应用猪主动脉去细胞瓣膜支架体外构建组织工程心脏瓣膜

目的 探讨应用猪去细胞瓣膜支架体外构建组织工程心脏瓣膜的可行性。 方法 采用去垢剂、渗透压改变和核酸酶消化的方法制备猪主动脉瓣去细胞瓣膜支架 (实验组 ) ,用去内皮细胞主动脉瓣作对照 (对照组 ) ,并对两组含水量、可溶性蛋白含量、热皱缩温度、力学性能和组织相容性进行测定。培养犬主动脉壁间质细胞和内皮细胞 ,将其种植于实验组去细胞支架上 ,观察细胞生长情况 ,并测定内皮细胞合成前列环素的功能。 结果 实验组瓣膜细胞成分完全从瓣膜中去除 ,与对照组新鲜瓣膜相比 ,含水量增高 (P<0 .0 5 ) ,可溶性蛋白含量减少 (P<0 .0 5 ) ,热皱缩温度和抗张强度无明显变化。实验组瓣膜组织相容性试验显示 ,材料组织相容性好 ,体内降解时间为 10周 ;犬主动脉壁间质细胞和内皮细胞在瓣膜表面生长良好 ,内皮细胞具有合成分泌前列环素的功能。 结论 采用去垢剂、渗透压改变和核酸酶消化的方法制备猪主动脉瓣去细胞瓣膜支架 ,在去除细胞和可溶性蛋白质的同时保持了瓣叶的基本结构和力学性能 ;以其为支架体外构建组织工程心脏瓣膜的细胞不仅能在材料表面生长 ,还能合成、分泌血管活性物质 ,是具有生理功能的组织工程心脏瓣膜。

应用聚乳酸聚乙醇酸膜构建组织工程心脏瓣膜的实验研究

目的 探讨应用聚乳酸聚乙醇酸 (PL GA)构建组织工程心脏瓣膜的可行性。 方法 扫描电子显微镜观察 PL GA结构特点 ,将 PL GA在兔皮下包埋 ,分别于 2周、4周、6周、8周和 12周观察材料的生物相容性和降解率 ,培养犬主动脉瓣间质细胞、主动脉壁间质细胞和皮肤成纤维细胞 ,对照其生长曲线、平滑肌 α肌动蛋白表达和扫描电子显微镜特点。将犬主动脉壁间质细胞和内皮细胞种植于 PL GA上 ,观察其形态并测定细胞合成胶原和前列环素的功能。 结果 PL GA呈网孔状结构 ,孔径 179μm。皮下包埋显示 PL GA生物相容性好 ,体内降解时间为 12周。犬主动脉瓣间质细胞和主动脉壁间质细胞平滑肌 α肌动蛋白均为部分阳性表达 ,细胞内有大量粗面内质网 ,生长曲线相似。细胞种植显示细胞在材料表面生长良好 ,并具有合成胶原和前列环素的功能 (P<0 .0 5 )。 结论 以 PL GA为支架体外构建组织工程心脏瓣膜细胞不仅能在 PL GA表面生长 ,还能合成细胞间质和血管活性物质 。

应用胶原壳聚糖体外构建组织工程心脏瓣膜的初步研究

目的 探讨应用胶原壳聚糖支架体外构建组织工程心脏瓣膜的可行性。方法 观察材料结构特点 ,并行兔皮下包埋实验 ,分别于 4、6、8、12周观察材料的生物相容性和降解率。将犬主动脉壁间质细胞和内皮细胞种植于壳聚糖胶原支架上 ,观察其形态并测定细胞合成胶原和前列环素的功能。结果 胶原壳聚糖膜呈网孔状结构 ,孔径 (10 3± 17) μm。皮下包埋实验显示材料生物相容性好 ,完全降解时间为 12周。种植实验示细胞在材料表面生长良好 ,并具有合成前列环素 (6 2 .3±3.2pg/mlvs 10 .7± 2 .1pg/ml,P <0 .0 5 )的功能。结论 以胶原壳聚糖膜为支架体外构建组织工程心脏瓣叶 ,种植细胞不仅能在材料表面生长 ,还能合成细胞间质和血管活性物质 。

胶原膜、聚乳酸聚乙醇酸膜和聚β羟基丁酯的生物相容性

目的 评价胶原膜、聚乳酸聚乙醇酸膜和聚 β羟基丁酯的结构特点、生物相容性及其在组织工程心脏瓣膜中的应用前景 .方法 HE、胶原染色及扫描电镜观察材料的组成、结构 .新西兰大白兔 15只皮下植入材料 ,于 4,6 ,8,12 wk取出观察其组织反应和降解情况 .结果 胶原膜、聚乳酸聚乙醇酸膜和聚 β羟基丁酯的孔径分别为 10 7,179和 13μm. 3种材料组织相容性较好 ,局部无组织坏死和脓肿形成 .早期以中性粒细胞和嗜酸性粒细胞浸润为主 ,后期以淋巴细胞浸润为主 .聚乳酸聚乙醇酸膜于 8wk基本吸收 ,胶原膜 12 wk吸收 ,聚β羟基丁酯膜 12 wk未见明显降解吸收 .结论 胶原膜和聚乳酸聚乙醇酸膜在材料结构、组织相容性和降解率方面符合组织工程心脏瓣膜支架材料的要求 ,聚β羟基丁酯膜在材料结构和降解率方面尚需改进 .

组织工程心脏瓣膜构建现状与发展

为了克服目前临床应用的人工心脏瓣膜在抗凝和衰坏方面的缺点 ,随着组织工程学的发展 ,构建组织工程心脏瓣膜的研究已取得初步进展。综述近年来组织工程心脏瓣膜在种植材料、种子细胞、动物实验和基础研究方面取得的进展 ,并探讨组织工程心脏瓣膜的优越性和可行性。

胶原膜、聚乙醇酸/聚乳酸共聚物在组织工程心脏瓣膜支架材料中的应用

目的将活细胞种植于可生物降解的瓣膜支架上,制造出一种组织相容性好,不需抗凝,具有修复能力,且支持患者终生的理想心脏瓣膜。方法胶原膜和聚乙醇酸/聚乳酸共聚物(PGLA)在皮下包埋和种植细胞生长做对照实验。结果胶原膜皮下包埋8周仍保持膜状结构,8～12周完全降解,且生物相容性优于聚乙醇酸/聚乳酸共聚物(PGLA)。结论胶原膜适于组织工程心脏瓣膜支架材料的应用。

胶原膜与聚-β-羟基丁酯在组织工程心脏瓣膜中应用的研究

目的 :对胶原膜与聚 β 羟基丁酯在组织工程心脏瓣膜技术中的应用进行比较。方法 :对照研究胶原膜和聚 β 羟基丁酯膜在材料结构、皮下包埋和细胞生长对照实验情况。结果 :胶原膜呈网孔状结构 ,皮下包埋8周仍保持膜状结构 ,皮下包埋 8～ 12周完全降解 ,生物相容性优于聚β羟基丁酯膜。结论 :胶原膜在材料结构特征、降解率和生物组织相容性方面均优于聚β羟基丁酯 。

应用聚羟基丁酸/聚羟基戊酸共聚物构建组织工程心脏瓣膜的实验研究

目的 探讨应用聚羟基丁酸 /聚羟基戊酸共聚物 ( poly- hydroxybutyrate- co- hydroxyva lerate,PHBV)构建组织工程心脏瓣膜的可行性。 方法 应用扫描电子显微镜观察 PHBV的结构特点 ,将 PHBV行兔皮下包埋 ,分别于包埋后 2周、4周、6周、8周和 10周观察 PHBV的生物相容性和降解率。体外培养犬主动脉瓣间质细胞 ,观察其生长曲线 ,平滑肌 α肌动蛋白表达和透射电子显微镜下特点。将体外培养的犬主动脉瓣间质细胞种植于 PHBV上 ,观察其生长情况并测定细胞合成前列环素的功能。 结果 扫描电子显微镜下 PHBV呈网孔状泡沫结构 ,孔径 130μm。皮下包埋显示 PHBV生物相容性好 ,体内降解时间约 10周。犬主动脉瓣间质细胞平滑肌 α肌动蛋白免疫组化染色部分细胞呈阳性表达 ,细胞内有大量粗面内质网 ,生长曲线良好。种植实验显示细胞在 PHBV上生长良好 ,并有合成、分泌前列环素的功能。 结论 以 PHBV为支架构建组织工程心脏瓣膜 ,种子细胞不仅可以在 PHBV上生长 ,而且可以合成血管活性物质 ,初步提示应用

可降解聚合物在组织工程心脏瓣膜中应用的皮下埋植实验研究

目的 :评价作为组织工程心脏瓣膜支架的聚羟乙酸 聚乳酸共聚物 (PGLA)、聚 β 羟基丁酯 (polyhydroxybu tyrate ,PHB)、胶原膜三种生物可吸收材料的组织相容性和皮下吸收情况。 方法 :本文对照研究三种材料经皮下埋植后 2、4、6、8周和 12周的大体观察及组织学检查。 结果 :胶原膜皮下包埋 8周仍保持膜状结构 ,8～ 12周完全降解 ,组织相容性及皮下吸收情况优于PHB及PGLA。 结论

去细胞猪主动脉瓣构建组织工程瓣实验研究

目的 观察未经戊二醛处理的去细胞猪主动脉瓣组织相容性和可降解性 ,并探讨其构建组织工程瓣可行性 .方法 应用体外种植犬主动脉壁间质细胞和内皮细胞的去细胞猪主动脉瓣叶种植于犬腹主动脉内 ,观察其形态学和免疫组织化学变化 .结果 1皮下埋藏实验显示瓣叶轻度炎症反应 ,10 wk埋藏物完全降解吸收 ;2体外细胞种植后 7d,见瓣叶表面有单层种子细胞覆盖 ;3体内 ,即腹主动脉内移植瓣叶 ,支架逐渐吸收 ,为新生细胞综合和分泌的纤维结缔组织所取代 ,至 10 wk末瓣叶完全重塑 ,在新构成的瓣叶中可检测到 , 型胶原、弹力纤维和粘多糖 ,间质细胞部分呈 α-平滑肌肌动蛋白阳性表达 ,内皮细胞覆盖于瓣叶表面 , 因子染色为阳性 .结论 去细胞猪主动脉瓣体外初步构建的组织工程瓣 ,移植入犬腹主动脉内经 10 wk观察 ,已初步形成具有活细胞的瓣叶组织 ,并提示组织相容性优于人工合成材料 .

应用胶原膜构建组织工程心脏瓣膜的初步研究

目的 :探讨应用胶原膜构建组织工程心脏瓣膜的可行性。方法 :扫描电镜观察材料结构特点。材料兔皮下包埋实验 ,分别于 4,6 ,8,12周观察材料的生物相容性和降解率。培养犬主动脉瓣间质细胞、主动脉壁间质细胞和皮肤成纤维细胞 ,对照其生长曲线、平滑肌α肌动蛋白表达和扫描电镜特点。将犬主动脉壁间质细胞和内皮细胞种植于胶原膜上 ,观察其形态并测定细胞合成前列环素的功能。结果 :胶原膜呈网孔状结构 ,孔径 10 7μm。皮下包埋实验显示材料生物相容性好 ,体内降解时间为 12周。犬主动脉瓣间质细胞和主动脉壁间质细胞平滑肌α肌动蛋白均为部分阳性表达 ,细胞内有大量粗面内质网 ,生长曲线相似。种植实验示细胞在材料表面生长良好 ,并具有合成、分泌前列环素 (84.2 pg/ m L vs0 .4pg/ m L ,P<0 .0 5 )的功能。结论 :以胶原膜为支架体外构建组织工程心脏瓣膜细胞不仅能在材料表面生长 ,还能合成、分泌血管活性物质 ,是具有“生理功能 "的组织工程心脏瓣膜。

聚乳酸聚乙醇酸膜、聚β羟基丁酯膜和胶原膜三种材料的相容性探讨

目的评价聚乳酸聚乙醇酸膜、聚β羟基丁酯膜和胶原膜的结构、生物相容性及其在组织工程血管中的应用前景。方法 HE、胶原染色,扫描电镜观察材料的结构。新西兰兔15只皮下植入材料,于4、6、8和12周取出观察其组织反应和降解情况。将犬股动脉间质细胞种植于聚乳酸聚乙醇酸膜、胶原膜上,观察其形态。结果聚乳酸聚乙醇酸膜、聚β羟基丁酯和胶原膜的孔径分别为179、13、107μm,3种材料组织相容性好,局部无组织坏死和脓肿形成。早期以中性粒细胞和嗜酸性粒细胞浸润为主,后期以淋巴细胞浸润为主。聚乳酸聚乙醇酸膜于8周基本吸收,胶原膜12周吸收,聚β羟基丁酯膜12周未见明显降解吸收。细胞种植实验显示细胞在聚乳酸聚乙醇酸膜和胶原膜表面生长良好。结论聚乳酸聚乙醇酸膜和胶原膜在材料结构、组织及细胞相容性和降解率方面符合组织工程血管支架材料的要求。聚β羟基丁酯膜在材料结构、降解率和细胞相容性方面尚需改进。

婴儿室间隔缺损196例诊治分析

回顾分析 1 96例 1 2月龄以下婴儿室间隔缺损行根治术患者。经彩色超声心动图确诊膜周室缺 1 64例 ,嵴内和干下室缺 31例 ,肌部室缺 3例。平均缺损直径 9.4± 2 .2 mm,提示 1 0 3例伴有中 -重度肺动脉高压。 9例行右心导管检查 ,收缩压 5 .8～ 1 1 .6k Pa,舒张压 2 .1～ 6.7k Pa。对 1 5 7例采用中度低温 39例采用深低温低流量体外循环行一期根治术 ,结果全组死亡 3例 ,病死率占 1 .5 3% ,其中低心排综合征 2例 ,重度感染 1例。提示

聚羟基丁酸及其共聚物在组织工程心脏瓣膜中应用的初步研究

应用组织工程支架 ,将活细胞种植于可生物降解的瓣膜支架上 ,制造出一种组织相容性好 ,不需抗凝 ,具有修复能力 ,且支持患者终生的理想心脏瓣膜。对照进行聚羟基丁酸 (polyhydroxybutyrate ,PHB)、聚羟基丁酸 /聚羟基戊酸共聚物 (Poly-hydroxybutyrate/hydroxyvalerate ,PHBV)皮下包埋和种植细胞生长研究实验。结果表明PHBV皮下包埋 8周仍基本保持膜状结构 ,10周完全降解 ,且生物相容性优于PHB。PHBV更适于组织工程心脏瓣膜支架材料的应用。

临床自发性气胸38例治疗体会

我们将收治自发性气胸的３８例病人采用的治疗方法报告如下。１临床资料１１一般资料本组共３８例，男３１例，女７例。平均年龄２８３岁。单侧气胸３２例，先后出现双侧气胸６例，单侧反复出现２次以上气胸者５例。１２主要症状多数病例都有咳嗽或用力后骤然出现胸...

聚羟基丁酸及其共聚物在体内组织相容性和降解率的实验研究

目的 评价作为组织工程心脏瓣膜支架材料的聚羟基丁酸/聚羟基戊酸共聚物(Poly-hydroxybutyrate/hydroxy-valerate,PHBV)、聚羟基丁酸(Polyhydroxybutyrate,PHB)两种生物可吸收材料的组织相容性和皮下吸收情况。方法 对照研究两种材料经皮下埋植后2、4、6、8和10周的大体观察及组织学检查。结果 PHBV皮下包埋8周仍保持膜状结构,10周完全降解,组织相容性及皮下吸收情况优PHB。结论 PHBV符合组织工程心脏瓣膜支架材料的基本要求。

胶原膜和聚乙醇酸/聚乳酸共聚物构建组织工程心脏瓣膜的对照研究

目的 利用组织工程技术 ,将活细胞种植于可生物降解的瓣膜支架上 ,制造出一种组织相容性好 ,无需抗凝 ,具有修复能力 ,且终生支持患者的理想心脏瓣膜。方法 对照研究胶原膜和聚乙醇酸 /聚乳酸共聚物 (PGLA)在皮下包埋和种植细胞生长的结果。结果 胶原膜皮下包埋 8周仍保持膜状结构 ,8～ 12周完全降解 ,且生物相容性优于PGLA。

应用胶原支架构建组织工程心脏瓣膜的初步研究

目的 探讨应用胶原支架构建组织工程心脏瓣膜的可行性。方法 行兔皮下包埋实验 ,分别于 4、6、8、12周观察材料的生物相容性和降解率。将犬主动脉壁间质细胞和主动脉内皮细胞种植于胶原膜上 ,进而将此瓣叶植入犬腹主动脉内 3个月 ,观察材料吸收和瓣叶结构的变化。结果 胶原膜呈网孔状结构 ,孔径 10 7μm。皮下包埋实验显示 ,材料生物相容性好 ,完全降解时间为 12周。体内实验显示 ,材料于 12周末被间质细胞合成的细胞外基质所取代 ,瓣叶表面有内皮细胞覆盖。结论 以胶原膜为支架构建组织工程心脏瓣膜是可行的 ,但材料在强度和组织相容性方面尚需改进。

去细胞猪主动脉瓣的构建及性能鉴定

目的研究猪主动脉瓣(猪瓣)去细胞方法,观察埋藏前后猪瓣内源性逆转录病毒(PERV)和瓣膜支架变化.方法①采用去垢剂、核酸酶和改变溶液渗透压方法制备去细胞猪瓣支架.②应用聚合酶链式反应(PCR)和逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)等方法检测去细胞前后新鲜猪瓣和去细胞猪瓣以及供体和受体外周血PERV.③去细胞瓣叶埋藏家兔皮下4、6、8、10周后分别取材,应用苏木素-伊红和免疫组织化学染色,Instron 1122型万能强力仪、分光光度计、光镜和电镜进行检查.结果①经去细胞处理后猪瓣内细胞成分完全去除,可溶性蛋白明显丢失[(0.24±0.04)% vs (0.48±0.12)%],瓣叶含水量增加[(92.16±1.48)% vs (89.20±1.55)%],P均＜0.01,但去细胞猪瓣仍保持了良好纤维支架结构,热皱缩温度[(72.0±0.7)℃ vs (71.2±0.8)℃]和断裂强度[(449±19)g/mm2 vs (541±19)g/mm2]均无明显变化.②新鲜猪瓣和猪外周血标本经PCR和RT-PCR检测,于琼脂糖凝胶电泳内均出现219 bp扩增带,经测序这一产物与Medline公布的PERV-C型病毒有90%～97%同源性;去细胞猪瓣,及其移植于犬体内一个月后,抽取犬的外周血标本检测,219 bp扩增带均消失.③埋藏于兔皮下的去细胞猪主动脉瓣有轻微组织反应,4周时可见中性粒细胞、淋巴细胞和浆细胞浸润;6周后上述炎性细胞明显减少,去细胞瓣叶周边部分开始吸收,10周后完全吸收,埋藏部位未见结缔组织增生或疤痕形成.结论①猪瓣内细胞成分可以完全去除,并保持良好的纤维支架结构和机械强度,抗原性轻微,是一种生物可降解性材料.②猪瓣存在C型PERV,当瓣叶细胞完全去除后PERV-C转为阴性,受体外周血标本PERV-C反应为阴性.

去细胞猪主动脉瓣移植于犬腹主动脉内构建组织工程瓣

目的 探讨在犬腹主动脉内构建组织工程心脏瓣膜的实验方法。方法 将预种犬血管间质细胞和内皮细胞的去细胞猪主动脉瓣叶 (猪瓣 ),移植于 6条犬的腹主动脉内,于术后 4, 6, 8和 10周对移植瓣叶进行形态、组织结构及免疫组化染色观察。结果 (1)移植术后 4周时瓣叶周边有多层细胞长入,新细胞外基质形成,原支架组织部分吸收。(2) 10周末猪瓣组织完全吸收,为宿主细胞及新合成的细胞外基质取代。基质中间质细胞主要为成纤维细胞和肌纤维母细胞。细胞外基质成分主要为Ⅰ、Ⅲ型胶原和少量弹力纤维,并含有中性和酸性黏多糖。( 3 )内皮细胞覆盖于瓣叶表面。结论(1)移植于犬腹主动脉内的去细胞猪瓣于移植术后 10周末基本构成组织工程瓣叶; (2)腹主动脉内异位移植是一种可供选择的实验研究方法。