诺氟沙星壳聚糖微胶囊缓释作用研究

利用冷冻干燥法制备了诺氟沙星-壳聚糖微囊制剂,并比较了诺氟沙星-壳聚糖微囊制剂与诺氟沙星原料药在草鱼组织中代谢动力学的差异性。结果表明,同诺氟沙星原料药相比,壳聚糖包埋对诺氟沙星在草鱼血浆中的吸收、代谢速率明显延缓,生物利用度明显增加。壳聚糖包埋条件下T1/2 ka为单纯口灌诺氟沙星的8倍,达峰时间平均延长2倍有余,T1/2α和T1/2β也明显延长,消除率(CLs)是单纯口灌的1/2;5倍壳聚糖包埋条件下诺氟沙星在草鱼血浆中的吸收速度比10倍包埋条件下稍快,达峰时间短,消除速度明显加快,但分布半衰期和曲线下面积(AUC)大小二者比较接近。实验中诺氟沙星-壳聚糖微囊制剂同诺氟沙星原料药在草鱼体内代谢动力学差异表明壳聚糖包埋对诺氟沙星药效的释放及鱼体对药物的吸收代谢都具有明显的延缓效果,因此在实际的生产活动中可用壳聚糖作为缓释剂延长药效、延缓药物在养殖动物体内的吸收代谢,提高生物利用率,达到更好的预防和治疗效果。

基于GABAA受体评估双氟沙星对异育银鲫的安全性

神经传递的兴奋和抑制的相互平衡是维持中枢神经系统正常功能的必要条件,其中抑制性则是由最重要的神经递质γ-氨基丁酸（GABA）调节的,而GABA则主要通过GABA A受体GABAAR起作用。A型受体是一种跨膜门控氯离子通道,可介导阶段性的抑制突触传递,也可强直性抑制外周突触传递,因此在神经性疾病如焦虑和癫痫的病理生理学中起着至关重要的作用[1]。

GABA受体在渔药安全性评估及渔药研发中的应用

在中国水产养殖业高速发展的同时,各类水产病害亦迅速增加,而药物防治作为中国水产动物疾病防治的主要方式,其安全性已经引起了社会的普遍关注。而要保证水产养殖动物及养殖生态环境的安全,就必须重视渔药的安全性评估。本文在总结中国当前渔药安全隐患的基础上,着重介绍了GABA受体类型及其结构特征,对GABA受体在渔药安全性评估和渔药研发中的实验结果及应用进行了详细论述,认为将GABA受体的多样性及其亚基选择性引入到渔药研发创新中具有广阔前景。本文对推进中国渔药安全性评估体系建设、提高水产品质量安全和促进水产养殖专用渔药的研发具有一定的理论指导意义,有利于提高中国水产养殖过程中渔药的安全使用,推动水产养殖业的可持续发展。

异育银鲫GABA A受体γ2亚基全长克隆及生物信息学分析

近年来GABA A受体亚基特异性在药物筛选、研发过程中的应用得到广泛地关注,其中有关α1、β2和γ2三种功能性亚基的研究最为深入。异育银鲫因其良好的生长、繁殖优势,在国内得到广泛养殖。采用RACE法克隆得到了异育银鲫GABA A受体γ2亚基基因全长cDNA,并进行了生物信息学分析。该基因长2 763 bp,其中CDS区长1437 bp,可编码477个氨基酸的前体蛋白。预测蛋白分子量55.3 k D,理论等电点9.13。异育银鲫体内GABA A受体γ2亚基氨基酸序列N端存在1个长度为35个氨基酸的信号肽,4个长度分别为23、20、23和23个氨基酸的跨膜区,3个N-糖基结合位点和2个O-糖基化位点,1个特异性结构域,其氨基酸序列具有明显的氯离子门控通道家族特征。氨基酸序列与其他物种氨基酸序列的同源性都在89%以上,表明该蛋白属于GABA A受体亚基家族。系统进化树表明异育银鲫与斑马鱼聚为一支,亲缘关系最近。

异育银鲫体内阿维菌素血脑屏障渗透性及组织残留

采用脑组织匀浆法和高效液相色谱法(HPLC),检测异育银鲫(Carassius auratus gibelio)体内不同浓度下阿维菌素(Avermectin,AVM)血脑屏障渗透性及其组织残留情况。结果显示,AVM在其3个半数致死浓度(24 h LC50:0.127 mg/L、48 h LC50:0.071 mg/L、96 h LC50:0.039 mg/L)及其安全用药浓度(0.003 9 mg/L)下,均能从异育银鲫脑组织中检测出AVM;其中24 h LC50浓度下脑中AVM含量最高,为(0.292±0.005)μg/g;并且各半数致死浓度之间脑中AVM含量差异均极显著(P<0.05)。结果表明,不同浓度条件下AVM均能渗透通过血脑屏障进入异育银鲫脑组织,其含量与AVM用药浓度呈正相关。另外,在安全用药浓度(0.003 9 mg/L)条件下,AVM在各组织中的浓度时间数据经DAS 3.0药物代谢动力学软件拟合后发现均符合非房室模型,其主要药代动力学参数大小关系表现为:(1)达峰时间(Tmax):肌肉<脑<肝<肾;(2)峰浓度(Cmax):肝>肾>肌肉>脑;(3)末端消除半衰期(T1/2Z):肝>脑>肾>肌肉;(4)药时曲线下面积(AUC):肝>肾>脑>肌肉。本研究结果可为研究鱼类血脑屏障、AVM神经毒性及其在水产养殖上的应用提供参考。

双氟沙星对异育银鲫血脑屏障渗透性及消除规律

以异育银鲫(Carassais auratus gibebio)为研究对象,采用组织匀浆法和高效液相色谱法,研究了双氟沙星(Difloxacin,DIF)通过异育银鲫血脑屏障情况,并比较分析了大脑和外周组织中DIF消除差异。结果显示,根据DIF 96h半数致死剂量(2840 mg/kg b.W)给药后,第96h时异育银鲫大脑组织匀浆中DIF的含量为(10.49±0.35)μg/g;同时在临床推荐用药剂量(20 mg/kg)给药后的15个时间点(0?960h)上均能从大脑组织匀浆中检测出DIF。上述结果表明DIF能渗透通过血脑屏障而进入异育银鲫大脑组织。另外,在大脑和外周组织消除过程上,以大脑组织中的DIF消除过程最为平缓(按照20 mg/kg给药)。到试验第960h,大脑组织中DIF含量最高,为(0.392±0.007)μg/g,且大脑中的消除半衰期最长,为1157.713h。因此,异育银鲫大脑组织可作为DIF药物残留分析的靶组织。另根据欧盟关于食品中DIF最大残留限量(MRL)之规定,实验条件下DIF休药期至少为25d。结果为研究鱼类血脑屏障作用,DIF神经毒性及其在水产养殖上的临床应用提供了参考。

异育银鲫组织中γ-氨基丁酸A受体(GABA_AR)的免疫组织化学定位

观察γ-氨基丁酸A受体(GABAAR)异育银鲫中枢神经系统和外周组织中的特异性分布情况,探讨其在不同组织中的作用。本试验以GABAAR的α1亚基(GABAARα1)作为GABAAR的检测指标,采用免疫组织化学方法对异育银鲫端脑、中脑、小脑、延脑、肝脏、肾脏组织中的GABAAR进行定位研究。结果表明:在异育银鲫端脑、中脑、小脑、延脑、肝脏、肾脏中均有GABAAR存在,各组织中的GABAAR密度从高到低依次为:小脑、中脑、延脑、端脑、肾脏、肝脏。其中,小脑的分子层和蒲氏细胞层、中脑的视盖、延脑的迷走叶、端脑的纹状体、肾脏的肾小管以及肝细胞中GABAAR的密度较高。研究显示,GABAAR主要分布于异育银鲫的中枢神经系统,外周组织中也有少量分布。本研究旨在为异育银鲫GABAAR分布的定位研究奠定一定的科学基础。

鲫鳃出血病病原的传播途径简述

养殖水体水温在20～25℃时，银鲫常会出现鳃盖肿胀，从鳃部流出血水，该病被养殖户形象地称为鳃出血病。研究表明，此病专一性很强，对于水产养殖经济品种，除了鲫鱼外一般不会感染其他鱼类。已有研究确认其病原为鲤疱疹病毒2型（CyHV-2），并命名该病为“鲫造血器官坏死症”。

SpHtp1基因在不同种属水霉菌株中的分布

为研究SpHtp1基因在不同种属水霉菌株中的分布,以寄生水霉ATCC200013TM的基因组DNA为模板,设计1对特异性引物,进行PCR扩增。将扩增片段回收,并克隆入T载体,转化大肠杆菌DH5α,挑取阳性克隆测序。将测序结果与GenBank中登录的SpHtp1基因序列进行比较,同源性为99%。以该方法调查从水霉病主要流行地区分离的17株水霉菌SpHtp1基因的分布情况,结果发现:在17株水霉菌株中,有8株水霉菌检测到SpHtp1基因,阳性率为47%,且所有含SpHtp1基因的菌株在分类地位上均隶属于寄生水霉(Saprolegnia parasitica)。SpHtp1基因可能在寄生水霉中特异性存在,该基因有望用于寄生水霉的分离鉴定。

苏北水产安全用药示范养殖区的实践与总结

介绍了苏北水产安全用药示范养殖区建设情况,总结了示范区推进安全用药的经验,对加强中国水产养殖安全用药管理、保证水产品质量安全和提高水产品品质具有一定的指导意义,有利于提高中国水产品质量安全保障能力,推动水产养殖业的可持续健康发展。

盐度对吡喹酮预混剂在草鱼体内吸收及其残留消除规律的影响

运用高效液相色谱法(HPLC),在以每千克鱼体质量单次口灌500mg剂量条件下,对比吡喹酮预混剂中有效成分吡喹酮在淡水及半咸水草鱼体内的药动学差异。结果显示,在不同的试验组间,血浆、肌肉、肝脏和肾脏在各个时间点的药物浓度存在极显著性差异(P<0.01);淡水试验组的血浆、肌肉、肝脏和肾脏的药物峰质量浓度(Cmax)分别为1.13、1.43、5.55和3.72μg/mL,达峰时间均为1h;半咸水试验组的血浆、肌肉、肝脏和肾脏的药物峰质量浓度(Cmax)则分别为0.98、1.10、3.99和3.20μg/mL,达峰时间均为1h,表明淡水条件下草鱼体内的吡喹酮质量浓度高于在半咸水条件,而对吸收没有造成显著影响;淡水试验组的血浆、肌肉、肝脏和肾脏的消除半衰期分别为14.82、5.99、17.51和5.36h,半咸水试验组的血浆、肌肉、肝脏和肾脏的消除半衰期分别为10.77、5.57、3.49和3.37h,明显比淡水试验组的消除半衰期短,说明在水体中,渗透压可能会影响吡喹酮在草鱼体内的吸收和消除,建议在实际生产中吡喹酮预混剂的用药方案要根据养殖水体情况做适当调整。

异育银鲫GABA_B受体1亚基cDNA部分序列的克隆及表达分析

为了确定γ-氨基丁酸B受体(gamma-aminobutyric acid B receptor,GABA B R)基因在异育银鲫(Carassius auratus gibelio)不同组织中的表达,本实验分别对异育银鲫不同组织中GABA B R1基因进行RT-PCR扩增,并进行了克隆和测序,在与GenBank基因库中已知GABA B R1序列进行同源性比对的基础上采用邻接法构建系统发育树,并进一步分析其在异育银鲫不同组织内的表达水平。经克隆获得异育银鲫GABA B R1基因CDS区序列383 bp,编码127个氨基酸。荧光定量PCR结果显示,GABA B R1基因在异育银鲫脑、肝、肾、心、肠、鳔、鳃、肌、尾鳍、脾、卵巢、精巢组织中均有表达,且在不同组织中的表达水平由高到低依次是:脑>尾鳍>精巢>心、肠、鳔>卵巢、脾、鳃、肌>肝、肾。本研究证实了GABA B R1基因在异育银鲫各组织中表达的广泛性,且有明显的组织特异性。

青春的梦想

因为同一个梦想，我们欢聚一堂，成长的路上，散发青春的光芒。宁静的阳光，映衬着明媚的脸庞。