载银珊瑚羟基磷灰石的生物相容性评价

目的评价负载8×10-5 mol/L银离子后珊瑚羟基磷灰石(CHA)的生物相容性。方法采用珊瑚羟基磷灰石材料与AgNO3及NaCl复合,经真空冷冻干燥后制备成8×10-5 mol/L Ag+浓度的载银珊瑚羟基磷灰石(Ag-CHA),并对健康成年昆明小白鼠、新西兰大白兔、白化豚鼠进行了全身急性毒性实验、热原实验、溶血实验和致敏实验。结果全身急性毒性实验中,负载8×10-5 mol/L银离子的Ag-CHA材料对小鼠无全身急性毒性作用,72 h内小鼠无毒性表现,体重无下降;热原实验中,家兔体温升高数最高分别为0.2、0.2、0.4℃,材料无热原反应;材料的急性溶血率为0.64%,无溶血作用;致敏实验中,实验组豚鼠皮肤无红斑无水肿。结论载银浓度为8×10-5 mol/L的Ag-CHA有良好的生物相容性,无全身急性毒性作用和溶血作用,无热原和致敏原。

一种体外分析亚洲玉米螟幼虫血细胞包囊的改进方法

包囊反应是昆虫清除侵入体内的外源物如病原物和寄生生物的一种非常重要的细胞免疫反应。由于受到不便于观察、操作复杂等问题的限制,很多包囊分析实验无法或难于在昆虫体内完成。体外包囊方法在一定程度上解决了这些问题。目前常用的体外包囊是在96孔板中加入昆虫血细胞和外源物,如凝胶珠进行培养观察,但这种方法存在着一些明显的缺陷。本文以亚洲玉米螟(Ostrinia furnacalis)幼虫血细胞为研究对象,使用0.2mL的离心管(Eppendorf tube)代替96孔板,并将其固定在匀速旋转的载体上培养,极大程度的模拟了反应物在昆虫体内的状态。结果表明,改进方法后昆虫血细胞的体外包囊效果得到明显提高,且血细胞的状态也得到明显改善;而添加抗凝剂会减弱血细胞对外源物的包囊能力。

数字化载银羟基磷灰石人工骨抗菌性及生物相容性

背景:载银珊瑚羟基磷灰石作为一种新型抗菌植骨材料,受到越来越多的关注,作为植入物需与人体具有良好的生物相容性。目的:观察数字化载银珊瑚羟基磷灰石人工骨材料的抗菌性及生物相容性。方法:将珊瑚羟基磷灰石粉末浸泡于不同浓度的硝酸银溶液,制备出不同含银量的载银羟基磷灰石,再将其与聚乳酸混合,并通过选择性激光烧结快速成形制备出具有特殊形状的数字化载银抗菌人工骨材料。结果与结论:连续光源原子吸收光谱仪测定珊瑚羟基磷灰石浸泡于10-2,10-3,10-4,10-5mol/LAgNO3中制备的载银人工骨中Ag+的含量分别为2.31×10-1%,3.18×10-2%,6.75×10-3%,6.05×10-4%。体外抑菌圈实验表明浸泡10-2mol/LAgNO3中制备的载银人工骨材料对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑菌圈直径分别为(13.00±1.52)mm及(12.30±1.65)mm;浸泡10-3mol/LAgNO3中制备的载银人工骨材料分别为(11.50±0.73)mm及(11.00±0.46)mm。浸泡10-4,10-5mol/LAgNO3载银人工骨材料对两种细菌均无抑菌圈产生。细胞毒性试验结果表明100%浸泡10-2,10-3,10-4,10-5mol/LAgNO3的载银珊瑚羟基磷灰石人工骨材料的细胞毒性分别为3级、1级、0级、0级。急性全身毒性试验表明浸泡10-3mol/LAgNO3中的人工骨浸提液对小鼠无明显的急性毒性反应,具有良好的安全性。结果表明浸泡10-3mol/LAgNO3中的载银珊瑚羟基磷灰石人工骨在体外对金黄色葡萄球菌及大肠杆菌有明显抗菌作用,且具有良好的生物相容性及安全性。

高精度快速成型模型的制作精度及其体外细胞毒性

背景:快速成型技术在手术模拟与组织工程研究的应用日益广泛,而现场手术模拟和术前指导对模型的精度要求非常高,且在术中使用模型应要求其对人体无毒性。目的:评估不同后处理方法快速成型模型的成型精度及其细胞毒性。方法:采用选择性激光烧结技术制作标准圆柱体样品模型,并经浸蜡或树脂处理后,测量模型的高度和底面直径,评估其成型精度。然后采用噻唑蓝法研究不同后处理的模型件对小鼠成纤维细胞L929和小鼠前成骨细胞MC3T3-E1的毒性作用。实验分为石蜡处理组、树脂处理组、阴性对照组(未处理模型)、空白对照组(新鲜培养基)及阳性对照组(体积分数5%的DMSO),培养2d后,490nm处测量吸光度,并计算其相对增殖率和评价细胞毒性等级。结果与结论:浸蜡、树脂处理后的模型以及模型原件的精度为95%～97%,误差为0.5～1mm。模型浸提液培养L929和MC3T3-E1细胞2d后,各实验组的细胞相对增殖率均大于80%,石蜡处理后的快速成型模型对L929和MC3T3-E1有较低的毒性作用,而树脂处理和未处理的模型对这两种细胞均无毒性作用,细胞毒性均为0～1级。

不同浓度硝酸银负载珊瑚羟基磷灰石的细胞毒性实验

背景:硝酸银负载珊瑚羟基磷灰石是一种具有抗菌性能的新型植骨材料,在国外已有大量的研究报道,但国内对其研究仅处于起步阶段。目的:制备载银珊瑚羟基磷灰石人工骨材料并观察其对L929细胞的毒性特征。设计、时间及地点:细胞学体外对比观察实验,于2008-10/11在解放军广州军区广州总医院中心实验室完成。材料:将自制的珊瑚羟基磷灰石浸泡于1×10-2,1×10-3,5×10-4,1×10-4,5×10-5,1×10-5mol/L硝酸银溶液中制得不同浓度的载银人工骨材料。按1.25cm2材料表面积/1mL培养基比例加入培养基,37℃下浸提24h。方法:将材料浸提培养基与L929细胞共培养48h,运用MTT法测得细胞相对增殖度,用倒置相差显微镜观察细胞形态,结合中华人民共和国国家标准:GB/T16175-2008中的相关标准进行分析。主要观察指标:L929细胞在不同材料上的增殖情况及细胞的形态学变化。结果:MTT法检测结果表明硝酸银浓度≤5×10-5mol/L时,材料对L929细胞生长无明显抑制作用;材料浸提液即使在高浸提比100%下,浸提产物也无细胞毒性作用。镜下观察发现5×10-5mol/L组及1×10-5mol/L组细胞形态正常,贴壁生长良好。结论:低浓度的载银珊瑚羟基磷灰石对体外培养的L929细胞的增殖、生长无明显毒性作用。

男性后尿道狭窄数字化三维重建的初步研究

目的探讨基于CT扫描图像建立的精确后尿道狭窄数字化模型,在临床诊断及治疗中的应用。方法选择1例后尿道狭窄病例,进行尿道CT连续断层扫描,扫描结果导入Mimics软件中进行三维重建,利用三维重建模型指导临床。结果建立后尿道狭窄及周围结构的三维立体模型,可以方便地从任意角度和方向观察后尿道狭窄情况,测量有关的数据;还可以在数字化模型上进行手术设计。结论后尿道狭窄的数字化三维模型能够更直观、准确地反映病变部位的三维立体结构。对男性后尿道狭窄的诊断、手术规划等有较大帮助。

Triton X-100、环氧氯丙烷联合改性处理牛颈静脉带瓣管道的体内外生物相容性研究

目的评价Triton X-100、环氧氯丙烷联合改性处理戊二醛固定的牛颈静脉带瓣管道的体内外生物相容性。方法取新鲜牛颈静脉,热缺血时间在2 h以内,依次经戊二醛、Triton X-100、环氧氯丙烷交联处理,制备出新型抗钙化牛颈静脉带瓣管道(EC+Tr组);以单纯戊二醛处理的牛颈静脉为对照(GA组),参照国家植入材料的检验标准,采用处理后牛颈静脉材料浸提液进行溶血试验、皮内注射刺激试验、急性全身毒性试验和细胞毒性试验。结果溶血试验中,EC+Tr组溶血率为2.6%,小于GA组3.7%的溶血率(P<0.05),符合国家标准(<5%);皮内刺激试验中,EC+Tr组PI(I原发性刺激指数)为0.5,小于GA组的0.87,提示对受试动物皮肤刺激轻微;急性全身毒性试验中,受试动物均未出现毒性症状;细胞毒性试验中,EC+Tr组培养的L-929小鼠成纤维细胞经100%浓度材料浸提液处理后形态良好,增殖率达87.55%,毒性评级为1级(合格),优于GA组结果(增值率为69.47%,毒性评级为2级,P<0.05)。结论 Triton X-100、环氧氯丙烷联合改性处理戊二醛固定的牛颈静脉带瓣管道符合国家标准,具有良好的生物相容性,为进一步临床应用提供了理论依据。

基于CT图像建立的小儿枢椎齿状突病理性骨折三维数字化模型

背景:在进行寰枢椎椎弓根内固定过程中,由于儿童的骨骼局部解剖结构复杂及椎弓根结构常存在变异,且置钉时极易损伤椎动脉或脊髓,导致严重后果。目的:基于CT扫描图像建立精确的小儿枢椎齿状突病理性骨折数字化模型,评估其在临床诊断及内固定治疗中的应用效果。方法:将1例2岁枢椎齿状突病变患儿的CT扫描结果导入三维建模Simpleware软件中进行三维重建,用逆向工程与快速成型原理制作个体化的骨骼模型实物并经树脂后处理,利用该模型指导内固定治疗。结果与结论:成功建立了小儿寰枢椎及齿状突的三维立体模型,可直接观察病变部位,精确测量置钉入点、角度及其他数据,对内固定方案设计起到了良好的指导作用,从而提高了寰枢椎椎弓根内固定治疗的安全性和准确性。

Hsa-miR-133b影响人乳腺癌MCF-7细胞增殖及FSCN1蛋白表达的研究

目的:研究Has-miR-133b真核表达载体在人乳腺癌MCF-7细胞中的表达及对细胞增殖和对靶蛋白FSCN1表达的影响。方法:构建pEZX MR04-133b真核表达载体,瞬时转染乳腺癌MCF-7细胞,RT-PCR法检测miRNA-133b在转录水平的表达,MTT检测其对细胞增殖的影响。利用生物信息学的方法,根据Tarbase数据库预测miR-133b的靶基因,并进行基因功能初步分析。Western blot检测miR-133b对细胞中FSCN1蛋白表达情况的影响。结果:真核表达载体pEZX MR04-133b成功转染MCF-7细胞,并经RT-PCR检测可有效表达,MTT结果显示miR-133b能明显降低MCF-7细胞的相对增殖率。Western blot结果显示FSCN1为miR-133b在MCF-7细胞中的作用靶点之一。结论:构建了真核表达载体pEZX MR04-133b,转染乳腺癌MCF-7细胞后能有效表达,并以FSCN1基因作为作用靶点。

重组质粒pEGFP-ING4的构建及其对MCF-7细胞凋亡的影响

目的检测ING4(inhibitor of growth 4)对MCF-7细胞凋亡的影响。方法从人胎盘总RNA中克隆人ING4基因,构建其真核表达质粒pEGFP-ING4转染MCF-7细胞表达ING4后,流式细胞仪检测细胞凋亡率;荧光定量RT-PCR检测ING4、NF-κB、caspase-3、IL-8、Bcl-2及Bax基因的表达。结果构建的重组质粒转染可见目的蛋白融合表达,与对照相比MCF-7细胞凋亡率增高;ING4、caspase-3及IL-8基因的表达上调,NF-κB与Bcl-2/Bax基因的表达下调。结论成功从人胎盘组织克隆了ING4基因并构建其真核表达质粒在人MCF-7细胞中表达;ING4在人MCF-7细胞中能引起凋亡相关基因的改变并促进MCF-7细胞的凋亡,这为进一步研究ING4的抗肿瘤机制奠定了基础。

对本院血库初次献血员血标本甲、乙、丙肝标记物的监测

输血是甲、乙、丙三型肝炎病霉传播的主要途径之一。为了避免和减少输血后感染二型肝炎,保证血液用于临床和治疗安全,在采血前应对其进行严格的筛选。我科从1993-09-01～1993-11-25对1052名初次献血员进行了甲、乙、丙肝标志物监测,结果报告如下。 1 材料和方法:①对象:齐齐哈尔市工厂职工、家属、待业青年及附近各县的农民。其中男691人,女361人,年龄18-54岁,无肝炎既往病史和现病史,一般体格检查合格。

地衣芽孢杆菌20386株特性及其生态制剂的研究

作者在1986年从1例正常待产妇女的阴道中,分离出1株革兰氏阳性需氧地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)BL_(20386)株。该株体外试验(In Vitro Test)对金葡萄和白念珠菌具有明显的拮抗作用;体内试验(In vivo Test)表明具有调整肠道菌群和治疗作用。对BL_(20386)株的生物特性、生物毒性、生物拮抗、生物耗氧研究显示了安全、有效的指征,符合生态制剂生产用菌株。用该菌株制备的生态制剂—整肠生, 治疗婴幼儿感染性腹泻和非感染性腹泻治愈率分别为70％和85％;成年人细菌感染性腹泻3天治愈率为50％,5天为81％,7天为96.2％。整肠生具有治疗和预防肠道疾病的前景。

应用地衣芽胞杆菌调治肠道菌群失调的研究

报道1株从正常待产妇阴道分离培养的地衣芽胞杆菌的生物学特性,并经系统鉴定和生物毒性检测。观察了该菌与葡萄球菌、白色念珠菌、大肠菌等定量混合培养的体外抑菌作用及用该菌制成的生态制剂对雏鸡白痢的实验治疗和临床抢救重症肠菌群微生态失调的效果和机理。

表皮生长因子受体在胶质母细胞瘤中的表达及其与患者预后的关系

目的通过分析癌症基因组图谱(the Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库中的胶质母细胞瘤(glioblastoma multiforme,GBM)患者的测序数据以及本院GBM患者临床样本,评估GBM中表皮生长因子(epidermal growth factor receptor,EGFR)的mRNA表达情况及其与患者预后的关系。方法分析TCGA数据库中520例GBM患者的测序及临床数据,然后通过实时定量PCR(real-time polymerase chain reaction,RT-PCR)在本院42例GBM样本、2例Ⅰ级胶质瘤和4例对照脑组织样本中进行验证。结果 TCGA数据库数据分析发现mRNA高表达组中有大量错义突变,本院临床样本胶质母细胞瘤中EGFR的mRNA表达水平明显升高。Kaplan-Meier生存曲线分析结果表明,TCGA数据库中EGFR高表达组的GBM患者的总体生存期显著低于非EGFR高表达组(P=0.003 64),而无进展生存期差异无统计学意义(P=0.163)。本院患者中这两组的总体生存期差异无统计学意义。结论 EGFR可能作为一种GBM患者预后的潜在预测因子,对胶质瘤的诊断和治疗起到关键性作用。

血库初次献血员血标本甲、乙、丙肝炎标志物检测结果(摘要)

自1993年9月1日起对齐齐哈尔地区初次献血员1052名进行了甲、乙、丙肝炎标志物检测。结果表明:①甲肝 IgM 阳性22名,阳性率2%。②乙肝5项中.H砚Ag、H砚Ag、杭一H刃比3项阳性者12名 (1 .1%),H琢Ag、抗一HBe、抗一HBc3项阳性者19名 (1.8%),HBsAg、抗一HBCZ项阳性者83名(7.9%).

地衣芽孢杆菌活菌制剂治疗肠源性腹泻106例疗效观察

地衣芽孢杆菌是我院检验科从一名正常待产妇阴道分离出的。经中国科学院微生物研究所鉴定为地衣芽孢杆菌,生物毒性极低,经自愿服用对人体无害。通过两年观察,治疗106例肠源性腹泻。其中霉菌性肠炎11例,三天治愈45.4％,五天治愈率81.6％,七天治愈率100％。肝炎、肝硬化腹泻63例,三天治愈率47.6％,五天治愈率83.6％,七天治愈率96.8％。急性菌痢32例,三天治愈率40.6％,

地衣芽孢杆菌阴道栓的试制与临床应用

地衣芽孢杆菌存在于女性阴道内,是人体的一种正常非致病菌。该栓剂使用的菌株由我院检验科从一名正常待产妇女阴道拭子分离出来,并经中科院微生物研究所鉴定为地衣芽孢杆菌,经急性毒性试验,亚急性毒性试验,证实其毒性极低。

从脑脊液中分离出一株高里氏念珠菌

1 病例报告患儿女,5岁.因发热、咳嗽15天,头痛、呕吐3天于1995-04-06入我院.发病后曾在当地医院接受青霉素每日360万U,地塞米松5mg治疗7天.体温降至正常,咳嗽减轻,为巩固疗效,继续使用上述药物.入院前3天又出现发热,伴头痛、呕吐,治疗无效来我院.查体:浅昏迷、体温38.6℃、颈强（++）,克氏征（+）、四肢肌力5级.初步诊断真菌性脑膜炎.腰穿脑压2.06kPa（21cmH2O）,微浊,球蛋白定性试验（+）,糖。

载银珊瑚羟基磷灰石的抑菌活性与细胞毒性研究

目的 评价负载不同浓度银离子后的珊瑚羟基磷灰石（CHA）对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌效果与细胞毒性.方法 采用真空冷冻干燥法制备1×10^-2～1×10^-5 mol/L Ag＋浓度的载银CHA（Ag-CHA）,然后采用琼脂平板抑菌法评价Ag-CHA对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌效果,并测量24 h后的抑菌圈直径.采用甲基噻唑基四唑（MTT）法评价8×10^-5mol/L的Ag-CHA在2、4、7d对L929小鼠成纤维细胞的毒性作用. 结果 载银浓度为1×10^-2～8×10^-5mol/L的Ag-CHA对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径均大于12 mm,有明显的抑菌作用;而载银浓度低于8×10^-5mol/L的Ag-CHA无抑菌作用.载银浓度低于8×10^-5mol/L的Ag-CHA对L929细胞无毒性作用;8×10^-5mol/LAg-CHA浸提液作用细胞2、4、7 d后,细胞生长状态良好,相对增殖率均大于90%,毒性等级为0或1级.结论 最佳载银浓度为8×10^-5mol/L,该条件下的Ag-CHA有良好的抑菌作用,且无细胞毒性.

Cu型医用抗菌不锈钢在大鼠体内抗细菌感染研究

目的:比较普通304医用不锈钢和304-Cu型医用抗菌不锈钢的体内抗细菌感染性能。方法:将两种不锈钢片涂布浓度为1×107cfu/mL的金黄色葡萄球菌培养24 h,植入SD大鼠胫腓骨肌袋内,继续饲养并在术前及术后第1、4、7、14天进行大体观察、植入部位细菌培养、白细胞计数、组织学观察等检测。结果:普通304不锈钢组术后中度化脓,检测到较多细菌,白细胞增多且有大量的炎症细胞出现;而304-Cu型抗菌不锈钢术后只有轻微化脓,检测到的细菌较少,白细胞数稍有增多但无统计学差异,炎症细胞少,感染程度轻。结论:与医用304不锈钢相比,304-Cu型抗菌不锈钢有较好的抗细菌性能,有一定的抗感染作用。