ＜０．０５）。由此可见ＰＣＲ方法比传统方法具有更高的结核杆菌检出率。

PCR检测宫颈病变组织和配偶精液及尿液HPV16、18型的研究

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术对３３例女性宫颈病变组织及其配偶精液、尿液进行人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）１６、１８型检测。结果：宫颈病变组织、精液和尿液ＨＰＶ１６型检出率分别为５７．６％、５７．６％和１８．１％；ＨＰＶ１８型检出率分别为３０．３％、１２．１％和３．０％。配偶间精液与宫颈病变组织ＨＰＶ１６同型检出率为７３．６％；ＨＰＶ１８同型检出率为３０．０％。研究表明：女性感染ＨＰＶ的同时，配偶也有潜伏感染。实验证实了ＨＰＶ通过精液传播的可能性。

用PCR和地高辛标记的核酸杂交技术检测女性下生殖道人乳头瘤病毒感染

应用多聚酶链反应（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ）和地高辛标记的ＨＰＶＤＮＡ的斑点及Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ杂交３种方法，同时检测了１７例外阴和宫颈湿疣的标本。检测结果表明ＰＣＲ结合地高辛标记的斑点杂交技术是目前检测女性下生殖道人乳头瘤病毒ＨＰＶ感染较为敏感、特异、简便的分子生物学方法。因杂交中所使用的ＨＰＶＤＮＡ探针为非放射性标记的，弥补了３２Ｐ标记探针的缺点，可制成试剂盒在临床推广、应用。从而为临床对ＨＰＶ感染的诊断提供一条有效的检测方法。

我国4个旋毛虫分离株DNA限制性酶切片断长度差异的比较研究

报告我国云南、河南、沈阳（猪）以及长春（犬）４个旋毛虫分离株，用１０种限制性内切酶分析比较其基因组ＤＮＡ酶切片断长度差异。结果表明：来自猪体与来自犬体的旋毛虫酶切图谱不同，显示宿主的不同比地理位置、气候条件差异在旋毛虫的分类上更有意义。

人类乳头瘤病毒16型DNA诱导NIH 3T3细胞的恶性转化

用人类乳头瘤病毒（ｈｕｍａｎｐａｐｉｌｌｏｍａｖｉｒｕｓ，ＨＰＶ）１６型ＤＮＡ，通过磷酸钙沉淀技术在体外成功地使ＮＩＨ３Ｔ３细胞发生恶性转化，转化细胞克隆后分析表明存在如下特征：转化细胞形态上变宽，呈多角状生长并形成集落；细胞的停泊依赖性下降；能在含１％小牛血清培养基中良好生长。转化细胞的密度依赖性下降。用Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ杂交发现ＨＰＶ１６ＤＮＡ以整合状态存在于ＮＩＨ３Ｔ３细胞ＤＮＡ中。

生物素标记的 HPV11、16、18、51型 DNA 探针的制备

通过大量培养克隆有 HPV11、16、18、51型 DNA 序列的菌株,扩增其质粒,并采用碱变性法提取、纯化质粒 DNA,然后对质粒进行酶切、电泳回收 HPV DNA 片段并进行生物素标记,制备出生物素标记的 HPV11、16、18、51型 DNA 探针.用斑点杂交方法检测探针的灵敏度为 HPV11、16型0.05pg,HPV18 0.25 pg,HPV51 0.1 pg.

聚合酶链反应在诊断结核性胸膜炎中的应用

目的：应用ＰＣＲ技术对７０例胸水进行结核菌ＤＮＡ检测。方法：７０例胸水做ＴＢ－ＰＣＲ、胸水抗酸菌涂片，皮肤结素试验及血结核菌抗体检测，并与临床诊断标准进行比较。结果：７０例胸水中，结核性胸腔积液４６例，ＰＣＲ阳性率４５．７％，涂片镜检、结素强阳性、结核菌抗体（＋）则分别为２．２％，８．７％，１０．９％，前者明显高于后三者（Ｐ值均＜０．００５），但其ＰＣＲ敏感性与临床诊断标准比较相关性仍低，非结核性胸水２４例中，ＰＣＲ阳性率８．３％。结论：ＰＣＲ检测结核菌尚有一些条件需进一步完善，目前临床尚不能将其作为诊断结核病包括结核性胸膜炎的标准，仍需结合病人的临床表现及其它检查结果来综合判断。

稳定表达的人GDNF基因对PC12细胞的分化作用研究

目的 利用自行构建的 BHK- h GDNF基因工程细胞 ,研究 GDNF是否具有促进大鼠嗜铬细胞瘤细胞系 PC12细胞分化的作用。 方法 从人胎儿脑组织中提取总 RNA,用 RT- PCR的方法克隆人 GDNF基因 ;利用L ipofecam ine将构建的真核表达载体 p TARGET/ h GDNF(± )转染 BHK- 2 1细胞 ,在含有 G418的选择培养基中筛选出稳定表达人 GDNF的 BHK- h GDNF基因工程细胞。用免疫组织化学的方法检测 BHK- h GDNF基因工程细胞中人 GDNF的表达。并且用 BHK- h GDNF基因工程细胞培养的上清液培养 PC12细胞 ,观察 GDNF是否具有促进大鼠嗜铬细胞瘤细胞系 PC12细胞分化作用。 结果 构建的正向和反向真核表达载体 p TARGET/ h GDNF(± )的酶解消化和测序结果正确 ;用正向真核表达载体 p TARGET/ h GDNF(+)转染 BHK- 2 1细胞后免疫组织化学的结果证明 BHK- h GDNF细胞能够表达人 GDNF;BHK- h GDNF基因工程细胞培养上清液可以促进 PC12细胞分化。 结论 构建的 BHK- h GDNF基因工程细胞中表达的人 GDNF可以促进