类风湿性关节炎患者的外周血 T 细胞亚群

采用单克隆抗体和免疫荧光技术,对18例类风湿性关节炎(RA)患者和15例自愿健康者外周血 T 淋巴细胞亚群进行了测定,结果 RA 组 T3+、T4+细胞较对照组降低,而 T8+细胞有所升高,从而导致 T4+/T8+比值下降,其表明 RA 组 T 细胞亚群分布异常。

旋毛虫幼虫的抗原分析

本文对旋毛虫幼虫可溶性抗原(TSA)的组分进行了分析。TSA含有5种血清学特异性抗原组分;经SDS-PAGE,TSA具有19条考马斯亮蓝染色带。

应用电激法在大肠杆菌中导入外源性DNA

本文报道用国产基因导入脉冲仪(LN-101型),采用高压脉冲电场,将质粒DNA和噬菌体DNA成功地转化或转导入大肠杆菌。该电场单次电压脉冲范围1.0kV—2.5kV(初电场强度2.8kV/cm—16kV/cm)、电容范围5—20μF,用质粒pUC18和受体菌株DH5α,获得10~9—10^(10)转化子/μgDNA。电场强度、电容及脉冲时间等不同的因素影响转化效率。转化率与DNA的强度呈线性关系,与受体细胞密度成正比。DNA和受体菌混合物在电激前、后的孵育时间,对转化效率影响不明显。用噬菌体M13mp 19 RF及受体菌株JM109,同样可获得较高的转化效率。

猪囊尾蚴抗原的免疫化学研究

应用琼脂双扩散(DID)、免疫电泳(IEP)、聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)和十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)对猪囊尾蚴的各部分抗原,即完整幼虫、囊液、头节和囊壁抗原进行分析。实验结果表明,4种抗原间存在相同的抗原成分。囊液中含有糖蛋白和脂蛋白。囊液、头节和囊壁蛋白质的主要分子量均在100KDa以下。囊液与头节有3条分子量相同的主带(60、46、38KDa),与囊壁只有1条分子量(46KDa)相同主带。从免疫学和生物化学角度初步探索了囊液、头节和囊壁蛋白质之间的相互关系及主要蛋白质组分。

应用聚合酶链反应改造鲑鱼生长激素cDNA

为了在大肠杆菌中表达天然序列的鲑鱼生长激素基因,本研究应用聚合酶链反应扩增方法改造镇鲑鱼生长激素cDNA,成功地扩增出编码鲑鱼生长激素成熟肽的序列,并在该序列的5′端和3′端分别引入EcoRI和BamH1的识别序列,使之便于进入载体,获得亚克隆。结果表明:应用聚合酶链反应扩增及分子克隆方法改造鲑鱼生长激素cDNA较传统的DNA重组方法简便,效率高。文中对聚合酶链反应扩增中非预期突变进行了讨论。

鲑鱼生长激素基因分泌型表达质粒的构建

生长激素（ＧＨ）是动物垂体前叶分泌的一种多肽类激素．应用分子重组及ＰＣＲ等技术，构建了一种鲑鱼生长激素基因分泌型表达质粒ｐＯｓＧＨ１５３，使编码鲑鱼生长激素成熟肽的序列克隆在大肠杆菌分泌型表达载体ＰＩＮ－Ⅲ－ｏｍｐＡ内，直接位于编码大肠杆菌外膜蛋白Ａ信号肽序列的下游，在Ｌｐｐ－Ｌａｃ杂合启动子控制下，经ＩＰＴＧ诱导，分子量约２３０００的鲑鱼生长激素在大肠杆菌中获得高效表达，该产物具有天然鲑鱼生长激素的免疫活性，直接分泌到细胞周质，而信号肽被自动剪除．

采用定点基因缺失突变技术在大肠杆菌中分泌鲑鱼生长激素

目的：为获得与天然鲑鱼生长激素一致的基因工程产物，对已构建的鲑鱼生长激素基因分泌型表达质粒ｐＯｓＧＨ１５３进行改造，删除所编码表达产物氨基端多余的９个碱基。方法：采用ＰＡＬＴＥＲ系统进行寡聚核苷酸指导下的基因定点缺失突变。突变质粒ｐＯｓＧＨ１５８经限制性酶切图谱及Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交分析加以证实。结果：含有表达质粒ｐＯｓＧＨ１５８的大肠杆菌株经ＩＰＴＧ诱导后提取周质蛋白。经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ及免疫印迹分析表明：周质表达产物具有与天然ｓＧＨ免疫活性和分子量一致的特性，其分子质量约为２３ｋｕ。结论：应用ＰＩＮ－Ⅲ－ｏｍｐＡ ２分泌型载体系统和ＰＡＬＴＥＲ突变系统构建鲑鱼生长激素基因在大肠杆菌表达载体的方法，可作为原核系统分泌型高效表达的模型。

替马沙星的体内抗菌作用研究

本文报道,口服替马沙星对8株临床常见致病菌经腹腔感染小鼠的体内保护实验。结果显示:替马沙星对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、肺炎杆菌和绿脓杆菌各两株感染小鼠均具良好体内保护作用。其中对金黄色葡萄球菌杆染的保护作用明显优于对照药环丙沙星,两株菌感染的ED_(50)分别是3.10mg/kg和4.33mg/kg,比环丙沙星强三倍;对大肠杆菌感染的保护作用比环丙沙星差2～3倍;对各一株肺炎杆菌和绿脓杆菌感染的保护作用和环丙沙星相似,而对另外一株肺炎杆菌和一株绿脓杆菌感染的保护作用比环丙沙星差。 实经结果表明;替马沙星具有良好体内抗菌作用。

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌mecA基因扩增

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)是院外感染和医院内感染的重要病原菌之一,所致感染治疗困难,病死率高,已成为临床治疗的一大难题。我们应用聚合酶链反应探讨 mecA 基因在 MRSA 中的分布及其与耐药性的关系。现报告如下。材料和方法一、菌株收集与鉴定金黄色葡萄球菌(金葡菌)共70株,从我院门诊或病房患者的血、尿、脓汁等标本中分离,常规进行生化鉴定。甲氧西林敏感金葡菌为 ATCC25923,