混菌发酵茶籽抗氧化肽的分离纯化及其功能活性研究

为促进茶叶籽资源的深度开发利用,采用不同截留分子质量的超滤膜对混菌发酵茶籽多肽产物进行分级分离,比较茶籽多肽的抗氧化活性与其分子质量的对应关系;利用凝胶过滤色谱技术对茶籽多肽逐级纯化,获得特征性茶籽抗氧化肽,对其二级结构组成及相对含量进行分析,并考察其热稳定性和抗消化稳定性;以H_(2)O_(2)诱导小鼠胚胎成纤维细胞(MEF细胞)建立氧化损伤模型,评价茶籽抗氧化肽的细胞氧化损伤保护功能。结果表明:经超滤分级后,茶籽多肽的抗氧化活性与其分子质量呈负相关,分子质量小于1 kDa的TSP4组分具有最高的自由基清除能力;TSP4分子质量分布范围在90~849 Da之间,凝胶过滤色谱纯化得到的TSP4-b亚组分平均分子质量为446 Da,其二级结构中的β-折叠的相对含量从未发酵茶叶籽的16.59%上升至44.43%,α-螺旋则由未发酵茶叶籽的37.61%降至17.57%;TSP4-b经20~60℃热处理以及模拟胃肠消化后,自由基相对清除率仍可分别保持在90%及80%以上,具备良好的热稳定性及抗消化能力;中(0.5 mg/mL)、高(5.0 mg/mL)剂量的TSP4-b的介入可使H_(2)O_(2)诱导的MEF细胞存活率分别达到73.8%、82.4%。综上,所分离的茶籽抗氧化肽具有较强的抗氧化活性,对H_(2)O_(2)诱导的细胞损伤具有保护作用,在医药、保健食品等领域具有良好的发展潜力。

核桃仁原位水解工艺优化及氧化稳定性研究

为延长核桃仁货架期,提高核桃仁储藏品质。以去皮核桃仁为原料,利用复配蛋白酶(胰酶)酶解核桃仁实现原位富集抗氧化肽,采用单因素实验分别研究了底物质量分数、酶质量分数、水解温度、水解时间对水解液抗氧化活性的影响。在此基础上,采用正交实验确定最优水解工艺为:酶质量分数12%、底物质量分数40%、水解温度45℃、水解时间20 min。萃取酶解处理的核桃仁(样品组)和未处理的核桃仁(空白对照组)油脂测定其氧化诱导时间,将样品组和空白对照组用铝袋分装在60℃烘箱内加速氧化。结果表明,样品组具有更长的氧化诱导时间及Q10指数,其氧化自由能从59.896 kJ/mol上升到78.103 kJ/mol;加速氧化过程对照组过氧化值始终高于样品组,以过氧化值为指标结合油脂氧化规律得到在20℃下样品组货架期相对于对照组延长了68 d。

血糖控制对2型糖尿病患者左、右心室心肌功能的影响

本研究探讨血糖控制对2型糖尿病(T2DM)患者左、右心室心肌应变的影响,以及左、右心室心肌功能障碍之间的关系。选取100例左心室射血分数正常的T2DM患者,根据糖化血红蛋白(HbA1c)水平分为HbA1c<7%组(n=54)和HbA1c≥7%组(n=46);同时选取40名健康成人志愿者作为对照组。测量常规超声心动图及左心室整体纵向应变(LVGLS)、右心室整体纵向应变(RVGLS)、右心室游离壁纵向应变(RVFWLS)数据。比较各组数据的差异,应用多元线性回归分析HbA1c对左、右心室心肌应变的影响,以及左、右心室心肌应变之间的关系。从对照组、HbA1c<7%组到HbA1c≥7%组,LVGLS、RVGLS逐渐减低(均P<0.05)。与对照组比较,HbA1c<7%组、HbA1c≥7%组的RVFWLS均减低(均P<0.05),但后两组的RVFWLS差异无统计学意义(P>0.05)。多元线性回归分析显示,在T2DM患者中,HbA1c是LVGLS、RVGLS、RVFWLS的独立影响因素,LVGLS与RVGLS、RVFWLS独立相关。左心室射血分数正常的T2DM患者左、右心室心肌应变均减低,且两者间存在相关性,HbA1c是左、右心室心肌应变减低的独立影响因素,提示高血糖可能同时对双心室的心肌产生直接作用,且心室间存在不利的相互作用。

“制药工厂设计”情景化案例式“翻转课堂”教学探讨

针对“制药工厂设计”课程抽象性、实践性、逻辑性和连续性及学习难度较大的特点,为克服学生在传统教学模式下学习兴趣低、实践不足、学习效率和积极性较低的问题,将“以学生为中心”、“OBE”等教育理念和PBL教学方法融入到“制药工厂设计”课程教学之中,设计出符合学校生物制药专业特色的“情景化案例式翻转课堂”教学模式。该教学模式综合考虑专业工程教育与学生个人发展的需要,在团队协作、师生互动过程中培养学生分析问题、解决问题、学以致用的思想素养。

微生物发酵法制备茶籽多肽及其功能活性研究

采用微生物发酵茶籽制备茶籽多肽,并分析其功能活性及构效关系。结果表明:微生物发酵能提升茶籽原料的蛋白质成分释放及多肽生成,以解淀粉芽孢杆菌为最优发酵菌种,其最佳发酵工艺:接种量1%,发酵温度35℃,茶籽添加量50 g/L,pH 6.0,摇床转速120 r/min,发酵时间48 h,该条件下茶籽多肽产量达到6.13 mg/mL。茶籽原料经发酵后,小分子量蛋白比例提升了16.25%;茶籽多肽中的必需氨基酸、疏水性氨基酸及酸性氨基酸比例显著提升,使其抗氧化活性优于茶籽原料。

新工科视域下基于“4+X”创新模式的生物制药专业建设改革与实践

在新工科建设视域下,为服务于区域经济和产业发展需求,培养创新型卓越工程人才是地方性高校本科教育的首要目标。安徽工程大学生物制药专业按照工程教育认证标准,基于“4+X”创新人才培养模式,通过强化党建和“双基”建设、深化“一生一策”和个性化人才培养方案改革、推进多学科交叉融合、推动校校和校企联合、强化产学研合作、组建课程群组并优化课程设置、打造优秀师资团队等一系列改革措施,推动专业建设和内涵发展,并取得一定成效,为培养复合应用型工程人才奠定了基础。

生物工程类专业生物统计学课程教学的思考与建议

生物统计学是生物类本科专业的一门工具课,在学生进行试验设计与数据分析乃至今后的科研工作中具有重要的作用;同时,生物统计学作为一门理论性和实用性较强的专业基础课,要求授课教师具有较高的理论水平及应用实践能力。本文结合笔者多年的生物统计学教学实践,对目前教学过程中存在的一些问题及其解决途径提出了一些看法和建议,以期为教学同行能够提供借鉴。

地铁轨道整体道床施工技术分析

地铁轨道整体道床施工技术是城市轨道交通建设的核心工艺,主要采用钢筋混凝土预制构件形成稳固的轨道基础,确保列车运行的平稳与安全。这项技术具有整体性强、稳定性高、维修周期长的优势,适用于各类地铁线路的修建、扩建与改造工程。通过精确控制施工参数和工艺流程,整体道床施工技术能有效提升轨道的几何精度和耐久性,降低运营维护成本。同时,该技术也适应不同地质条件和环境要求,为城市轨道交通的可持续发展提供有力支撑。

重度颅内感染集束化疗效分析

目的探讨集束化治疗方案对于重度颅内感染的疗效。方法共纳入2020年7月至2023年6月深圳大学总医院和广东省深圳市第二人民医院收治的43例重度颅内感染患者,采取集束化治疗方案,先予以广谱抗生素;多途径引流并获取脑脊液行常规和生化检测、微生物培养及第二代测序(NGS);完善头部和胸部CT和(或)MRI平扫和增强扫描;待脑脊液NGS测序结果回报后精准调整抗生素治疗方案;序贯引流脑脊液;严重脑室内感染患者予脑室镜(软式内镜)冲洗和脑室造瘘;定期复查行脑脊液和血液感染指标测定和微生物培养,待各项指标正常1周后调整抗生素或停药;根据临床表现、实验室和影像学检查结果综合判断疗效。结果16例予广谱抗生素美罗培南+万古霉素抗感染治疗;脑脊液检查,微生物(细菌、真菌、病毒)培养阳性12例(27.91%),NGS测序阳性35例(81.40%),经NGS测序明确病原体后,15例调整为敏感抗生素,12例症状明显改善、3例无明显改善;27例(62.79%)行外科治疗,包括脓肿穿刺引流术7例(16.28%)、Ommaya囊植入术6例(13.95%)、脑室外引流术11例(25.58%,其中8例行脑室镜冲洗和脑室造瘘)、腰大池引流术3例(6.98%);住院时间为30(19,57)d,37例(86.05%)治愈出院、6例(13.95%)死亡。结论重度颅内感染患者经集束化治疗后治愈率显著提高,早期启动集束化治疗方案可明显改善患者预后,值得临床推广应用。

副溶血性弧菌生物被膜动态形成机制的转录组分析

为探究副溶血性弧菌生物被膜形成机制,在菌株生理特性分析的基础上,结合转录组测序技术,对生物被膜形成过程中的基因表达调控规律进行探究。实验测定了2株被膜差异菌株(ATCC 17802和VP-0)的胞外多糖、胞外蛋白、信号分子AI-2、细胞渗透性和生物被膜微观形态等生理指标,研究被膜差异菌株的动态形成过程。结果显示:供试菌株生物被膜形成过程,0~12 h为可逆黏附阶段,12~48 h为不可逆黏附和微菌落形成阶段,48~72 h为成熟阶段,72~144 h为解离阶段。ATCC 17802胞外多糖和蛋白在生物被膜成熟期分泌量分别是VP-0的1.67倍和2.3倍,在生物被膜形成过程中信号分子含量相差不显著(P>0.05),激光共聚焦显微镜显示ATCC 17802呈现更聚集状态。根据转录组测序结果分析可知,3个处理组(72 h vs 8 h、48 h vs 8 h和72 h vs 48 h)分别鉴别出802、1061个和267个显著性差异表达基因,其中分别有506、655个和96个差异基因下调,296、406个和171个差异基因上调。这些差异主要体现在能量代谢、鞭毛系统、转运系统等与生物被膜形成有关的方面。本实验详细划分了副溶血性弧菌生物被膜的形成阶段,也为生物被膜动态调控中的基因调控过程提供了理论基础。

铁皮石斛低聚糖分离纯化及其益生活性

为了探究铁皮石斛低聚糖组成及其益生活性,利用DEAE-52阴离子纤维素和Sephadex G-10葡聚糖凝胶色谱柱分离纯化得到铁皮石斛低聚糖DOO1-1组分,评价了该低聚糖对干酪乳杆菌、嗜酸乳杆菌、两歧双歧杆菌和肠道菌群的益生作用。结果表明,铁皮石斛低聚糖DOO1-1含量为81.37%,其相对分子质量为2270,主要由葡萄糖和甘露糖组成,还有少量葡萄糖醛酸、半乳糖和阿拉伯糖,DOO1-1具有较强的抗消化能力。铁皮石斛低聚糖DOO1-1能促进干酪乳杆菌、嗜酸乳杆菌、两歧双歧杆菌和肠道菌群等微生物的增殖,其效果好于低聚果糖。DOO1-1能被这些益生菌利用产生短链脂肪酸,其中乳酸和乙酸含量较多,而丙酸和丁酸含量较少。试验结果表明,铁皮石斛低聚糖DOO1-1是一种良好的益生元,具有潜在的开发价值。

游动放线菌产阿卡波糖高通量筛选模型的建立及优化

Actinoplanes sp.SE50是Ⅱ型糖尿病治疗药物阿卡波糖的主要生产菌株,但是目前阿卡波糖高效检测方法仍存在瓶颈问题。该文采用酶标仪检测技术和孔板发酵构建阿卡波糖高通量检测模型,显著增强阿卡波糖高产菌株的筛选效率。首先,酶标仪检测结合孔板发酵结果表明,24孔板发酵与摇瓶发酵的相关性(R 2=0.88161)优于48孔板发酵(R 2=0.83374)。24孔板发酵实验结果表明,孔板发酵存在边缘效应即阿卡波糖产量中间孔1区<长边缘孔2区<短边缘孔3区,对边缘孔填充无菌水可有效消除边缘效应。随后,为减少种子液培养工序,通过正交优化培养基中黄豆饼粉、甘油、碳酸钙的添加量,得出黄豆饼粉3%,甘油1.5%,碳酸钙0.4%(均为质量分数)配比最佳。最后,在最优条件下孔板发酵168 h,阿卡波糖产量可达到(2183.66±6.60)μg/mL。该文介绍了一种孔板发酵结合酶标仪检测筛选方法,大幅缩短了摇瓶发酵液相检测所需工作量及时间,为快速筛选阿卡波糖高产菌株奠定了基础。

二维斑点追踪成像评价体质量指数对2型糖尿病患者左房应变功能及左房-左室耦联关系的影响

目的 :应用二维斑点追踪成像(2D-STI)评估2型糖尿病(T2DM)患者的左房应变功能,确定BMI对T2DM患者左房应变功能的影响,并探讨左房-左室耦联关系。方法:选取118例T2DM患者(T2DM组)及103例非糖尿病志愿者(对照组),按体质量各分为3个体质量亚组(正常体质量、超重、肥胖)。2组均行常规超声心动图及2D-STI检查,获取常规超声心动图数据及左房储备期应变(LASr)、管道期应变(LAScd)、收缩期应变(LASct)和左室整体纵向应变(LVGLS)。比较各组观察指标的差异,分析与左房应变独立相关的因素。结果:相同BMI亚组间比较:T2DM亚组较对照组LASr、LAScd均减低(正常体质量P=0.03,0.01;超重P=0.01,0.03;肥胖P=0.01,0.04),而LASct差异无统计学意义(P> 0.05)。对照亚组内比较:正常体质量、超重和肥胖患者LVGLS逐渐减低(P<0.05);与正常体质量患者比较,超重和肥胖患者LASr、LAScd减低(均P<0.05),LASct差异无统计学意义(P> 0.05)。T2DM亚组内比较:与正常体质量患者比较,超重和肥胖患者LASr、LAScd和LASct均减低(均P<0.05),肥胖患者LVGLS、二尖瓣环间隔侧和侧壁舒张期平均速度(e’)均减低(均P<0.05),二尖瓣口舒张早期血流峰值速度与二尖瓣环间隔侧和侧壁舒张期平均速度比值(E/e’)升高(P<0.05)。多元线性回归分析显示,T2DM患者的BMI与LASr、LAScd独立相关,LVGLS与LASr、LASct独立相关,E/e’与LAScd独立相关。结论:BMI增加加重了T2DM患者左房应变功能的损伤,并提示左房-左室耦联关系异常。

新农科视域下地方院校分子生物学“4∏”人才培养教学新模式的探索

分子生物学是高校生物类专业十分重要的一门核心课程,地方院校的专业与产业导向目标与“分子生物学”课程教学主旨之间存在一定程度的错位。为解决这一问题,探索出适合地方院校自身特点的课程教学模式,基于国家“新农科”建设的理念和“立德树人”的根本任务,充分借鉴国内高校优秀的教育教学策略,实践了分子生物学“4∏”人才培养的教学新模式,并取得了较好的教学效果,对同类课程的教学具有一定的借鉴意义。

基于故事演绎的基因工程制药课程教学

基因工程制药是生物制药、制药工程等专业的核心课程,也是关乎未来新兴生物技术产业发展的关键学科。因此,如何提升该课程的教学质量、培养相关领域的专门人才已成为急需解决的问题。本文基于基因工程制药课程内容的特点和教学中存在的问题,以提高教学效果为主要目标,从特点优势、实施形式、教学评价与反思等角度介绍了以故事演绎为主导的教学法。此法能有效提升教学质量,对激发学生的学习兴趣和主动性,培养高尚的科学素养和道德情操具有积极的作用。

斑点追踪成像评价2型糖尿病合并高血压患者多心腔应变的初步研究

目的应用斑点追踪成像(STI)技术评估2型糖尿病(T2DM)患者的左心房、左心室和右心室心肌应变,寻找T2DM合并高血压患者心肌功能障碍的早期诊断指标。方法选取2021年1月至2022年10月于石家庄市第二医院治疗的100例血糖控制不佳的无症状T2DM患者为研究对象,根据是否合并高血压病,将其分为单纯T2DM组(T2DM组,n=54)和T2DM合并高血压病组(T2DM+HT组,n=46);另选健康志愿者作为对照组(对照组,n=40)。所有入组者进行常规超声心动图和STI检查,测量常规超声心动图及左室整体纵向应变(LVGLS)、圆周应变(LVGCS)、面积应变(LVGAS)、径向应变(LVGRS)及左房整体纵向应变(LAGLS)和右室游离壁纵向应变(RVFWSL)数据。比较三组间观察指标的差异。结果与对照组比较,T2DM组和T2DM+HT组的LVGLS、LAGLS、RVFWSL均减低(P<0.05)。三组间LVGCS、LVGAS、LVGRS无明显差异(P>0.05)。与T2DM组比较,T2DM+HT组的LAGLS明显减低(P<0.05),但LVGLS、RVFWSL无明显差异(P>0.05)。结论T2DM患者的左心房和双心室应变均受损,T2DM合并高血压病患者左心房应变受损比双心室更早出现,左房整体纵向应变或可作为预测此类人群早期心脏功能改变的潜在指标。

Ganoderma lucidum UIM-281产漆酶发酵条件的筛选及响应面优化

采用Plackett-Burman(PB)设计法筛选出影响灵芝菌G.lucidum UIM-281发酵产漆酶的主效应因素为装液量、摇床转速和培养时间。最陡爬坡实验接近以上三因素最优水平后,应用中心组合设计以及响应面分析,建立了以漆酶酶活为响应值的二次回归方程模型,得到最优发酵条件为:装液量52 mL,摇床转速158 r/min,培养时间172 h,温度28℃,接种量10%,初始pH5.5,种龄96 h。此条件下理论预测值8342.6 U/L,验证实验测得酶活为8387.7 U/L,与预测值接近,说明预测模型可靠性较高,可应用于漆酶发酵条件的优化。

茶皂素浸提条件优化及其抑菌效果

以脱脂茶籽粕为原料,以乙醇溶液为浸提剂,对茶皂素的提取条件进行了分析研究。在单因素实验基础上,应用正交分析法确定茶皂素提取的最佳工艺条件为:浸提温度75℃,pH 10.0,乙醇体积分数85%,料液比1∶12。在此条件下浸提3 h,茶皂素得率为18.13%。抑菌实验表明,所提取茶皂素对典型革兰氏阳性细菌、阴性细菌具有显著抑制效果,对酵母菌生长有强烈抑制作用,并部分抑制一些导致食品劣变的霉菌繁殖,具有食品防腐功能。

酶法水解油茶籽粕制备油茶籽多肽的研究

以冷榨脱脂油茶籽粕为原料,采用胃蛋白酶水解法对油茶籽多肽的制备条件进行了研究。在单因素试验基础上,应用正交试验确定胃蛋白酶水解油茶籽粕制备油茶籽多肽的最佳工艺条件为:酶解温度40℃,酶解时间3 h,加酶量15 000 U/g,固液比1∶30。在此最优条件下进行验证试验,油茶籽多肽产率达到61.8%。

酶法水解芝麻粕制备芝麻多肽

以芝麻制油后副产物芝麻粕为原料,采用蛋白酶水解法制取芝麻多肽。在水解酶筛选、单因素试验基础上,以多肽产率为指标,设计正交试验对碱性蛋白酶酶解芝麻粕制取芝麻多肽工艺进行了优化。结果表明,最佳工艺参数为:pH 9.0,料液比1∶20,加酶量11 000 U/g,酶解时间2.5 h,酶解温度65℃。在此条件下,多肽产率达到3.51%。