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题名黑曲霉脂肪酶基因的克隆及其在黑曲霉中的同源表达
被引量:1
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作者
赵书范
李琪
聂红梅
汪钊
郑建永
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机构
浙江工业大学生物工程学院
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出处
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第9期14-19,共6页
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基金
国家自然科学基金项目(31600639)。
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文摘
旨在研究黑曲霉脂肪酶基因在黑曲霉中的同源表达情况。利用黑曲霉基因组作为模板克隆8种脂肪酶基因,与双元表达载体pCAMBIA连接构建8个表达载体。通过原生质体-PEG转化法,实现8个脂肪酶基因在黑曲霉中同源表达,其中转化子MA-H3-PglaA-SglaA脂肪酶活性最高。对该酶进行分离纯化和酶学性质表征,酶最适温度45℃,最适pH 7.5,K^(+)、Mg^(2+)等金属离子对脂肪酶有显著激活作用。酶底物特异性实验发现,该酶对底物pNPA亲和力最高,脂肪酶ANL-H3的K_(m)为1.893 mmol/L,V_(max)为1.610 mmol/(L·min)。该研究为黑曲霉脂肪酶的同源表达提供了有效的策略和数据支持,可为食品级脂肪酶的开发和应用提供理论基础。
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关键词
黑曲霉
脂肪酶
基因克隆
同源表达
酶学性质
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Keywords
Aspergillus niger
lipase
gene cloning
homologous expression
enzymatic properties
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分类号
Q78
[生物学—分子生物学]
TS201.25
[轻工技术与工程—食品科学]
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