PSD-95参与大鼠孕期铅暴露对子代海马突触影响的实验研究

目的:研究大鼠孕期铅暴露后子代海马突触变化与PSD-95表达改变的相关性,探讨铅暴露损伤学习记忆功能的机制。方法:通过饮用0.02%醋酸铅水溶液建立孕期铅暴露模型,利用原子吸收分光光度仪检测血铅,透射电镜技术检测海马突触密度,蛋白印记技术检测子代大鼠海马组织中VGLUT、VGAT和PSD-95的表达。结果:对照组和铅暴露组雄性21 d大鼠体重分别为(55.73±4.23)g和(56.01±5.97)g,无显著差异(P>0.05);对照组与铅暴露组雄性21 d大鼠血铅分别为(10.2±2.1)μg/L和(301.2±34.8)μg/L,血铅水平明显升高(P<0.01);对照组与铅暴露组雄性21 d大鼠单位面积突触数目分别为32.79±2.03和23.46±1.97,突触密度明显减少(P<0.01);铅暴露后,VGAT的表达量没有明显变化(P>0.05),VGLUT和PSD-95的表达量明显减少(P<0.01)。结论:PSD-95表达减少引起海马兴奋性突触数目的下降是发育期铅暴露损伤学习记忆功能的可能机制。

Mito-TEMPO通过减轻线粒体损伤抑制铅诱导的BV2小胶质细胞活化

目的:研究线粒体氧化应激在铅暴露诱导的小胶质细胞活化中的作用,观察靶向线粒体的抗氧化剂Mito-TEMPO的保护作用。方法:培养小鼠小胶质细胞系(BV2),建立铅暴露模型。采用噻唑蓝(MTT)比色法测定铅暴露对细胞活力的影响,采用免疫荧光染色法检测M1型活化标志物CD86蛋白的表达;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)的含量;采用线粒体超氧化物(MitoSOX)染色检测线粒体氧化应激水平;采用线粒体膜电位荧光探针(JC-1)染色检测线粒体膜电位;采用细胞能量代谢分析(O2k)检测线粒体呼吸能力。采用Mito-TEMPO抗氧化剂进行干预,研究Mito-TEMPO对BV2线粒体氧化应激、细胞活化的抑制作用。结果:与对照组相比,铅暴露组BV2细胞CD86蛋白表达水平显著升高,促炎因子IL-1β、TNF-α、IL-6水平显著升高,线粒体氧化应激水平显著升高,线粒体膜电位、呼吸能力显著降低。Mito-TEMPO处理显著减轻了BV2细胞线粒体氧化应激与功能损伤,并显著抑制了BV2细胞M1型活化水平。结论:Mito-TEMPO能够逆转铅暴露诱导的BV2细胞M1型活化,其机制可能与Mito-TEMPO减轻线粒体氧化应激与功能损伤有关。

孕期及哺乳期铅暴露对大鼠海马神经元树突棘的影响

目的:研究孕期铅暴露对子代大鼠学习记忆功能的影响及其可能的分子机制。方法:通过饮用0.02%醋酸铅水溶液建立大鼠孕期染铅模型,正常饮水为对照组,21 d新生鼠为研究对象,各组12只。检测血铅,利用Morris水迷宫分析系统检测大鼠的学习记忆能力,通过高尔基(Golgi)染色方法观察海马CA1及DG区神经元树突棘的形态和数量的变化。结果:铅暴露组P21新生鼠血铅为31.75±4.83μg/dl,显著高于对照组P21新生鼠(0.96±0.17μg/dl,P<0.01);铅暴露组子代大鼠在定位航行实验中的上台潜伏期较对照组显著延长(P<0.05),在空间探索实验中的目标象限停留时间也较对照组显著降低(P<0.01);CA1区锥体细胞和DG区颗粒细胞的树突棘以蘑菇型和细长型树突棘为主,铅暴露后树突棘主要以粗短型为主。铅暴露组子代CA1和DG去树突棘的密度显著低于对照组(P<0.01)。结论:孕期铅暴露对子代学习记忆功能的影响可能与海马区神经元树突棘的形态变化和密度降低有关。

高原低氧小鼠肠道菌群在粪菌移植过程中的特征性变化研究

目的探讨高原低氧肠道菌群在移植过程中作用持续时间和菌群的动态变化。方法①构建高原低氧模型:雄性C57BL/6J小鼠随机分为平原组(P组)和低氧组(H-4W组),每组6只。H-4W组模拟海拔4000 m暴露4周。②构建粪菌移植模型:雄性C57BL/6J小鼠随机分为对照组(Con组)、粪菌移植平原组(FMT-P组)和粪菌移植低氧组(FMT-H组),每组6只。FMT-P组和FMT-H组饮用抗生素鸡尾酒2周,粪菌移植2周,持续自由定植2周。16S rDNA检测肠道菌群变化情况。结果与P组相比,H-4W组肠道菌群Shannon指数和Simpson指数显著降低(P<0.05),alpha多样性降低;菌群组成结构改变(P<0.01)。粪菌移植后,FMT-H组相较于FMT-P组肠道菌群alpha多样性显著降低(P<0.01),致病菌拟杆菌属和Escherichia-Shigella菌属丰度增加,有益菌Lachnospiraceae_NK4A136_group菌属丰度降低;菌群定植2周后,两组间alpha多样性仍具有显著差异(P<0.01)。结论高原低氧暴露的肠道菌群在受体体内自由定植2周后仍具有效果,且肠道菌群紊乱可能与高原低氧环境中肠道炎症有关。

慢性低压低氧暴露对小鼠海马CA1区神经元树突棘形态及细丝蛋白A表达的影响

目的:探讨低压低氧暴露对小鼠海马CA1区神经元树突棘形态及细丝蛋白A表达的影响。方法:6～8周龄C57BL/6雄性小鼠分为常氧暴露7 d组、常氧暴露14 d组、低压低氧暴露7 d组和低压低氧暴露14 d组。低压低氧暴露组置于低压舱模拟6 000 m海拔高原进行低压低氧暴露。Golgi染色法观察小鼠海马CA1区树突的分支数,以及基树突棘和顶树突棘长度和密度的变化; Western blot方法检测小鼠海马细丝蛋白A表达水平的变化;免疫组织荧光染色法检测小鼠海马CA1区细丝蛋白A的表达及分布变化。结果:与常氧暴露组相比,低压低氧暴露后,小鼠海马CA1区树突分支数的差异无统计学显著性,但基树突棘和顶树突棘的长度显著增加(P <0. 05),密度显著降低(P <0. 01)。低压低氧暴露后,小鼠海马细丝蛋白A表达水平低于常氧暴露组(P <0. 01或P<0. 05)。免疫组织荧光染色显示细丝蛋白A在小鼠海马CA1区表达,低压低氧暴露后,海马CA1区细丝蛋白A表达水平降低(P <0. 05)。结论:慢性低压低氧暴露可影响小鼠海马CA1区细丝蛋白A表达,并导致海马CA1区神经元树突棘形态发生改变。

铅暴露诱导铜蓄积对小鼠神经元氧化应激的促进作用

目的:探讨铅(Pb)暴露诱导小鼠神经元铜(Cu)蓄积,促进细胞氧化应激损伤的机制。方法:C57BL/6小鼠饮用300 ppm醋酸铅水溶液2个月建立铅暴露动物模型;小鼠海马神经元细胞系HT22细胞暴露于0~100μmol/L醋酸铅24 h,采用噻唑蓝(MTT)法筛选适宜的铅作用剂量,建立铅暴露细胞模型。石墨炉原子吸收分光光度法(AAS)检测铅暴露后小鼠脑组织和HT22细胞铜水平变化;Western Blot法检测铅暴露对小鼠脑组织和HT22细胞中铜转运蛋白1(CTR1)、铜转运ATP酶α肽(ATP7A)、铜转运ATP酶β肽(ATP7B)表达水平的影响;2′,7′-二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)荧光探针法、硫代巴比妥酸比色法(TBA)分别测定铅暴露后HT22细胞内活性氧(ROS)和丙二醛(MDA)活性变化情况,并观察特异性铜螯合剂四硫代钼酸铵(TTM)的保护作用。结果:与对照组相比,铅暴露组小鼠血铜水平降低,而皮质和海马组织铜水平均显著升高(P<0.05);以5、10μmol/L铅暴露24 h后,HT22细胞的铜吸收呈剂量-依赖性增高(P<0.05)。铅暴露后小鼠脑组织和HT22细胞中CTR1蛋白水平显著增高,而ATP7A和ATP7B蛋白水平显著降低(P<0.05)。铅暴露引起HT22细胞ROS、MDA水平较对照组呈剂量-依赖性升高(P<0.05);而TTM的处理逆转了铅暴露引起的氧化应激(P<0.05)。结论:铅暴露可能通过影响神经元铜转运蛋白水平导致细胞铜蓄积,进而诱导细胞氧化应激损伤。

GABA能神经元光遗传学调控在神经精神疾病研究中的应用

光遗传学技术借助光脉冲精准调控神经元的兴奋与抑制活动,具有细胞特异性和时空精确性。本文基于光遗传学技术调控γ-氨基丁酸(GABA)能神经元,综述了在单细胞和神经环路水平,GABA能神经元参与阿尔茨海默病(AD)、癫痫、精神分裂症(SCZ)等神经精神类疾病发病机制的研究现状,对于其在今后神经精神类疾病的潜在临床应用具有重要理论和现实意义。

伍连德抗击鼠疫经验及其对当代突发传染病防治启示

伍连德是国际著名的防疫专家。在前抗生素时代,伍连德娴熟运用现代流行病学的理论和方法,控制传染源、切断传播途径、保护易感者,迅速战胜了1910年在东北暴发的鼠疫大流行。伍连德抗疫对当代突发传染病防治有重要启示,要高度重视传染病防治工作,尽早确定传染病类型,综合采用现代防疫先进举措进行抗疫,积极进行国际合作,完善疫情监测和预警,加大抗疫宣传力度,做好抗疫人员和物资储备,从而增强应对突发传染病防治能力。

脱落酸通过减轻海马突触损伤改善低氧诱导的小鼠学习记忆障碍

目的:探索脱落酸对低氧诱导小鼠学习记忆障碍及海马突触损伤的保护作用。方法:3周龄C57BL/6雄性小鼠分为对照组、低氧组、低氧+脱落酸组,通过高原环境模拟舱低氧暴露2周(氧分压为72~75 mmHg)制备小鼠学习记忆损伤模型,低氧+脱落酸组给予脱落酸饮水干预(210 mg/L)。通过Y迷宫、水迷宫和条件恐惧实验检测小鼠学习记忆能力,使用高尔基染色法观察海马神经元树突棘形态,利用透射电镜技术观察海马突触超微结构,通过Western Blot法检测N-甲基-D-天门冬氨酸受体亚型1(NMDAR1)、N-甲基-D-天门冬氨酸受体亚型2A(NMDAR2A)、突触后致密蛋白-95(PSD-95)和核Dbf2相关激酶1/2(NDR1/2)表达。结果:与对照组相比,低氧组小鼠Y迷宫实验中进入新臂探索次数及停留时间比下降(P<0.05),水迷宫实验中平台周边探索距离、穿越平台次数、目标象限停留时间减少(P<0.05),条件恐惧实验中僵直时间减少(P<0.05),海马神经元树突棘密度降低(P<0.05),突触超微结构被破坏,NMDAR1、NMDAR2A、PSD-95和NDR1/2表达下降(P<0.05)。低氧+脱落酸组小鼠学习记忆能力改善,海马神经元树突棘密度增加(P<0.05),突触结构基本恢复正常,NMDAR1、NMDAR2A、PSD-95和NDR1/2表达升高(P<0.05)。结论:脱落酸可缓解低氧导致的学习记忆障碍、海马神经元树突棘密度减少以及突触结构损伤,并上调NMDAR1、NMDAR2A、PSD-95和NDR1/2蛋白表达。

西安市大型超市销售熟肉制品微生物学污染调查

目的分析西安市大型超市销售的熟肉制品的微生物污染水平,发现食品安全隐患,确定危害因素的分布和可能来源,降低食源性疾病发生率。方法采用随机抽检方法于2013年对西安市大型超市销售的熟肉制品采样100份,其中定型包装50份,散装50份,按照国家标准进行检测和评价。结果抽检样品100份,合格65份,总合格率为65%;定型包装和散装产品的合格率分别为100%和30%,差异有统计学意义(χ2=53.85,P<0.05)。结论西安市大型超市销售的散装熟肉制品被微生物污染比较严重,卫生质量不容乐观。

军队卫生学任职教育思考与对策分析

为适应新形势下军队院校备战打赢的教育总要求,本文通过分析当前军队卫生学任职教育存在的主要问题和原因,结合外军任职培训教育的经验和做法,提出了加强军队卫生学任职教育的总体思想;并结合军医大学任职教育现状和实际,从师资队伍、课程建设、信息化建设、教学方法和考核模式等方面进行了针对性的对策分析,以期为更好地开展军队卫生学任职教育提供指导和帮助。