八肽胆囊收缩素对TNF-α诱导的大鼠滑膜细胞株RSC-364 IL-6的作用及其可能的分子机制(英文)

目的:观察硫酸化八肽胆囊收缩素(sCCK -8)对TNF-α诱导大鼠滑膜细胞株RSC -364 IL-6mRNA表达及核因子NF-κB的影响及其可能的受体机制。方法:大鼠滑膜细胞株RSC -364经TNF-α(10μg/L)、sCCK-8(10-8-10-6mol/L)、CCK受体拮抗剂丙谷胺(2 mg/L)及溶剂单独或联合孵育3 h,用RT-PCR检测细胞IL-6、CCK-AR及CCK-BR mRNA的表达,孵育1 h,用电泳迁移率检测NF-κB活性,孵育30min,用Western blot-ting检测胞浆IκB蛋白表达。结果:RSC -364细胞固有表达CCK-A/B受体,sCCK-8(10-8-10-6mol/L)使IL-6、CCK-AR和CCK-BR mRNA表达进一步增高,明显增加TNF-α诱导的NF-κB活性,降低胞浆中IκB蛋白水平,并可被丙谷胺所拮抗。结论:sCCK-8通过NF-κB途径上调TNF-α诱导的大鼠滑膜细胞IL-6 mRNA表达,此作用可能通过滑膜细胞上的CCK受体实现,提示CCK-8在类风湿性关节炎(RA)发病过程中可能具有调控作用。

罗格列酮对高糖诱导大鼠血管平滑肌细胞炎症和增殖的影响

目的探讨罗格列酮(RSG)对高浓度葡萄糖孵育下的血管平滑肌细胞(VSMCs)炎症和凋亡的影响及其可能的分子机制。方法以不同浓度的葡萄糖和罗格列酮单独或联合孵育大鼠胸主动脉平滑肌细胞,ELISA方法检测培养基中单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的水平;采用流式细胞术检测VSMCs细胞凋亡率及Bcl-xl、Bcl-2蛋白表达;Western印迹检测胞浆中VSMCsBcl-xl蛋白表达及NF-κBp65和IκBα的表达。结果高葡萄糖浓度(11.2、22.5mmol/L)培养可明显增加上清中MCP-1的浓度,促进VSMCs增殖,抑制其凋亡,上调Bcl-xl、Bcl-2蛋白表达,同时使NF-κBp65表达增加,IκBα表达下降;30及100μmol/LRSG以浓度依赖形式减少VSMCs对MCP-1的分泌,抑制高葡萄糖培养下(11.2、22.5mmol/L)VSMCsBcl-xl、Bcl-2表达,促进其凋亡;下调NF-κBp65表达,促进IκBα表达。RSG拮抗剂GW9662(10μmol/L)预处理可部分拮抗RSG的作用。结论 RSG可能通过对NF-κB通路的调控,减少炎症因子MCP-1分泌,下调Bcl-xl、Bcl-2表达,从而抑制高糖葡萄糖培养下的VSMCs炎症反应并促进其凋亡,从而在2型糖尿病大血管病变的防治中发挥重要作用。

2型糖尿病内脂素和脂联素水平与颈动脉内膜中膜厚度的相关性

目的研究2型糖尿病患者血浆内脂素和脂联素水平的变化,并探讨其与颈动脉内膜中膜厚度的关系。方法73例2型糖尿病患者根据颈动脉超声结果分为颈动脉内膜中膜厚度增厚组37例,颈动脉内膜中膜厚度正常组36例;分别测定其血浆内脂素和脂联素,分析两者与颈动脉内膜中膜厚度变化的关系。结果2型糖尿病患者内脂素水平高于对照组,且颈动脉内膜中膜厚度增厚组高于颈动脉内膜中膜厚度正常组(P<0.01)。2型糖尿病组的脂联素水平低于对照组,且颈动脉内膜中膜厚度增厚组低于颈动脉内膜中膜厚度正常组(P<0.01)。多元逐步回归分析显示,内脂素与颈动脉内膜中膜厚度、内脏脂肪厚度、空腹胰岛素呈正相关;脂联素与颈动脉内膜中膜厚度、胰岛素抵抗指数呈负相关,与高密度脂蛋白胆固醇呈正相关。颈动脉内膜中膜厚度与内脂素、年龄、糖化血红蛋白呈正相关,与脂联素呈负相关。结论血浆内脂素增高及脂联素水平的降低可能是2型糖尿病患者合并早期动脉粥样硬化的危险因素之一。

八肽胆囊收缩素对大鼠滑膜细胞株RSC-364分泌IL-6的影响

探讨八肽胆囊收缩素 (CCK 8)对大鼠滑膜细胞株RSC 36 4分泌IL 6的调控作用。应用ELISA法观察不同浓度梯度的CCK 8对在TNF α或IL 1β诱导下的RSC 36 4分泌IL 6水平的影响。结果显示 :10 -6mol/L、10 -8mol/L浓度的CCK 8可分别促进TNF α或IL 1β诱导 2 4h后RSC 36 4细胞株分泌IL 6 ,而应用CCK受体拮抗剂丙谷胺则可明显抑制这种刺激效应。提示CCK 8可调节滑膜细胞分泌IL 6 ,在类风湿性关节炎的发病机制中可能起潜在的调控作用。

八肽胆囊收缩素对肿瘤坏死因子α诱导的大鼠滑膜细胞株RSC-364核因子κB活性变化的影响及其受体机制

目的:观察硫酸化八肽胆囊收缩素(cholecystokinin octapeptide,CCK-8)对肿瘤坏死因子α诱导大鼠滑膜细胞株RSC-364核因子κB的影响,以及CCK-A/B受体是否参与这一过程。方法:实验于2003-02/2004-02在河北医科大学法医学教研室分子生物学实验室完成。取大鼠滑膜细胞株RSC-364经肿瘤坏死因子α(10 μg/L)、sCCK-8(10-8,10-7,10-6 mol/L)、CCK受体拮抗剂丙谷胺及溶剂单独或联合应用孵育:①孵育3h,用反转录-聚合酶链反应技术检测细胞CCK-A受体及CCK-B受体mRNA的表达。②孵育1h,用电泳迁移率检测核因子κB相对活性。③孵育30 min,用Western blot检测胞浆IκB蛋白表达的相对水平。结果:①细胞CCK-A受体及CCK-B受体mRNA的表达:RSC-364细胞固有表达CCK-A/B受体,肿瘤坏死因子α(10 μg/L)可使CCK-A受体和CCK-B受体mRNA的表达分别上调148%和173%(P<0.01)。肿瘤坏死因子α和CCK-8(10-8～10-6 mol/L)联合孵育细胞,CCK-A受体和CCK-B受体mRNA表达与肿瘤坏死因子α组相比分别增高47%,56%,30%和57%,13%,24%(P<0.05,0.01)。②核因子κB相对活性:肿瘤坏死因子α组明显高于对照组(294.45±36.48,0,P<0.01);肿瘤坏死因子α+CCK-810-8,10-7,10-6 mol/L组高于肿瘤坏死因子α组(470.69±56.76,489.37±64.95,558.90±74.15,P<0.05,0.01);CCK-8的作用可被丙谷胺减弱(400.79±39.06)。③IκB蛋白表达的相对水平:肿瘤坏死因子α组明显低于对照组(139.43±30.76,220.79±34.58,P<0.01),肿瘤坏死因子α+CCK-810-8,10-7,10-6 mol/L组低于肿瘤坏死因子α组(95.26±8.54,84.15±8.77,63.28±16.13,P<0.05),并可被丙谷胺所抑制(137.22±20.33,P<0.01)。结论:CCK-8对肿瘤坏死因子α诱导的RSC-364核因子κB活性具有正向调节作用,并能降低IκBα蛋白水平,提示CCK-8在类风湿性关节炎发病过程中可能具有调控作用,此作用可能通过滑膜细胞上的CCK受体实现。

类风湿性关节炎肺间质病变发病机制的研究进展

肺间质病变 (ILD)是类风湿性关节炎 (RA)常见的关节外损害。α1 蛋白酶抑制物 (α1 Pi)和HLA基因表达改变是RA ILD的易患因素。局部免疫复合物的形成和沉积可能参与了RA ILD的肺损伤过程。肺泡巨噬细胞激活是RA ILD亚临床期肺泡炎的早期标志。肺泡中性粒细胞可能是致RA ILD的效应细胞。肺泡淋巴细胞亚群的变化是RA ILD免疫活性失衡的结果。RA ILD的机制至今未明 。

甲状腺激素与心血管疾病

甲状腺激素在心血管系统中作用广泛。甲状腺功能亢进或减退均可引起相关的心血管功能紊乱,而亚临床甲状腺疾病也与心血管疾病风险和病死率增加密切相关。

CCK-8通过调节κB活性促进大鼠滑膜细胞株RSC-364 IL-6转录

目的观察硫酸化八肽胆囊收缩素（sCCK-8）对TNF-α诱导大鼠滑膜细胞株RSC-364 IL-6基因表达的影响及核因子NF-κB活性，以探讨CCK-8对类风湿性关节炎（RA）的调控机制。方法大鼠滑膜细胞株RSC-364经TNF-α、sCCK-8、CCK受体拮抗剂丙谷胺及溶剂单独或联合应用孵育3h，用RT-PCR检测细胞IL-6 mRNA的表达。孵育1h，用电泳迁移率检测NF-κB活性，孵育30min，用Western blot检测胞浆I-κB蛋白表达。结果sCCK-8（10^-8-10^-6mol／L）明显增加TNF-α诱导的IL-6 mRNA表达及NF-αB活性，呈剂量依赖性，降低胞浆中I-κB蛋白水平，并可被丙谷胺所拮抗。结论sCCK-8在类风湿性关节炎（RA）发病过程中可能具有调控作用。

细胞凋亡与糖尿病并发症

细胞凋亡参与了胰岛素依赖型糖尿病的发生、发展。其机制包括针对胰岛β细胞的Ｔ、Ｂ淋巴细胞凋亡受阻，ＩＬ－１β、ＴＮＦ－α、ＩＦＮ－γ等细胞因子通过ＮＯ或非ＮＯ途径介导胰岛β细胞凋亡等。而糖尿病并发症的发生则与ｂｃ１－２、ｂａｘ、Ｆａｓ、Ｐａｘ－３等凋亡调节基因表达的改变密切相关，应用ＮＧＦ、ＩＧＦ－Ⅱ等神经生长因子有助于预防糖尿病并发症的发生。

细胞凋亡与糖尿病并发症的研究进展

细胞凋亡(apoptosis)是指细胞在分化和发育过程中,由基因调控而发生的主动的自发性的死亡方式。1972年,Kerr等首次提出了细胞凋亡的概念。90年代后,随着凋亡检测方法学的不断进展,人们逐渐意识到细胞凋亡与坏死(necrosis)具有本质上的差异。发生凋亡的细胞,细胞膜皱缩,染色体致密,随后断裂。进而胞膜内陷,将细胞分割包围,形成多个膜结构完整、含有染色质断片的凋亡小体(apoptotic body),最终为巨噬细胞吞噬清除。

CCK-8对TNF-α诱导大鼠RSC-364细胞MMPs/TIMP-1的影响

目的研究八肽胆囊收缩素(CCK-8)对TNF-α诱导的大鼠RSC-364细胞MMPs/TIMP-1的影响。方法采用ELISA观察TNF-α作用下CCK-8对RSC-364细胞MMP-3、-9、-1及TIMP-1分泌的影响,比较MMP-3、-9、-1和TIMP-1比值变化,用RT-PCR观察CCK-8对TNF-α作用下RSC-364细胞MMP-3、-9 mRNA表达的影响。结果静息和CCK-8单独孵育细胞后未检测到MMP-3和MMP-9,产生少量MMP-1和TIMP-1,表达MMP-3和MMP-9 mRNA甚微,CCK-8有抑制TNF-α诱导细胞MMP-3、-9、-1分泌和MMP-3、-9 mRNA表达的作用,并且降低TNF-α所致的MMPs/TIMP-1比值的上升。结论 CCK-8下调MMPs基因表达,减少MMPs分泌,使MMPs与TIMP-1比值下降,从而降低MMPs活性,表明CCK-8能调节滑膜细胞分泌功能,提示CCK-8在类风湿关节炎发病过程中可能具有调控作用。

循环运动训练对2型糖尿病妇女心肺适能及血流介导的血管舒张功能的影响

目的:研究循环运动训练对2型糖尿病妇女心肺适能及血流介导的血管舒张功能(FMD)的影响,探讨循环运动训练对2型糖尿病患者心血管功能的影响及机制。方法:8例2型糖尿病妇女进行12周的循环运动训练,采用超声技术测试受试者循环运动训练前、后的血流介导血管舒张功能,采用Astrand-Ryhnuiy列线图法间接推测受试者最大摄氧量,并对血清脂代谢指标和血清白细胞介素-6(IL-6),C-反应蛋白(CRP)的水平进行检测。同时将8例同年龄段、健康非糖尿病妇女作为正常对照组。结果:经过12周循环运动训练后,糖尿病妇女的体脂率(30.42%±1.80%vs 28.10%±1.50%)、糖化血红蛋白(7.31%±0.70%vs 6.88%±0.76%)等显著下降(P<0.05),同时,FMD(7.32%±1.29%vs 9.37%±0.89%)显著增加(P<0.05),最大摄氧量([1.73±0.22)L/min vs(2.10±0.32)L/min]显著增加(P<0.05),IL-6([0.78±0.13)ng/L vs(0.40±0.15)ng/L]、CRP([9.97±0.96)mg/L vs(7.32±1.02)mg/L]水平显著降低(P<0.05)。所有受试者的FMD增加的程度与最大摄氧量增加程度、血清IL-6和CRP降低的程度呈显著正相关。结论:循环运动训练能改善糖尿病妇女血流介导的血管舒张功能,循环运动训练改善心血管功能的机制与心肺适能的提高及炎症水平的降低有关。

2型糖尿病患者凝血功能与血管病变的相关性分析

目的探究2型糖尿病(T2DM)患者凝血功能与血管病变的关系。方法选择2014年6月至2015年8月该院收治T2DM患者78例,根据患者疾病进展情况将其分为伴有血管病变患者45例为观察组,血糖控制较好、无血管病变患者33例为对照组,测定两组患者凝血酶时间(TT)、活化部分凝血酶原时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)、纤维蛋白原(Fg)、血糖(Glu)及糖化血红蛋白(Hb A1c)水平,分析各凝血指标与血糖控制水平的相关性,采用Logistic回归分析T2DM发生血管病变的危险因素。结果研究组患者Glu、Hb A1c、Fg水平均显著高于对照组,APTT、PT水平均显著低于对照组(P<0.05);相关性分析显示,两组患者各项凝血指标与Glu和Hb A1c水平均不存在相关性(P>0.05);多因素Logistic分析结果显示高水平Hb A1c(OR=1.23,P<0.05)、Fg(OR=1.45,P<0.05)是T2DM患者血管病变的危险因素;高水平APTT(OR=0.87,P<0.05)是T2DM患者血管病变的保护因素。结论 T2DM发生血管病变患者出现凝血功能紊乱,其引起患者血管病变发生的重要因素,高水平Hb A1c、Fg及低水平APTT是T2DM患者血管病变的危险因素。

我国大陆地区甲状腺结节患病率Meta分析

目的通过Meta分析了解我国大陆地区甲状腺结节的患病率。方法检索中国知网、中国科技期刊数据库及万方数据库中关于甲状腺结节患病率的相关文献。采用Stata 12.0软件进行数据合并估算患病率,并对性别、年龄、文化程度等因素进行亚组分析。结果共纳入68个研究,研究总样本量为560 877例,甲状腺结节患者190 228例。Meta分析结果显示,我国大陆地区甲状腺结节患病率为32%[95%CI 30%~34%],其中男性患病率为26%,女性患病率为39%。结论健康体检中甲状腺结节的总检出率偏高,且随年龄增长而增加,女性高于男性。文化程度越高,甲状腺结节的患病率越高,不同省份中河北、辽宁、北京地区甲状腺结节的患病率偏高。尿碘水平较低是甲状腺结节的危险因素,肥胖、糖代谢异常也与甲状腺结节的风险增加显著相关。

溶血磷脂酸及高敏C反应蛋白与2型糖尿病下肢血管病变的相关性

目的探讨溶血磷脂酸(LPA)及高敏C反应蛋白(hs-CRP)与2型糖尿病(T2DM)下肢血管病变的关系。方法 110例T2DM患者根据有无下肢血管病变分为单纯T2DM组(A组)和T2DM并发下肢血管病变组(B组)。根据双下肢血管超声检查总分,将B组分为轻度组(B1组)、中度组(B2组)和重度组(B3组)。另选门诊健康体检者30名作为正常对照(NC组)。比较各组研究对象的LPA、血糖、血脂、hs-CRP等。结果 A和B组LPA及hs-CRP水平明显高于NC组(P<0.01);B组LPA、hs-CRP水平则明显高于A组(P<0.05)。LPA、hs-CRP水平B3组高于B1组(P<0.01),B2组高于B1组(P<0.05,P<0.01),B1、B2、B3三组与NC组比较差异显著(P<0.01)。Pearson相关分析示LPA与病程、总胆固醇(TC)、hs-CRP、下肢血管超声积分呈正相关,与年龄、体重指数(BM I)、收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、空腹血糖(FBG)、糖化血红蛋白(HbA1 c)、三酰甘油(TG)及hs-CRP无相关关系;hs-CRP与TC、TG、下肢血管超声积分呈正相关,与年龄、病程、BM I、SBP、DBP、FBG、HbA1 c无相关关系。Logistic回归分析LPA、病程及HbA1 c为糖尿病下肢血管病变的独立危险因素。结论 LPA、病程及HbA1c为糖尿病下肢血管病变的独立危险因素。

2型糖尿病大鼠心肌间质胶原代谢的变化及罗格列酮的干预研究

目的观察糖尿病(DM)大鼠心肌间质胶原含量的变化及心肌组织基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、组织抑制物-1(TIMP-1)的表达变化及罗格列酮(RSG)对上述指标的影响。方法高脂高糖饮食加小剂量链尿佐菌素腹腔注射制备2型DM大鼠模型,将大鼠分为12周对照组和DM组,24周对照组、DM组和RSG组,分别检测各组大鼠心肌组织胶原含量、MMP-2,MMP-9,TIMP-1 mRNA表达变化及MMP-2,MMP-9,TIMP-1蛋白水平的变化。结果DM大鼠心肌间质胶原含量明显增加,MMP-2的表达明显减低,MMP-9,TIMP-1的表达均明显增加,但MMP-9/TIMP-1的比值下降。RSG治疗组胶原含量明显减少,MMP-2表达明显上调,MMP-9下调,TIMP-1明显下调,MMP-9/TIMP-1增加。结论MMP-2,MMP-9及其组织抑制物-1的调节失衡参与了DM心肌间质纤维化的发生与发展,RSG治疗可以通过调节基质金属蛋白酶-2、9及其组织抑制物-1的表达变化,抑制心肌纤维化,减轻心肌损伤。

二甲双胍对2型糖尿病大鼠心肌损伤的保护作用

目的观察2型糖尿病(T2DM)大鼠心肌细胞凋亡、心肌间质胶原堆积及二甲双胍(MET)的干预作用。方法8周龄SD大鼠高热量饮食1月后,腹腔注射小剂量链脲佐菌素(STZ,30mg/kg)制备模型,成模后分别于12、24w,采用光镜、原位末端标记法、流式细胞术检测心肌细胞凋亡,采用Masson染色观察胶原堆积程度,并分别检测各组大鼠心肌组织基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、金属蛋白酶组织抑制物-1(TIMP-1)mRNA表达变化及MMP-2、MMP-9、TIMP-1蛋白水平的变化。结果成模后12、24w,T2DM组大鼠心肌凋亡细胞数明显增多,MET干预组大鼠的凋亡率降低。T2DM大鼠心肌间质胶原含量明显增加,MMP-2的表达明显减低,MMP-9、TIMP-1的表达均明显增加,但MMP-9/TIMP-1的比值下降。MET治疗组胶原含量明显减少,MMP-2表达明显上调,MMP-9和TIMP-1下调,但MMP-9/TIMP-1的比值增加。结论T2DM大鼠心肌损伤表现为心肌细胞凋亡增加和间质纤维化,MMP-2、MMP-9及TIMP-1的调节失衡参与了T2DM心肌间质纤维化的发生与发展,MET可通过抑制糖尿病大鼠心肌细胞凋亡和心肌纤维化而减轻心肌损伤。

对糖尿病合并症肝梗死的观察

肝脏血供来自于肝动脉和门静脉2套供血系统,血流丰富,故极少因局部血流阻断引起肝梗死。因而,临床医生对肝梗死的临床表现和诊治缺乏经验。糖尿病是常见的内分泌代谢病,高血糖可引起血管内皮损伤、动脉硬化、高凝状态和血流动力学异常,造成全身任何部位的缺血或梗死,如心肌梗死、脑梗死、肺栓塞等,而糖尿病合并肝梗死则罕见。本文对此病例进行了报道。