细胞因子对HLA-B27启动子的调节作用及其在强直性脊柱炎发病机制中的意义

目的:构建含HLA-B27启动子的HeLa稳定转染细胞株,观察7种细胞因子对HLA-B27启动子及其上游NF-κB及ISRE顺式作用元件活性的调节作用,探讨强直性脊柱炎(AS)等B27相关疾病的发生机制。方法:转染HeLa细胞,抗生素筛选单克隆构建含HLA-B27启动子的稳定转染细胞株。构建HeLa-B27稳定细胞株和HeLa-NF-κB稳定细胞株,在瞬时转染pISRE-luc的HeLa细胞中加入白细胞介素1α(IL-1α)、白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、干扰素α(IFN-α)、干扰素β(IFN-β)、干扰素γ(IFN-γ)和转化生长因子β(TGF-β),观察7种细胞因子对B27启动子及其上游NF-κB和ISRE作用元件的调节作用。另外在HeLa-B27稳定细胞株培养液中同时加入3种细胞因子单克隆抗体和相应细胞因子,观察其对启动子活性的调节作用。结果:TNF-α、IFN-α、IFN-β和IFN-γ均能明显增强HeLa细胞B27启动子活性。细胞培养96h后,IFN-β为最强的启动子诱导剂(5.4倍,P<0.05);细胞培养8h内,TNF-α、IL1-α和IL1-β,可诱导NF-κB的活性增加30倍左右(P<0.05),IFN-α和IFN-β可诱导ISRE的活性增加12倍左右(P<0.05),抗TNF-α抗体对于I类IFN增加的B27启动子活性没有明显的抑制作用。结论:TNF-α和IFN可通过结合于B27启动子中各种转录因子结合元件调控HLA-B27启动子的转录活性,IFN-β可能在强直性脊柱炎等B27相关的脊柱关节病的发病机制中起着重要作用。

不同免疫抑制剂及甲泼尼龙对小鼠肺间质纤维化的疗效对比

目的比较环磷酰胺、来氟米特和甲泼尼龙对博来霉素诱导的肺间质纤维化小鼠模型的疗效。方法将75只C57BL/6小鼠随机分成空白组、模型组、环磷酰胺组、来氟米特组及甲泼尼龙组(n=15)。空白组气管内注入0.9%氯化钠注射溶液0.2 m L,其余5组气管内注入博来霉素(5 mg/kg)建立肺纤维化模型,24 h后分别对空白组、模型组每日用0.2 m L 0.9%氯化钠注射溶液灌胃,药物组每日分别用环磷酰胺(50 mg/kg)、来氟米特(4 mg/kg)和甲泼尼龙灌胃(10 mg/kg)。并于造模后第7、14、28天分批处死小鼠,取小鼠肺脏评估肺泡炎程度及纤维化的程度。结果 (1)博来霉素诱导组小鼠体质量较对照组减轻(P<0.05),环磷酰胺、来氟米特组和甲泼尼龙组小鼠在第7、14、28天小鼠体质量较模型组均明显增加(P<0.05)。(2)与模型组相比,环磷酰胺组与甲泼尼龙组小鼠7天、14天时肺泡炎评分降低(P<0.05);第7天、14天、28天时纤维化评分明显降低(P<0.05)。而来氟米特组小鼠肺泡炎及纤维化评分较模型组差异无统计学意义。结论环磷酰胺和甲泼尼龙能显著降低博来霉素诱导的小鼠肺间质纤维化,减轻肺组织肺泡炎及肺纤维化程度,但来氟米特没有类似作用。

强直性脊柱炎的诊断治疗进展

虽然对强直性脊柱炎致病机制仍未完全明了,临床诊治还有很多困惑,但近年其治疗的新策略取得了可观的新经验,2009年第73届美国风湿病学会报道了强直性脊柱炎的最新诊断标准,本文详细叙述了强直性脊柱炎的治疗方案及原则。

痛风和高尿酸血症患者携带HLA-B＊5801及伴发疾病的比较

目的探讨痛风和高尿酸血症患者HLA-B~*5801等位基因携带情况及伴发疾病的差异。方法接受HLA-B~*5801基因检测的284例患者为研究对象,其中高尿酸血症患者172例,痛风患者112例,分析两者HLA-B~*5801等位基因携带情况、皮肤过敏反应情况、血尿酸水平及伴发疾病等资料,并作比较。结果 284例患者中HLA-B~*5801等位基因阳性33例(11.6%),高尿酸血症患者中阳性27例(15.7%),痛风患者中阳性6例(5.3%),两者比较差异有统计学意义(P<0.05)。33例中8例患者发生皮肤过敏反应。HLA-B~*5801阴性者无出现皮肤过敏反应者。痛风患者血尿酸高于600μmol/L的比例高于高尿酸血症患者(P<0.05)。与高尿酸血症患者相比,痛风患者高脂血症的发病率更高(67.0%vs.51.2%,P<0.05),而两者高血压病、冠状动脉粥样硬化性心脏病、慢性肾功能不全和糖尿病的发病率比较差异无统计学意义(P均>0.05)。结论高尿酸血症患者携带HLA-B~*5801基因比例高于痛风患者;与高尿酸血症患者相比,痛风患者更易出现高脂血症。

南蛇藤素和扁蒴藤素显著下调HLA—B^＊2705启动子的活性

目的:利用高通量药物筛选方式,为寻找潜在的脊柱关节炎(SpA)新的治疗药物提供理论依据。方法:选取12264小分子化合物分别使用293T-HLA-B27和HeLa-HLA-B27稳定细胞株,观察对HLA-B*2705启动子有调节作用的化合物,筛选能够下调HLA-B*2705启动子活性的阳性化合物:启动子活性>150%为激动剂,启动子活性<60%为抑制剂。并且对进一步筛选出的抑制剂进行细胞毒性试验及半数抑制浓度/半数效应浓度(IC50/EC50)检测,筛选出具有较好剂量-效应的阳性化合物。结果:(1)使用293T-HLA-B27细胞第1次筛选出624种阳性化合物,阳性率为5·1%;(2)使用HeLa-HLA-B27细胞株对上述624种化合物进行再次筛选,有70种化合物再次显示出对B*2705启动子活性的增强或者抑制作用;(3)进行EC50/IC50检测的40种化合物中,6种化合物为抑制剂,表现出较好的剂量-效应曲线,其中南蛇藤素和扁蒴藤素均为雷公藤类衍生物。结论:南蛇藤素和扁蒴藤素可下调HLA-B27表达,提示在今后针对HLA-B*2705相关的SpA患者治疗中,它们可能是值得研究的潜在有效化合物。

表现为吸气性呼吸困难但软骨环完整的复发性多软骨炎1例

难伴喉鸣2个月，加重2 d”于2013年5月15日入院。患者入院前3个月前无明显诱因出现咽痛、咳嗽，日轻夜重，渐出现声音嘶哑，无饮水呛咳，于当地医院给予抗感染治疗后未见好转。入院前2个月出现呼吸困难伴喉鸣音，夜间不能平卧，于河北某医院行喉镜检查示咽部黏膜慢性充血改变；胸片未见明显异常；再次给予抗感染治疗后未见好转。入院前1个月患者就诊我院门诊，肺功能检查示限制性通气功能障碍、小气道功能障碍、残存比增高，可见吸气相平台。动脉血气分析示低氧血症。胸部 CT 示右肺中叶可见小斑片。门诊考虑“下呼吸道感染，不除外支气管哮喘急性发作”，给予茶碱、左氧氟沙星、甲泼尼龙40mg 静点1次，富马酸福莫特罗粉吸入剂等治疗，症状有所缓解。入院前2天，患者无明显诱因出现呼吸困难加重，咳黄痰，左膝关节及双侧第一掌指关节疼痛，无红肿、畸形。体质量自发病以来下降10 kg。既往从事动物毛皮加工工作2年余。入院查体：T：36．5℃，P：112次／min，R：20次／min， Bp：116／72 mm Hg。神清，表情焦虑喘息貌，每次呼吸均伴有响亮的喉鸣音，眼、耳、鼻无压痛、畸形。喉部可闻及双向喘鸣音，音调响亮粗糙，以吸气相更响亮，吸气时可见胸骨上窝、锁骨上窝、肋间隙出现明显凹陷，呼气相延长，双肺亦可闻及吸气相干鸣音及呼气相喘鸣音，但音调较喉部显著减低。HR：112次／min，律齐，未及病理性杂音，腹部未见阳性体征。左膝、双侧第一掌指关节轻压痛，无红肿、畸形。

视力下降、腰背部疼痛——查房选录(345)

1病历摘要 患者男，学生，19岁，因视力下降2个月，肩背、腰骶部疼痛1个月于2010年9月16日收入院。患者两个月前无明显诱因突发视力下降，进行性加重，约4d后双眼基本无光感，当地医院诊断为“球后视神经炎”，予甲泼尼龙500mg静脉滴注约6d后出现光感，继续予地塞米松10～15mg静脉滴注约10d，视力无好转。

金属蛋白酶抑制剂在骨关节炎发病机制中的作用

骨关节炎(Osteoarthritis,OA)一种随年龄增长而发生率上升的以关节软骨退变和关节周围骨质增生为病理特征的慢性进行性骨关节疾病,主要侵害关节软骨、骨和滑膜组织,导致关节疼痛、畸形和功能障碍,是引起中老年人疼痛的最常见原因。OA发病机制尚不明确,目前研究表明细胞外周基质(ECM)的破坏是OA发生发展的显著特征。金属蛋白酶家族(MMPs)及ADAMTs (ADisintegrin And Metal oproteinase with Thrombospondin motifs)家族中的蛋白聚糖酶是降解ECM的主要蛋白酶。而金属蛋白酶抑制剂(TIMPs)不仅能抑制蛋白酶对ECM的降解,而且能促进ECM的合成,在ECM的修复与重建及软骨细胞的凋亡方面都有着重要的意义,其对OA的发生发展及其治疗都有着重要的意义。

未折叠蛋白应答在强直性脊柱炎发病机制中的意义探讨

目的:通过研究强直性脊柱炎(AS)病人的外周血单个核细胞(PBMC)关节液单个核细胞(SFMC)的基因谱,了解有无支持UPR假说的转录物以及那些细胞参与未折叠蛋白应答(UPR),UPR在AS病人的变化及其在关节炎发病机制中的作用和意义。方法:AS病人的PBMCSFMC基因表达谱通过含1176基因的cDNA微阵列扫描得到,结果中比较AS与健康自愿者和RA病人有差异表达的基因C2、C3、C8、LMP2、LMP7和BiP(UPR的标志物)再以RTPCR验证。结果:AS患者的SFMC中的BiP表达显著高于RA患者SFMC组(RTPCR的均数和标准差为86.4±111.3和18.5±13.0,两者比较,P=0.044),AS和RA患者SFMC组的C2分别为91.6±36.7和18.5±3.6(两者比较,P<0.037),而且AS患者的SFMC中BiP和UPR相关的蛋白酶体C2的增高水平密切相关(相关系数r=0.9)。另外,研究还发现,AS患者SFMC过度表达BiP的细胞是单核巨噬细胞。结论:内质网UPR确实发生在AS患者SFMC中的巨噬细胞。结果显示UPR应答在AS病人关节炎症的初期和延续中起重要的作用。

IL-8在强直性脊柱炎活动期的表达与意义

目的 探讨趋化因子IL 8在强直性脊柱炎(AS)活动期的表达及意义。方法 通过cDNA微阵列及RT PCR技术检测活动期AS患者和对照组 [健康志愿者、类风湿关节炎 (RA)及膝关节外伤患者]的外周血、关节液中单个核细胞和滑膜细胞IL 8的表达 ,比较AS患者组与各对照组IL 8表达情况的差异。结果 在活动期AS患者外周血单个核细胞 (PBMC)或关节液单个核细胞 (SFMC)中IL 8的表达均明显高于健康志愿者PBMC中的表达 ,在RA患者PBMC中IL 8的表达亦高于健康志愿者PBMC中的表达 ,关节滑膜细胞IL 8的表达水平在AS患者也明显高于膝关节外伤患者。结论 IL 8在活动期AS中存在高表达 ,可能是AS的一种重要的炎症介质 。

基质金属蛋白酶-3在强直性脊柱炎中的作用和意义探讨

目的通过比较强直性脊柱炎(AS)病人抗肿瘤坏死因子(TNF)-α单克隆抗体药物(remicade)治疗前后的膝关节滑膜细胞的基因谱变化,找出缓解AS病情相关的主要基质金属蛋白酶(MMP)-3,并探讨MMP-3潜在调控的作用和在AS发病中的作用机制和意义。方法从AS病人在remicade治疗前和治疗3个月后的关节滑膜细胞的基因表达谱(用含1176基因的cDNA微阵列检测)结果中筛选的靶基因即差异表达最显著的MMP-3为特异性刺激因子,用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测它诱导健康志愿者外周血单个核细胞(PBMC)的炎症相关基因TNF-α、c-jun和c-fos的表达。结果比较AS病人治疗前后的关节滑膜细胞基因差异表达的结果,MMP-3治疗后下调最显著(P=0.0147)。与MMP-3聚类在一起的基因有111个,和MMP-3相关性最强的基因是金属蛋白酶抑制剂前体(TIMP)-1;MMP-3能显著诱导PBMC的TNF-α、c-jun和c-fos的表达。结论在remicade治疗AS过程中,下调MMP-3是最重要的环节之一;通过检测MMP-3在关节滑膜细胞组织中的表达水平可作为AS诊断和病情进展监控的参考指标;MMP-3下调,可能使TNF-TNFR2-JNK-AP-1信息通道的激活状态减弱,从而减少致炎因子的释放,调整异常的基质降解和血管形成等病理因素,缓解AS炎症、减少软骨和骨质破坏的作用。

抗c-mpl抗体在系统性红斑狼疮并发血小板减少中的作用

目的:分析抗血小板生成素(thrombopoietin,TPO)受体(c-mpl)抗体在系统性红斑狼疮(systemic lupuserythematosus,SLE)血小板减少中的作用,探讨该抗体的致病机制及临床价值。方法:应用间接ELISA法检测24例伴血小板减少SLE患者(A组)、27例曾有血小板减少现已恢复正常SLE患者(B组)、18例无血小板减少SLE患者(C组)及18例正常对照者血清中抗c-mpl抗体、TPO水平,分析其与临床表现及SLE疾病活动性指数(SLEdisease activity index,SLEDAI)之间的关系。结果:血清抗c-mpl抗体在SLE总的阳性率为18.8%,抗c-mpl抗体在A组、B组和C组中的阳性率差异无统计学意义(P=0.600)。抗c-mpl抗体阳性组血小板计数明显低于阴性组(P=0.025),血清TPO水平明显高于阴性组(P=0.038),抗c-mpl抗体阳性与阴性组补体C3和C4、红细胞沉降率(erythrocyte sedimentation rate,ESR)、C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)及抗核抗体(anti-nuclear antibody,ANA)、抗双链DNA抗体(anti double-strained DNA,dsDNA)、抗中性粒细胞胞浆抗体(antineutrophil cytoplasmic antibody,ANCA)阳性率、SLEDAI评分差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:抗c-mpl抗体可能通过与TPO竞争结合c-mpl,阻断TPO-c-mpl通路,引起巨核细胞分化、发育、成熟障碍,从而引起血小板减少。

昆仙胶囊对博来霉素诱导的肺间质纤维化小鼠病理及血清细胞因子的影响

目的探讨昆仙胶囊对博来霉素诱导的肺间质纤维化小鼠肺组织病理和血清白细胞介素(IL)-6、IL-10、IL-13、粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)表达的影响。方法将60只C57BL/6小鼠按随机数字法分成空白组、模型组、昆仙胶囊组及甲泼尼龙组,每组15只。空白组气管内注入0.9%氯化钠注射液0.02 ml,其余3组以气管内注入博来霉素(5 mg/kg)建立肺纤维化模型,并于造模后第7、14、28天分批处死小鼠,留取血样测定细胞因子IL-6、IL-10、IL-13、GM-CSF的含量,并取肺脏采用苏木精-伊红(HE)及Masson染色法观察肺组织病理变化。结果 (1)与空白组对比,其他各组第7、14、28天小鼠体质量下降(P<0.05);与模型组对比,昆仙胶囊和甲泼尼龙组小鼠体质量有所增加(P<0.05);(2)在第7、14、28天昆仙胶囊组肺泡炎和肺纤维化程度明显轻于模型组,小鼠肺泡炎和肺纤维化病理评分降低(P<0.05);且第28天时,昆仙胶囊组仅形成轻中度肺间质纤维化。(3)在第7、14、28天昆仙胶囊组血清IL-6、IL-10、IL-13、GM-CSF较模型组明显降低(P<0.05),而昆仙胶囊组与甲泼尼龙组对比差异无统计学意义(P>0.05)。结论昆仙胶囊能显著降低肺间质纤维化小鼠血清IL-6、IL-10、IL-13、GM-CSF表达水平,减轻肺组织肺泡炎及肺纤维化程度,从而抑制博来霉素诱导的小鼠的炎症反应和肺间质纤维化的发生发展。

干燥综合征诊治决策的现况调查及相关因素分析

干燥综合征（Sjogren′s syndrome,SS）是一种慢性弥漫性结缔组织病,该病的异质性很强,具有多种分类标准,国内外尚没有统一的治疗指南,临床上医生诊治SS的方法也有很大差异。因此，我们采用问卷调查的方法收集部分国内医生诊治SS的资料并分析决策的相关因素。

强直性脊柱炎与其他腰痛及关节痛患者人类白细胞抗原-B27磁珠酶联免疫分析的可靠性探讨(英文)

背景:人类白细胞抗原-B27与强直性脊柱炎等风湿病发病密切关联,对强直性脊柱炎有重要的辅助诊断价值。磁珠酶联免疫分析近来已应用于检测人类白细胞抗原-B27。目的:了解磁珠酶联免疫分析法检测人类白细胞抗原-B27的准确性、敏感性和特异性,探讨其在强直性脊柱炎辅助诊断中的价值。设计:金标准对照。单位:中山大学附属第三医院风湿科及检验科。对象:选择2002-12/2003-04首次于本院风湿科门诊或住院有腰痛和/或关节炎表现的86例患者。纳入标准:①有下腰痛和/或关节炎表现;②相关临床及辅助检查资料完整;③同意接受人类白细胞抗原-B27检测;④为首次在本院就诊或住院患者。排除临床或辅助检查资料不完整及患其他重大疾病者。86例患者中男56例,女30例,年龄12～65岁。方法:同时以磁珠酶联免疫分析和微量淋巴细胞毒试验法对入选患者血标本进行检测。以微量淋巴细胞毒试验法测定结果为金标准,统计两法结果的符合率,并计算磁珠酶联免疫分析检测人类白细胞抗原-B27的敏感度、特异度及阳性、阴性预测值。主要观察指标:①两种方法对人类白细胞抗原-B27检测结果的符合率。②磁珠酶联免疫分析检测人类白细胞抗原-B27的敏感度及特异度。结果:所有患者均进入结果分析。①对于33例强直性脊柱炎患者,磁珠酶联免疫分析检测人类白细胞抗原-B27的阳性率(90.9%)高于微量淋巴细胞毒试验法(87.9%),但差异无显著性意义(P>0.05)。②应用两法对33例强直性脊柱炎和53例有下腰痛和/或关节炎症状的其他患者测定人类白细胞抗原-B27,结果的总体符合率达93.0%。磁珠酶联免疫分析检测的敏感度为90.0%,特异度为95.7%,阳性预测值为94.7%,阴性预测值为91.7%。结论:对于强直性脊柱炎和其他风湿病患者,磁珠酶联免疫分析与微量淋巴细胞毒试验法均能可靠地检测人类白细胞抗原-B27,磁珠酶联免疫分析的敏感度和特异度均已达较高水平。

原发性干燥综合征患者受教育现况调查

目的调查和分析原发性干燥综合征(PSS)患者受教育现状、需求及影响因素。方法分别对参加2008年10月北京大学人民医院与北京医院风湿免疫科病友会的51例PSS患者和参加第8届北京风湿病年会的318名医生进行现场调查,包括患者接受教育,医生给予教育的内容、途径、形式,患者及医生希望进行患者教育的内容、途径、形式。结果两阶段回收有效答卷分别为50及281份。接受过教育的患者占88%(44/50),其中42人次接受过治疗指导,11人次得到过饮食及生活指导。62人次在病房或门诊接受健康教育,11人次教育来自于网络和书籍。66%(33/50)的患者和92.2%(259/281)的医生关注PSS对脏器的影响,60%(30/50)的患者和86.8%(244/281)的医生重视干燥综合征的治疗,4%(2/50)的患者希望了解PSS与妊娠的关系。72%(36/50)的患者及74.7%医生(210/281)愿意在病房进行患者教育,52%(26/50)的患者和78.3%(220/281)的医生愿意在门诊。38%(19/50)的患者与34.5%(97/281)的医生愿意通过讲座形式进行患者教育。结论国内PSS患者可以得到程度不同、形式多样的健康教育,患者对教育的需求与医生所希望提供的帮助基本一致。

微小核糖核酸在骨关节炎中的研究进展

骨关节炎(OA)是一种随年龄增长而发生率上升的以关节软骨退变和关节周围骨质增生为病理特征的慢性进行性骨关节疾病,同时软骨细胞表型和软骨内稳态的变化以及软骨下骨的代谢变化是骨关节炎发展过程中密不可分的一部分。微小RNA(microRNA或miRNA)属于内源性非编码蛋白的单链小分子RNA,主要通过调控基因转录后水平,进而对组织生长和稳态进行控制。本文基于miRNA的基因调控机制,从其生物学特性、miRNA与软骨形成及关节软骨、miRNA与疼痛及炎性反应等几个方面对两者关系进行综述,为临床治疗提供新的策略。

干燥综合征合并中轴型脊柱关节炎的临床分析

目的分析干燥综合征(SS)合并中轴型脊柱关节炎(axSpA)的临床相关因素,从而提高对此类疾病的认识。方法收集SS合并axSpA的31例患者临床资料,并选择113例同期收治的性别、年龄相匹配的原发性干燥综合征(pSS)患者为对照,从一般资料、临床表现、实验室检查和多系统损伤等方面进行分析。结果SS合并axSpA患者组关节表现和内脏损害多,该组关节痛、红细胞沉降率升高、C反应蛋白增高、抗Ro-52抗体阳性、肺部损害、肾损害和血液系统受累的比例均高于pSS组,差异有统计学意义(P<0.05);但两组间口眼干、抗核抗体(ANA)、抗SSA抗体、抗SSB抗体、腮腺造影、Schirmer试验、角膜染色、心脏损害、肝损害和神经损害,均差异无统计学意义(P>0.05)。结论 SS合并axSpA患者关节表现和内脏损害多且严重,尤以肺部、肾脏和血液系统明显;同时病情活动度高、进展快。