失眠动物模型HPA轴和表观遗传修饰的变化及交泰丸的干预作用

目的:探讨交泰丸对PCPA致失眠大鼠血清HPA轴和表观遗传修饰的影响。方法:腹腔注射PCPA复制大鼠失眠模型,灌胃交泰丸干预3 d,ELISA法检测外周血血清HPA轴激素ACTH、CORT、CRF水平及表观遗传修饰主要酶DNMT1、HDAC的活性和血清Acetyl-Histone H3的水平。结果:PCPA致失眠大鼠的血清HPA轴激素水平上升,但与正常组无显著差异,交泰丸干预可显著降低失眠大鼠的血清HPA轴激素水平。失眠大鼠的血清DNMT1活性较正常组显著上升,交泰丸干预可显著降低失眠大鼠的血清DNMT1活性。PCPA致失眠大鼠的血清Acetyl-Histone H3水平上升,但与正常组无显著差异,交泰丸干预可显著降低失眠大鼠的血清Acetyl-Histone H3水平。结论:交泰丸可通过调节HPA轴激素水平治疗心肾不交型失眠。交泰丸可能通过DNA去甲基化以及组蛋白乙酰化等表观遗传修饰恢复机体的内稳态。

黄芪糖蛋白对佐剂性关节炎大鼠脾细胞增殖与凋亡的影响研究

目的:探讨黄芪糖蛋白(HuangQi Glycoprotein,HQGP)对佐剂性关节炎(adjuvant arthritis,AA)大鼠脾细胞增殖与凋亡的影响。方法:建立大鼠AA模型,1周后无菌取脾,制备细胞悬液,按浓度梯度给药处理,MTT法检测HQGP对体外培养的AA大鼠脾细胞增殖的影响。大鼠分组建模,1周后按浓度梯度给药治疗,3周后取各组大鼠脾组织,HE法观察各组大鼠脾组织形态学变化,TUNEL法检测大鼠脾组织原位细胞凋亡水平,免疫组织化学法检测大鼠脾组织中凋亡蛋白Bax、Bcl-2与核内转录因子Foxp3的表达水平。结果:MTT检测结果显示HQGP可显著抑制AA大鼠脾T细胞的增殖(P<0.01)。TUNEL检测结果显示HQGP显著提高AA大鼠脾组织的凋亡细胞比例,免疫组化显示HQGP可回调脾组织中Bax、Bcl-2的蛋白表达水平,上调转录因子Foxp3的表达水平。结论:HQGP主要通过抑制脾T淋巴细胞的增殖来抑制机体的细胞免疫功能,同时通过调节Bax、Bcl-2的表达水平来诱导AA大鼠脾细胞凋亡,上调Foxp3的表达以提高机体的免疫耐受水平。

黄芪糖蛋白对佐剂性关节炎大鼠外周血细胞因子及关节滑膜组织形态学的影响

目的探讨黄芪糖蛋白(HQGP)对大鼠佐剂性关节炎(adjuvant arthritis,AA)的治疗作用。方法将雄性Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、雷公藤甲素组及HQGP低、中、高剂量组。于右后足跖皮内注射弗氏完全佐剂(CFA)建立大鼠AA模型,1周后给予相应的药物干预;2周后观察致炎侧踝关节肿胀程度以及膝关节滑膜组织形态学的影响,并检测各组大鼠外周血血清细胞因子γ-干扰素(IFN-γ)的水平。结果在治疗两周后,雷公藤甲素组与HQGP中、高剂量组大鼠致炎侧踝关节肿胀以及膝关节滑膜组织增生与模型组相比均有明显改善。HQGP高剂量组大鼠外周血血清IFN-γ水平显著升高。结论HQGP在腹腔注射剂量为3.5mg/kg和7.0mg/kg时,均对AA大鼠的关节炎症有显著改善作用;高剂量HQGP对AA大鼠外周血血清IFN-γ水平有升高作用,这说明在改善AA关节炎症的同时,HQGP还可能提高AA大鼠对抗其他感染的能力。

黄芪糖蛋白对T细胞增殖与活化的影响

目的:探讨黄芪糖蛋白对大鼠T细胞增殖与活化的影响。方法:无菌制备大鼠脾脏悬浮细胞,分离淋巴细胞,接种后加入黄芪糖蛋白共培养,采用MTT法和流式细胞术分别检测T细胞增殖情况和T细胞亚群分布。结果:MTT实验结果显示黄芪糖蛋白显著抑制了T细胞的增殖(P<0.05或P<0.01)。流式检测结果显示黄芪糖蛋白显著降低了T细胞中CD3+CD28+、CD3+CD278+细胞的比例(P<0.01)。结论:黄芪糖蛋白可有效抑制T细胞的增殖与活化,且主要通过抑制CD278在T细胞表面表达来阻止T细胞的活化。

丹皮酚对人类风湿关节炎滑膜成纤维细胞增殖与凋亡的影响

目的:探讨中药单体丹皮酚对人类风湿关节炎滑膜成纤维细胞体外增殖与凋亡的影响。方法:以人类风湿关节炎滑膜成纤维细胞株MH7A作为研究材料,采用MTT法检测丹皮酚对MH7A细胞体外增殖的影响,采用流式细胞术检测丹皮酚对MH7A细胞凋亡的影响,采用qRT-PCR检测丹皮酚处理后对Ki-67、Caspase-3的mRNA水平,采用Western blot检测丹皮酚处理后Ki-67、Caspase-3的蛋白水平。结果:丹皮酚对MH7A细胞体外增殖有显著抑制作用,且抑制率与剂量和作用时长呈正相关。各剂量丹皮酚处理72 h后MH7A的凋亡水平显著上升,且Ki-67的表达水平显著降低,Caspase-3的表达水平显著升高。结论:丹皮酚可通过降低Ki-67表达,抑制MH7A增殖;通过促进Caspase-3表达,诱导MH7A凋亡。

丹参酮ⅡA抗乳腺癌细胞增殖的环氧合酶-2通路研究

目的探讨中药小分子单体化合物丹参酮ⅡA对乳腺癌细胞增殖及环氧合酶-2表达的影响。方法以3种乳腺癌细胞系T47D、MCF-7、MDA-MB-231作为研究材料,采用MTT法检测不同浓度与不同作用时长下丹参酮ⅡA对3种细胞增殖的影响;采用Westernblot法检测经丹参酮ⅡA处理48 h后3种细胞中环氧合酶-2的蛋白水平;分别用带有荧光素酶标记的环氧合酶-2的启动子质粒及其转录因子核因子-κB、激活蛋白-1的位点质粒转染3种细胞,采用双荧光素酶报告基因检测系统检测经丹参酮ⅡA处理48 h后3种细胞中环氧合酶-2的转录水平以及转录因子核因子-κB、激活蛋白-1的活性。结果 MTT实验结果显示丹参酮ⅡA可抑制乳腺癌细胞系T47D、MCF-7、MDAMB-231的增殖,且抑制率与其浓度和作用时长呈正相关。Westernblot检测结果显示经丹参酮ⅡA处理48 h后,3种细胞中环氧合酶-2的蛋白水平均显著降低。荧光素酶检测结果显示经丹参酮ⅡA处理48 h后,T47D和MCF-7细胞中环氧合酶-2的转录水平显著降低(P均<0.05),同时3种细胞中激活蛋白-1的活性均显著降低(P均<0.05),核因子-κB的活性仅在T47D和MCF-7细胞中明显降低(P均<0.05)。结论丹参酮ⅡA可通过抑制转录因子核因子-κB、激活蛋白-1的活性,进而抑制环氧合酶-2的表达,从而抑制乳腺癌细胞的增殖。

基于翻转课堂教学模式的医学生物学课程改革初探

将翻转课堂教学模式引入医学生物学教学实践中,以增强教学效果为目的,让学生有更多的时间进行个性化的自主学习,让教师从单一讲授者的角色向指导者、讨论对象、裁判、观众等多角色转变。文章总结了在医学生物学教学中进行翻转课堂教学模式实践与优化的几点经验与体会,提高了教学质量。

从心肾表观遗传修饰探讨交泰丸干预失眠动物模型的作用机制研究

目的从心脏和肾脏DNA甲基化和组蛋白乙酰化修饰探讨交泰丸干预失眠动物模型的机制。方法48只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组和交泰丸组,每组16只。实验第1天,模型组和交泰丸组按300 mg/kg一次性腹腔注射氯苯丙氨酸(PCPA)建立失眠模型,正常组一次性腹腔注射等体积生理盐水。实验第3天,交泰丸组灌胃交泰丸水提液5 g/kg,1次/d,连续3 d,正常组和模型组灌胃等体积生理盐水。ELISA法检测心脏和肾脏表观遗传修饰主要酶DNA甲基转移酶1(DNMT1)、组蛋白去乙酰化酶(HDAC)活性及乙酰化组蛋白H3(Acetyl-Histone H3)水平,比色法检测心脏和肾脏DNA甲基化水平。结果PCPA致失眠大鼠心脏DNMT1、HDAC活性、DNA甲基化水平显著上升,肾脏DNMT1活性、HDAC活性、DNA甲基化水平显著下降,心脏Acetyl-Histone H3水平显著下降,肾脏Acetyl-Histone H3水平显著上升。交泰丸干预可显著降低失眠大鼠心脏DNMT1、HDAC活性和DNA甲基化水平,显著上调肾脏DNMT1活性和DNA甲基化水平,显著下调肾脏Acetyl-Histone H3水平。结论交泰丸干预可调节失眠大鼠心脏和肾脏的DNA甲基化和组蛋白乙酰化修饰水平,从表观遗传学角度看,心肾不交可能与心脏的DNA甲基化、组蛋白去乙酰化以及肾脏的DNA去甲基化、组蛋白乙酰化的两极发展有关。

丹皮酚抑制SiHa细胞增殖及COX-2转录的实验研究

目的:探讨丹皮酚对Si Ha细胞增殖及COX-2转录的影响。方法:以人宫颈鳞癌Si Ha细胞系作为体外模型,MTT法检测丹皮酚对Si Ha细胞增殖的影响。用COX-2启动子质粒和AP-1结合位点质粒转染Si Ha细胞,采用双荧光素酶报告基因检测系统检测COX-2的转录水平和AP-1的活性。结果:MTT实验结果显示丹皮酚显著抑制Si Ha细胞的增殖(P<0.01),且与丹皮酚剂量及干预时间呈正相关。荧光素酶检测结果显示丹皮酚显著降低Si Ha细胞COX-2的转录水平(P<0.01),同时显著抑制AP-1的活性。结论:丹皮酚可通过抑制转录因子AP-1的活性,进而抑制COX-2的转录,从而抑制Si Ha细胞的增殖。

黄芪糖蛋白对佐剂性关节炎大鼠T细胞增殖与活化的影响

目的探讨黄芪糖蛋白对佐剂性关节炎大鼠T细胞增殖与活化的影响。方法大鼠分组建模,一周后给药治疗,三周后取材,采用MTT法、流式细胞术和ELISA法分别检测各组大鼠脾T细胞增殖、外周血T细胞亚群与外周血细胞因子IL-2的水平。结果 MTT实验结果显示黄芪糖蛋白可显著抑制佐剂性关节炎大鼠脾T细胞的增殖(P<0.01)。流式检测结果显示黄芪糖蛋白可显著降低佐剂性关节炎大鼠外周血中CD3+CD28+、CD3+CD278+细胞的比例(P<0.05、P<0.01)。ELISA分析结果显示黄芪糖蛋白可显著降低佐剂性关节炎大鼠外周血IL-2的水平(P<0.01)。结论黄芪糖蛋白可有效抑制佐剂性关节炎大鼠脾T细胞的增殖与活化,在体内主要通过有效抑制T细胞的活化及其功能,对机体的细胞免疫功能起到抑制的作用。

中西医结合专业医学遗传学LBL-PBL双模教学法探索

医学遗传学是一门连接基础与临床的桥梁学科,其理论知识是医学生理解医学问题必不可少的理论基础,其实践方法是医学生进行医学实践不可或缺的技术手段。为了使七年制中西医结合专业学生在有限的课堂教学中能更好地接受和掌握医学遗传学的核心内容,将传统的课堂讲授和以遗传病案例为核心的教学相互结合,取得了较好的效果。

黄芪糖蛋白对佐剂性关节炎大鼠Foxp3表达的影响

目的探讨黄芪糖蛋白对佐剂性关节炎大鼠外周血及脾组织中Foxp3表达的影响。方法大鼠分组建模,1周后给药治疗,3周后取材,采用流式细胞术和免疫组化法分别检测各组大鼠外周血淋巴细胞亚群与脾组织中Foxp3的表达水平。结果流式检测结果显示黄芪糖蛋白可显著增加佐剂性关节炎大鼠外周血淋巴细胞中CD4+CD25+Foxp3+细胞的比例(P<0.01),免疫组化分析结果显示黄芪糖蛋白可显著提高佐剂性关节炎大鼠脾组织中Foxp3的表达水平(P<0.01)。结论黄芪糖蛋白在体内可通过提高Foxp3的表达水平来增强机体的免疫耐受。

中医院校实验动物学课程特色性建设探讨

随着生物医学的不断发展,实验动物在医学教育与科研实践中的重要性越来越突出。在医学院校,实验动物学早已成为基础医学教育中必不可少的环节之一,为医学生尤其是研究生进行科研活动提供了有效的理论和技能的教育。在中医院校,实验动物学课程的设置应更符合专业特点和满足专业需要。文章针对如何有效进行具有中医特色的实验动物学课程建设进行了探讨,为实际课程改革工作提供了指导性意见。

医学院校实验动物学课程思政建设探析

实验动物学是一门医学基础学科,一方面为医学生奠定医学基本理论及实践方法的必要基础,另一方面也与较多的社会问题密切相关,容易引起学生对于现实世界的困惑。在课程思政建设的背景下,利用实验动物学课堂教学主渠道,将思想政治教育与课程内容相结合,充分发挥二者的协同育人作用,让学生在获得专业知识的同时,更能从日常生活中发现问题、解决问题,从而获得价值观念及能力层面的双重提升,成为具有科学精神和人文情怀的高素质新型人才。

中医学专业生理学课程形成性评价体系的构建研究

生理教学评价改革是生理教学改革中的重要部分。回顾了形成性评价的原理及主要方法学,分析了我校中医学专业生理学教学评价中存在的问题,提出了构建科学、客观、有效的评价体系的几点建议与原则,以期真正实现以评促教的教学改革目标。

PBL教学法在医学遗传学教学中的实践与优化

PBL教学法的核心是以问题为导向和以学生为中心。本研究将PBL教学法应用到医学遗传学的教学实践中,经过两个教学周期的实践与优化,有效激发了学生的学习兴趣,提高了学生的学习积极性,增强了教师间的合作,使教师与学生都有收获。

黄芪糖蛋白对T细胞增殖与共刺激分子表达的影响

目的:探讨黄芪糖蛋白对T细胞增殖与共刺激分子表达的影响。方法:无菌制备大鼠脾脏悬浮细胞,分离淋巴细胞,接种后加入黄芪糖蛋白共培养,采用MTT法检测淋巴细胞的增殖情况,采用流式细胞术检测淋巴细胞亚群分布。结果:MTT实验结果显示黄芪糖蛋白可显著抑制Con A刺激下淋巴细胞的增殖(P<0.05或P<0.01)。流式检测结果显示中、高剂量黄芪糖蛋白可显著降低淋巴细胞中CD3+CD54+细胞的比例(P<0.01),对CD3+CD28+细胞的比例无明显影响。结论:黄芪糖蛋白可有效抑制T细胞的增殖,同时可通过降低T细胞表面共刺激分子细胞间黏附分子-1的表达抑制T细胞的活化。

医学遗传学PBL-LBL双模教学法研究

医学遗传学作为一门医学基础学科,其理论知识是医学生理解医学问题所不可或缺的;作为与临床密切联系的桥梁学科,其实践方法更是医学生进行医学实践必不可少的技术手段。为了使医学生在有限的课堂教学中能更好地接受和掌握医学遗传学的核心内容,并与临床实践密切联系,将传统的课堂讲授和以遗传病案例为核心的教学相互结合是有效的教学法之一。

黄芪糖蛋白对胶原诱导性关节炎小鼠Th17/Treg细胞免疫平衡的影响

目的研究16k D黄芪糖蛋白对胶原诱导性关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)模型小鼠Th17/Treg细胞免疫平衡的影响,探讨黄芪糖蛋白治疗胶原诱导性关节炎小鼠的免疫作用机理。方法采用雄性Balb/c小鼠建立牛Ⅱ型胶原诱导性关节炎小鼠模型,将造模成功的小鼠随机分为CIA模型组、氢化可的松阳性对照组、黄芪糖蛋白高、中、低剂量组,另设空白对照组;各治疗组腹腔注射药物14天,对照组与模型组注射等体积生理盐水。采用流式细胞术检测各组小鼠外周血CD3^+CD4^+IL-17A^+Th17细胞、CD4^+CD25^+Foxp3^+Treg细胞比例;Western blot法检测各组小鼠脾组织中维甲酸相关孤独受体γt(retinoid-related orphan receptorγt,RORγt)和叉头状转录因子3(forkhead box protein 3,Foxp3)的蛋白表达水平。结果流式检测结果显示,黄芪糖蛋白可显著降低模型组小鼠外周血中CD3^+CD4^+IL-17A^+Th17细胞比例(P<0.01),提高CD4^+CD25^+Foxp3^+Treg细胞的比例(P<0.01)。Western blot结果显示黄芪糖蛋白可显著降低模型组小鼠脾组织中RORγt的表达(P<0.01),提高Foxp3的表达(P<0.01)。结论黄芪糖蛋白提高Foxp3的表达水平,降低RORγt的表达水平,恢复Th17/Treg细胞之间的平衡,可能是黄芪糖蛋白治疗胶原诱导性关节炎小鼠的机制之一。

黄芪糖蛋白对胶原诱导性关节炎小鼠脾组织T-bet及GATA-3表达的影响

目的:探讨黄芪糖蛋白对胶原诱导性关节炎(Collagen-induced Arthritis,CIA)小鼠特异性转录因子T-bet和GATA-3表达的影响,阐述黄芪糖蛋白治疗胶原诱导性关节炎小鼠的免疫作用机制。方法:建立牛Ⅱ型胶原诱导的小鼠关节炎模型,随机分为CIA模型组、氢化可的松阳性对照组、黄芪糖蛋白低剂量组、中剂量组、高剂量组;HE染色观察CIA小鼠脾组织损伤程度;采用流式细胞术检测CIA小鼠外周血IFN-γ和IL-4的水平;Western blot法检测CIA小鼠脾组织中T-bet和GATA-3蛋白的表达。结果:与模型组比较,黄芪糖蛋白改善了CIA小鼠脾组织损伤情况,减轻炎性反应细胞浸润,下调了外周血IFN-γ和IL-4水平(P<0.05);同时,降低了T-bet和GATA-3蛋白的表达(P<0.05)。结论:黄芪糖蛋白对CIA小鼠的治疗作用,可能是与降低T-bet、GATA-3表达,调整Th1/Th2功能失衡有关。