复发性外耳道错构瘤1例

1病例资料 患儿,男,1岁2月,因“发现左外耳道新生物3月”于2017年7月12日入院,3月前患儿家属发现患儿左外耳道一粉红色新生物,无耳流脓、流血等症状。1月前患儿家属感新生物稍增大,故就诊我科。查体:左外耳道口见一粉红色肉芽状新生物,质韧,表面无红肿、破溃,不能推动,皮温不高,鼓膜完整,标志清。

Survivin和CD44 V6在喉癌组织中的表达及意义

目的探讨喉癌组织中Survivin和CD44V6蛋白的表达及其与各临床病理参数的关系。方法应用免疫组织化学技术(SP法)和图像分析技术检测54例喉癌、癌旁正常组织及20例舌腭弓黏膜组织中Survivin和CD44V6蛋白表达水平,并结合临床病理特征进行分析。结果①Survivin在喉癌中66.7%(36/54)阳性表达,癌旁正常组织40.7%(22/54)阳性表达,在20例对照组(正常舌腭弓黏膜组织)中Survivin均为阴性。喉癌组、癌旁组及对照组间的阳性指数(positiveindex,PI)差别有统计学意义(P<0.01)。Survivin的PI与喉癌不同分化程度、临床分期及有、无颈淋巴结转移明显相关(P<0.01或P<0.05),与喉癌的生长位置无明显相关(P>0.05)。②CD44V6在喉癌及癌旁组阳性表达率分别为70.4%(38/54)、24.1%(13/54),对照组阳性表达率为10.0%(2/20),三组间PI的差异有统计学意义(P<0.01)。CD44V6的PI在喉癌的不同分化程度和在有、无颈淋巴结转移间的差异有统计学意义(P<0.01),而与临床分期及喉癌的生长位置无明显相关(P>0.05)。③Survivin与CD44V6的表达呈正相关(r=0.53,P<0.01)。结论①Survivin的表达上调与CD44V6的高表达可能在喉癌的癌变中起协同作用。②Survivin的存在代表着细胞生物学转化的中间环节,Survivin表达阳性提示癌变的可能。

凋亡抑制因子Livin蛋白在喉癌组织中的表达及与预后的关系

目的观察喉鳞癌组织中凋亡抑制因子Livin蛋白的表达,探讨其在喉癌发生、发展中的作用及与其预后的关系。方法采用免疫组化SP法检测117例喉鳞癌组织和20例正常舌腭弓黏膜组织中Livin蛋白的表达,结合临床及随访资料,分析其与各临床病理因素及预后的关系。结果①喉癌组织中Livin蛋白阳性表达率为61.5%(72/117),在正常对照组中Livin蛋白呈阴性表达,差别具有统计学意义(P<0.05);②Livin蛋白在喉鳞癌组织中阳性表达率与病程、临床分期及淋巴结转移有关(P<0.05),与年龄、临床分型和组织分化程度无关(P>0.05);③Cox回归模型多因素分析结果示临床分期晚、有淋巴结转移和Livin蛋白阳性表达是肿瘤复发的独立危险因素。结论 Livin蛋白可能在喉鳞癌的发生、发展中起一定作用,其阳性表达可能在一定程度上提示喉癌的预后。

Survivin在喉癌中的表达及与P53在患者预后判断上的相关性探讨

目的探讨喉癌组织中Survivin的表达与各临床病理参数、预后及与P53表达的相关性。方法应用免疫组织化学技术(S-P法)和图像分析技术检测54例喉癌、54例癌旁正常组织及 20例舌腭弓粘膜组织中Survivin和P53蛋白表达水平,并结合临床病理特征和随访资料进行分析。结果(1)Survivin的阳性表达率在喉癌组织中为66．7％(36／54),癌旁正常组40．7％(22／54)阳性表达,对照组表述均阴性。喉癌组、癌旁组及对照组间的阳性指数(positive index,PI)差异有显著意义 (P<0．01)。Survivin的PI与喉癌的分化程度、临床分期及有、无颈淋巴结转移相关(P<0．01或P <0．05),与喉癌的生长位置无相关性(P>0．05)。(2)在随访50例喉癌患者中,生存时间大于5年组较小于5年组Survivin的PI均较小,差异有显著意义(P<0．01)。(3)Survivin与P53的表达呈正相关(r=0．46,P<0．05)。结论(1)Survivin的表达上调及抑癌基因P53的突变失活可能在喉癌的癌变中起协同作用。(2)Survivin的存在代表着细胞生物学转化的中间环节,Survivin表达阳性提示癌变的可能,因而具有早期诊断价值;Survivin的表达强度与喉癌的恶性程度及发展趋势明显相关,可在一定程度上提示喉癌的预后;Survivin基因治疗具有良好的靶向性,可望成为喉癌治疗的新靶点。

锌指转录因子TWIST和Survivin在头颈鳞癌组织中的表达

目的:观察头颈部鳞癌组织中锌指转录因子TWIST及Survivin的表达,并分析其相关性,探索它们在头颈部鳞癌中表达的意义。方法:采用免疫组织化学方法检测62例头颈鳞癌(20例正常软腭黏膜组织作为正常对照组)组织中的TWIST和Survivin的表达情况。结果:TWIST在头颈部鳞癌中的表达率为69.35%,显著高于正常对照组,Survivin在头颈部鳞癌中的表达率为79.03%,显著高于正常对照组,且TWIST的表达均随鳞癌的病理分化程度降低而升高,并在有淋巴结转移组中显著高于无淋巴结转移组,和年龄、性别无关;而Survivin的表达在有淋巴结转移组中显著高于无淋巴结转移组,和年龄、性别以及病理分化程度无关。未见头颈鳞癌组织中Survivin与TWIST的表达程度有相关性。结论:TWIST和Survivin高表达与头颈鳞癌的发生发展有关,但两者之间不一定存在相关性。

高分辨率CT联合纯音测听对鼓室硬化的诊断意义

目的探讨颞骨高分辨率CT（high resolution computerized tomography,HRCT）联合纯音听力测试对鼓室硬化的诊断意义。方法对贵州医科大学附属医院2014年1月~2015年12月期间收治的慢性化脓性中耳炎干耳3个月以上,HRCT提示中耳病变患者176例（181耳）,术前分别采用单纯颞骨HRCT及颞骨HRCT联合纯音测听对鼓室硬化进行诊断,并以术中探查结果为金标准,观察二种方法诊断鼓室硬化的敏感性、特异性、阳性似然比和准确度的差异。结果①单纯颞骨HRCT诊断鼓室硬化敏感性58.55%、特异性93.10%、阳性似然比8.49、阴性似然比0.46和准确度64.09%;②颞骨HRCT联合纯音听力测试诊断鼓室硬化的敏感性为94.08%、特异性89.66%、阳性似然比9.09、阴性似然比0.01和准确度93.37%;分型诊断Ⅰ型符合率89.66%,Ⅱ型87.50%,Ⅲ型84.62%,Ⅳ型82.14%,总的分型诊断符合率为86.18%,诊断效能较单纯颞骨HRCT显著提高。结论颞骨HRCT联合纯音听力测试诊断鼓室硬化有一定价值,为可疑鼓室硬化术前制定手术方案提供依据。

载ATM反义寡核苷酸纳米粒对小鼠SCCⅦ细胞放射增敏实验研究

目的探讨纳米粒作为基因治疗载体的可行性,并研究载ATM反义寡核苷酸纳米粒抑制ATM基因表达对小鼠SCCⅦ细胞放射敏感性的影响。方法采用W/O/W双乳化溶剂蒸发法制备载ATM寡核苷酸纳米粒,并检测其理化性质;载ATM寡核苷酸纳米粒转染SCCⅦ细胞,RT-PCR检测细胞ATM mRNA表达水平;应用细胞克隆形成试验检测细胞放射敏感性,通过流式细胞学检测细胞周期分布和凋亡情况。结果制备的纳米粒呈圆形,分散性好(PDI=0.108±0.052),粒径平均值为(116±25.2)nm,包封率达(87.5±4.3)%;转染ATM反义寡核苷酸纳米粒组SCCⅦ细胞ATM mRNA表达有明显下调(P<0.05);转染ATM反义寡核苷酸纳米粒组SCCⅦ细胞放射后细胞存活能力明显低于对照组(P<0.05);流式细胞学检测结果显示转染ATM-ASODN-NP的细胞接受放射治疗后,G2期细胞比例与对照组相比有明显下降,细胞凋亡率升高(P<0.05)。结论纳米粒作为基因治疗的载体有效可行,具有较好的应用前景,ATM基因表达下调导致SCCⅦ细胞放射敏感性提高。

紫杉醇、顺铂联合化疗在晚期卵巢上皮性癌的应用

目的评价对晚期卵巢上皮性癌患者术后行紫杉醇静脉和顺铂腹腔灌注联合化疗的疗效及副反应。方法晚期卵巢上皮性癌30例行肿瘤细胞减灭术后,采用PT方案化疗,紫杉醇135mg/m2静脉滴注,顺铂60～80mg/m2腹腔灌注,21～28天1疗程,平均6～8个疗程数。结果Ⅲ期总有效率为76.92%,Ⅳ期为50.00%。结论PT方案联合化疗效果好,毒副反应轻,有助于提高患者5年生存率和生存质量。

108例鼻内镜下脑脊液鼻漏修补术的临床分析

目的：回顾性分析108例鼻内镜下脑脊液鼻漏修补术的疗效、术后并发症以及复发的高危因素。方法：回顾性分析2001年6月至2015年7月收治的脑脊液鼻漏患者108例,其中外伤性68例、自发性40例,男性61例,女性47例,年龄2～58岁,平均年龄36岁。结果：一次性修补成功101例,2例患者再次鼻内镜修补成功,失访2例,死亡1例,随访3个月～6年无复发。脑脊液鼻漏患者漏口位置主要位于筛顶和筛板（78/108）,其次位于蝶窦（18/108）,额窦后壁12例。在外伤性脑脊液鼻漏组中,术后发生脑膜炎5例,感染率为7.2%,1例患者死亡;自发性脑脊液鼻漏组中术后脑膜炎1例,感染率为2.5%;漏口位于筛顶和筛板术后感染率为1.2%;漏口位于蝶窦术后感染率为5.5%;漏口位于额窦后壁术后4例出现颅内感染,感染率为33.3%（P〈0.05）。结论：鼻内镜下脑脊液鼻漏修补术是治疗脑脊液鼻漏的有效方法,颅内感染是其严重并发症,漏口位于额窦后壁的脑脊液鼻漏患者术后感染率明显高于其他部位,漏口大小和位置是术后发生脑膜炎的危险因素。

顺铂联合化疗对60例晚期上皮性卵巢癌的疗效观察

晚期上皮性卵巢癌是发病率最高的妇科恶性肿瘤，其5年生存率达不到30％。目前，临床医师除日益完善、提高手术技巧，做到最大限度的肿瘤细胞减灭术外，如何在术后恰当应用化疗方案，提高患者5年生存率，降低化疗反应，改善患者生存质量，已日益引起人们重视。自从顺铂问世以来，已成为卵巢上皮癌化疗中主要的药物。大量研究证明联合用药优于单独用药。卵巢癌对化疗属中度敏感，对铂类药物联合化疗有70％～80％的有效率。本文对1998年1月至2002年12月住院手术治疗的晚期卵巢癌患者（Ⅲ期、Ⅳ期）筛选出上皮性卵巢癌60例，行肿瘤细胞减灭术后，随机分为两组，一组以顺铂＋环磷酰胺（PC）方案化疗，一组以紫杉醇加顺铂（PP）方案化疗，对两组化疗方案的用药方法、疗效及毒副反应作一分析讨论，现报告如下。

标记TRAILR地高辛探针及原位杂交检测喉癌组织mRNA

目的:标记肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体受体(TRAILR)地高辛(DIG)探针,检测喉癌组织中TRAILR mRNA,并探讨其意义。方法:采用RT-PCR原位杂交法检测喉癌组织TRAILR mRNA。结果:TRAILR地高辛探针标记成功;喉癌和正常对照中死亡受体4、5(DR4,DR5)mRNA呈强阳性,阳性率均为100%(34/34,5/5);正常对照中诱捕受体2(DcR2)mRNA呈强阳性,阳性率100%(5/5);喉癌中DcR2 mRNA可检出,阳性率14.71%(5/34);DcR2 mRNA主要分布在癌巢组织边缘,强度由癌巢中央到癌巢边缘逐渐加强。结论:TRAIL受体基因可能在喉鳞状细胞癌凋亡调控机制中发挥重要作用。

标记肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体受体-2地高辛探针

目的:标记肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)受体-2的地高辛探针。方法:查阅核酸序列数据库上TRAILR-2的基因全序列,计算机辅助设计引物,RT-PCR扩增目的条带,用地高辛(D igoxin,D IG)进行标记,制作TRAILR-2的探针。结果:地高辛标记的TRAILR-2电泳能力下降,标记成功。结论:TRAILR-2地高辛探针的标记成功为进一步研究肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体受体-2与喉鳞状细胞癌的关系奠定了一定的基础。

反义表皮生长因子受体纳米颗粒对小鼠头颈鳞状细胞癌放疗增敏的实验

目的应用反义表皮生长因子受体(epidermal growth factorreceptor,EGFR)纳米颗粒,研究阻断EGFR表达,对小鼠头颈部鳞状细胞癌(简称头颈鳞癌)敏感性的作用。方法载反义EGFR寡核苷酸纳米颗粒转染SCCⅦ细胞株,通过Western-blot研究其蛋白抑制效应。放射治疗干预后,细胞克隆试验和MTT试验检测细胞的放射敏感性,流式细胞仪检测细胞周期分布和凋亡情况;构建小鼠头颈癌荷瘤模型,瘤体注射反义EGFR纳米颗粒,予以4Gy放射治疗,观察肿瘤生长抑制情况。结果反义EGFR纳米颗粒明显抑制EGFR蛋白的表达情况;反义EGFR纳米颗粒与放疗联合降低了肿瘤细胞克隆形成能力及生长能力(P<0.05);肿瘤细胞发生G1期阻滞,细胞凋亡率增加(P<0.05)。体内实验发现反义EGFR纳米颗粒组肿瘤生长明显延缓。结论反义EGFR纳米颗粒通过下调EGFR的表达,使SCCⅦ细胞发生G1期阻滞,具有放疗增敏效应。

感音神经性听力损失治疗的研究进展

感音神经性听力损失(sensorineural hearing loss,SNHL)是听力障碍的常见临床类型,其主要是由于耳蜗螺旋器毛细胞以及听神经以上通路受损,导致声音的感受、神经传导及皮质功能障碍,引发的听力减退和(或)听力丧失,占所有听力障碍的90%以上,严重影响人们的日常工作及生活。由于SNHL在临床中最为常见,发病率高,病因、发病机制及病理改变等复杂多样,治疗手段不尽相同,总体疗效不一,选择正确的治疗方法对于听力改善或恢复具有重要意义。本文就国内外SNHL的治疗进展进行归纳总结,为SNHL的临床规范诊治提供参考。

靶向沉默HIF-1α和Survivin基因对鼻咽癌裸鼠移植瘤放疗敏感性的影响

目的:探讨RNAi靶向沉默人鼻咽癌细胞株CNE-2细胞缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和/或生存素(Survivin)基因对裸鼠移植瘤放疗敏感性的影响。方法:设计合成靶向沉默HIF-1α和/或Survivin的microRNA干扰质粒,采用脂质体转染法将HIF-1α和/或Survivin的microRNA干扰质粒转染到CNE-2细胞;取35只4~6周龄的雌性BALA/c裸鼠,随机均分为HIF-1α干扰组、Survivin干扰组、HIF-1α&Survivin干扰组(联合干扰组)、空载组和阴性对照组;分别给予相应转染后的CNE-2细胞注射至裸鼠右侧腋窝皮下,待各组裸鼠成瘤后,给予5Gy X-射线照射,每隔3 d放疗1次,共15Gy X-射线,观察各组裸鼠放疗前后的肿瘤体积,照射结束3 d后处死裸鼠,测量瘤体体积,计算肿瘤体积增加率;RT-q PCR法检测瘤体组织中的HIF-1α和Survivin mRNA表达水平,Western Blot法检测HIF-1α和Survivin蛋白表达水平,TUNEL试剂盒检测鼻咽癌裸鼠移植瘤中细胞凋亡。结果:HIF-1α干扰组、Survivin干扰组与联合干扰组经过放射治疗后肿瘤体积增加率明显小于空载体组与阴性对照组(P<0.05);HIF-1α干扰组、Survivin干扰组与联合干扰组瘤体组织中HIF-1α、Survivin mRNA和蛋白质表达水平显著低于空载组与阴性对照组,细胞凋亡率高于空载组与阴性对照组(P<0.05);HIF-1α干扰组、Survivin干扰组及联合干扰组瘤体组织中HIF-1α、Survivin mRNA和蛋白质表达水平及细胞凋亡率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:单独干扰HIF-1α、Survivin基因与联合干扰HIF-1α和Survivin基因均能够增加鼻咽癌裸鼠移植瘤对放疗敏感性,但联合干扰并没有进一步提高鼻咽癌裸鼠移植瘤放疗敏感性。

沉默HIF-1α对人鼻咽癌裸鼠移植瘤生长的影响

目的:探讨沉默缺氧诱导因子-1α对人鼻咽癌裸鼠移植瘤生长的影响。方法:15只4~6周龄雌性裸鼠,随机均分为为HIF-1α干扰组、空载组及阴性对照组;采用脂质体转染法将HIF-1α的microRNA干扰质粒转染CNE-2细胞,RT-q PCR检测其沉默效应,将转染HIF-1α干扰质粒的CNE-2细胞、转染空载质粒的CNE-2细胞以及CNE-2细胞分别接种于3组裸鼠右腋皮下,建立鼻咽癌CNE-2细胞裸鼠移植瘤模型,形成肉眼可见的肿瘤后再喂养16 d,观察各组成瘤时间及肿瘤体积;RT-q PCR检测3组移植瘤中HIF-1α基因的表达,蛋白质印迹法检测3组移植瘤中HIF-1α蛋白的表达。结果:成功构建裸鼠移植瘤模型,HIF-1α干扰组、阴性对照组、空载组裸鼠成瘤时间分别为(8.60±1.40)、(4.60±0.55)、(4.80±0.84)d,差异有统计学意义(P<0.05);肿瘤体积分别为(128.60±77.70)、(1 411.10±212.50)、(1 306.80±154.60)mm3,差异有统计学意义(P<0.05);HIF-1α干扰组瘤体组织中的HIF-1α基因和蛋白的表达量明显降低(P<0.05)。结论:沉默HIF-1α基因能有效抑制人鼻咽癌裸鼠移植瘤成瘤时间和肿瘤的生长。

纳米载体介导沉默Survivin基因对鼻咽癌细胞增殖凋亡及放疗敏感性的影响

目的：探讨纳米载体转染沉默鼻咽癌CNEII细胞中Survivin基因后,CNEII细胞增殖、凋亡及对放疗敏感性的改变。方法：制备聚乙烯亚胺（PEI）-四氧化三铁（Fe3O4）磁性纳米粒,用PEI-Fe3O4磁性纳米粒包被miRNA-Survivin质粒（纳米干扰质粒）,将CNEII细胞分为空白对照组（不加质粒,C组）、加纳米干扰质粒组（S组）及加miRNA-NC对照质粒组（NC组）;3组细胞转染48 h后,荧光显微镜下观察质粒所带绿色荧光蛋白EGFP的表达,进行细胞计数,计算转染效率;利用Real Time RT-PCR及Western Blot方法检测Survivin mRNA及蛋白表达抑制情况;转染24、48、72及96 h时用MTT法检测3组细胞的增殖情况,转染48 h时用放射线照射3组,采用流式细胞术检测3组细胞放射线照射前后的细胞凋亡率。结果：转染48 h后,加入包被miRNA-Survivin质粒的PEI-Fe3O4磁性纳米粒的CNEII细胞转染效率为（60.9±3.9）%、mRNA表达抑制率为96.5%、蛋白表达抑制率为82.5%,均高于C组和NC组（P〈0.05）,说明构建PEI-Fe3O4磁性纳米粒成功;MTT结果显示48 h以后S组细胞的吸光度值低于NC组和C组,说明细胞增殖被抑制;转染48-72 h CNEII细胞施以6Gy的放射线照射,射线照射后S组细胞凋亡率高于S组照射前（P〈0.05）,S组细胞凋亡率高于NC组和C组（P〈0.05）。结论：鼻咽癌CNEII细胞沉默Survivin基因后的细胞的增殖被抑制、凋亡数增加,放射线照射凋亡更明显。

新型纳米载体PEI-Fe_3O_4在鼻咽癌细胞基因转染中的应用

目的:构建聚乙烯亚胺(PEI)修饰的四氧化三铁(Fe_3O_4)磁性纳米粒,观察其表征,探讨其作为基因载体的可行性。方法:用PEI-Fe_3O_4磁性纳米粒包被质粒转染鼻咽癌CNEII细胞,转染miRNA-HIF-1α干扰质粒和miRNA-NC对照质粒分别为H组、NC组,空白对照组设为C组;用电子显微镜观察H组和NC组纳米粒的大小及表征,用荧光显微镜观察H组和NC组转染效率,用Real Time RT-PCR及Western Blot方法检测低氧诱导因子-1α(HIF-1α)mRNA及蛋白表达的抑制情况。结果:成功构建PEI-Fe_3O_4磁性纳米粒;H组和NC组的转染率分别为(63.6±4.2)%、(65.8±6.1)%,差异无统计学意义(P>0.05);H组HIF-1αmRNA及蛋白表达抑制率与NC组、C组比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:PEI-Fe_3O_4磁性纳米粒是一种较为理想的基因转染载体。