雌激素通过调节MSC分泌细胞因子影响其对DC成熟与功能的抑制

目的:本研究试图检测不同浓度17β-雌二醇(E2)存在的情况下人胎肺间充质干细胞(MSC)增殖和表型的变化,并分析这种状态的MSC对树突状细胞(DC)成熟和功能影响及其可能的机制。方法:分离培养人胎肺MSC,加入不同浓度E2,在24小时后对MSC进行细胞计数、测定其增殖和贴壁能力,并用流式细胞仪分析MSC表面标志,RT-PCR测定MSC中细胞因子(IL-6、TGF-β和VEGF)mRNA的表达情况。进一步探讨了E2处理24小时后的MSC对DC成熟和功能的影响。结果:分离得到的MSC纯度达到95%以上;E2影响MSC的增殖和贴壁能力,但不影响MSC表面标记的表达;MSC与DC共培养后DC表面CD86、MHCⅡ和CD80的表达均有所降低,而当DC与经E2预处理过的MSC共培后,DC表面MHCⅡ、CD80和CD86的表达回升;高浓度E2作用MSC24小时后,MSC表达的TGF-β与对照组相比减少,而IL-6和VEGF与对照组相比增加。结论:E2可能通过调节MSC分泌细胞因子的水平,改变MSC对DC的免疫抑制作用。

雌激素对人脐带来源间充质细胞骨架和超微结构的影响

目的研究在17β-雌二醇(E2)作用下人脐带间充质干细胞骨架、超微结构的形态学变化,并分析其骨架蛋白的表达情况及其可能的机制。方法用三酶法分离培养人脐带间充质干细胞,流式细胞仪检测所得细胞表型。E2处理48h后,用激光共聚焦显微镜观察肌动蛋白和纽蛋白的表达情况;用透射电子显微镜观察细胞超微结构的变化。结果分离得到的人脐带间充质干细胞纯度达到95%以上;E2对肌动蛋白的形成和分布没有影响,但使纽蛋白的分布集中于核周;在E2作用下,人脐带间充质干细胞出现老化,自噬体增多,线粒体出现代偿性增加。结论 E2能改变人脐带间充质干细胞的细胞骨架和超微结构,从而可能影响其功能。

雌激素通过miR-146a影响间充质干细胞的免疫调节功能

本研究用混合酶法分离培养人脐带间充质干细胞(MSC),检测在不同浓度17β-雌二醇(E2)作用下MSC中MicroR-NA的表达情况。进一步通过转染使MSC高表达miR-146a,并分析转染后MSC的表型、功能及相关因子的表达变化。结果显示,E2处理的MSC中IFN-β的表达没有发生明显变化,STAT1与IDO1的表达显著下调。同时,E2处理能够上调MSC对miR-146a的表达,降低其对miR-23b和miR-21的表达。miR-146a转染不影响MSC的表型,而显著降低STAT1和IDO的表达。提示E2可能通过影响MSC内miR-146a的表达改变其免疫调节功能。

RNAi抑制TLR9表达影响小鼠骨髓来源树突状细胞对CpG的应答

为了探讨特异性降低Toll样受体9(TLR9)表达后,小鼠骨髓来源树突状细胞(dendritic cell,DC)对CpG刺激的应答反应,我们合成了特异性干扰TLR9表达的小干扰RNA(small-interference RNA,siRNA),用Lipofectamine2000转入DC,利用Block-iT检测评估了转染效率;RT-PCR方法检测了干扰效果;Annexin V和PI双染检测了细胞凋亡率。进一步在CpG作用后,用流式细胞术分析了DC表面标志CD40和MHC II的表达以及DC吞噬FITC-dextran(右旋糖酐)的能力。结果显示,siRNA转染效率较高,TLR9表达被显著下调。干扰TLR9后DC在CpG作用下,表面标志CD40和MHCII表达未被上调,但吞噬功能维持较强的水平,DC表现出未成熟状态。这些结果提示,我们建立的RNA干扰(RNA in-terference,RNAi)方法能够有效阻断TLR9的表达,为进一步研究CpG信号刺激对DC成熟和功能变化的影响提供了一种有效工具。

临床终点委员会在临床事件判定过程中的重要作用

临床终点委员会(CEC)在临床试验终点事件的判定过程中具有重要作用,尤其是在学术联合会(ARC)定义出现之后,其对试验质控的重要性日益突出。本文介绍CEC在临床试验质量控制过程中的作用及目前国内外关于CEC的应用和CEC对主要终点的影响,分析CEC在心血管领域中的应用及发展情况,探讨如何合理使用CEC并使之发挥最大作用。

我读的第一本书

我小学一年级读了《水浒》，就觉得两个字：好看!我以为，今天的孩子真正开始阅读的时间大多太晚，错过了最佳的时机，也错失了很多时间。这也是我们很多孩子只会读课本而不会真正地读书的原因。我这个“第一本”当然不是指低幼读物，而是确实留给你深刻印象的“第一本”。为什么有印象？什么原因令你难忘？哪些地方吸引了你？这些理由写下来会很有意思。