芹菜斑枯病菌生物学特性研究

以沈阳地区芹菜斑枯病菌的纯培养菌株为试材,通过对菌丝生长、孢子萌发的营养及环境条件的多因子试验,明确了芹菜斑枯病菌菌丝生长以在CDAMS-VI培养基上最好,其次是CSA、CCSA和PDA,菌丝生长及产孢对碳源、氮源种类有明显的选择性。菌丝生长的最适pH值为4～5,最适温度为21℃,致死温度为39℃(处理40min),光照明显抑制菌丝生长。病菌分生孢子在水和芹菜汁中不能萌发,在水琼脂上萌发最好;孢子萌发的适宜pH值为4.6～6.6,适温为17～25℃,致死温度为42℃(处理20min),RH100%最适宜孢子萌发。光照和变温处理可促进分生孢子器的形成,病菌在PDA上从孢子萌发到分生孢子器形成并释放出分生孢子需要16～18d。

葡萄抗感白腐病品种PAL酶、PPO酶和SOD酶活性比较

对抗、感葡萄白腐病品种的苯丙氨酸解氨酶(PAL)、多酚氧化酶(PPO)和超氧化物歧化酶(SOD)活性动态变化进行测定,结果为抗、中抗品种的PAL酶活性,在病原菌侵染后呈上升趋势,而感病品种呈下降趋势;两个抗病品种的PPO酶活性迅速上升,并保持相当长时间的高活性值,而中抗、感病品种PPO酶活性几乎没有明显变化,或呈下降趋势.抗病品种的健康果粒中的SOD活性低于感病品种的SOD活性,但抗病品种在受病原菌侵染后SOD活性迅速上升,感病品种的SOD活性几乎没有改变.

黄瓜黑星病菌致病机理的研究 Ⅱ细胞壁降解酶及其在致病中的作用

本文通过活体内外黄瓜黑星病菌 (Cladosporium cucumerinum)产生的细胞壁降解酶活性分析 ,初步明确了 Cx-酶 (羧甲基纤维素酶 )、β-葡萄糖苷酶和 PMG(聚甲基半乳糖醛酸酶 )、PMTE(果胶甲基反式消除酶 )在该菌侵染黄瓜中的作用。瓜条感病的各部位 ,以病健交界处细胞壁降解酶活性最高 ;在检测的各类酶中 ,活性最高的为 PMG、PMTE,Cx-酶、β-葡萄糖苷酶和 FPA(滤纸酶 )活性较低。抗感病黄瓜品种染病后 ,细胞壁降解酶活性均迅速增强。感病品种染病后 ,果胶酶 (PMG、PMTE)活性远远高于抗病品种 ,其高峰值是抗病品种的 2 .72～ 7.52倍。感病品种接种后纤维素酶 (Cx-酶、β-葡萄糖苷酶 )活性一直增强 ;抗病品种接种后 β-葡萄糖苷酶随着接种天数的增加酶活性一直增强 ,Cx-酶在染病后初期活性迅速增强 ,增至高峰后逐渐降低。

黄瓜黑星病菌致病机理的研究Ⅲ 细胞壁降解酶和毒素对寄主超微结构的影响及其协同作用

本文通过透射电镜和扫描电镜观察 ,初步明确了果胶酶、纤维素酶及毒素对黄瓜叶组织超微结构的影响。在致病过程中 ,3种致病因子起着各自独立又相互联系的作用。3种致病因子对寄主超微结构的影响中 ,纤维素酶分解细胞壁能力最强 ,毒素对细胞质膜的作用最大 ,3种致病因子均可造成质壁分离 ,液泡、内质网受损。而叶绿体的被膜、片层结构主要被纤维素酶降解 ,线粒体的被膜主要被果胶酶降解 ,3种致病因子均能使叶绿体、线粒体内部空泡化。在分解叶表皮的过程中 ,所研究的 3种致病因子首先是果胶酶降解果胶层 ,然后是纤维素酶、果胶酶、毒素对栅栏组织的分解 ,最后是纤维素酶、毒素作用于薄壁细胞壁 ,毒素、纤维素酶、果胶酶协同作用于细胞内部组织。

节能日光温室中番茄灰霉病发生规律的研究

通过 3年对节能日光温室环境温湿度监测、病菌孢子捕捉和番茄灰霉病发生规律研究明确 ,一般年份 ,灰霉病在番茄叶片上表现为明显的始发期、盛发期和末发期等 3个阶段 ;果实发病后 ,即进入盛发期。温室中病菌的发生与病害呈正相关 ,病菌的高峰期较病害的高峰期提前 10～ 15d。持续的低温、高湿、苗期带病等是引起番茄灰霉病发生的重要因子。提出要从优化设施环境等方面来控制番茄灰霉病的危害。

不同抗、感枯萎病黄瓜品种不同生育时期根际微生物数量消长动态分析

通过对不同抗、感枯萎病黄瓜品种不同生育时期的根际微生物数量消长动态研究发现 ,黄瓜抗、感枯萎病品种的根际真菌、放线菌数量存在明显差异 ,且这些根际微生物数量与黄瓜的生育期有一定关系。在结瓜期抗病品种的真菌、放线菌数量明显多于感病品种 ,黄瓜的根际细菌数量与黄瓜抗性无相关性。根际真菌、放线菌数量在黄瓜初花期、结瓜期呈明显上升趋势 ,而细菌数量则呈波动变化 ,在初花期出现下降趋势。

辽宁省葡萄炭疽菌鉴定及对多菌灵敏感性研究

葡萄炭疽病已成为辽宁省葡萄生产上的重要病害。经对辽宁省主要葡萄产区24个葡萄炭疽菌株进行病原菌鉴定和采用生长速率法测定了葡萄炭疽菌对多菌灵的敏感性后，结果表明：引起辽宁省不同地区葡萄炭疽病的病原均为胶孢炭疽菌[Colletotrichum gloeosporioides（Penz．）Sacc．]。该病菌对多菌灵的敏感性测定值EC50的范围是0．2678～2．7312μg／mL，平均值1．1449μg／mL。根据计算出的供试菌株的抗性系数和敏感性频率分布图所示，大部分菌株的抗药性表现为中抗水平，仅有1个菌株抗性较高，而不同敏感性频率分布呈不规则的正态分布，存在敏感性下降的风险。

内生细菌B504的鉴定及对黄瓜枯萎病的生防作用

B504是从黄瓜植株中分离到的内生细菌。平板对峙试验表明,该菌株对黄瓜枯萎病菌等10种植物病原真菌具有拮抗作用,对黄瓜枯萎病菌的生长抑制率达44.1%。该菌株造成黄瓜枯萎病菌的分生孢子畸形,形成泡状物,尔后细胞壁消解,引起细胞内含物外溢,明显影响孢子萌发。用B504对黄瓜种子进行催芽处理,对黄瓜苗期、成株期枯萎病的防治效果分别为54.0%和41.7%。B504的16S rDNA序列与枯草芽胞杆菌具有高度相似性。根据菌体形态、培养性状、生理生化特性及16S rDNA序列分析等指标,确定B504为枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)。

我国葡萄白腐病菌分类地位的重新确定研究

葡萄白腐病是重要的葡萄病害之一，造成产量损失极大。本文通过对白腐病菌光学与超微结构观察，明确了我国白腐病菌为白腐垫壳孢（ Ｃｏｎｉｅｌｌａ ｄｉｐｌｏｄｉｅｌｌａ （Ｓｐｅｇ．） Ｐｅｔｒａｋ ＆ Ｓｙｄｏｗ） ， 而不是白腐盾壳霉（ Ｃｏｎｉｏｔｈｙｒｉｕｍ ｄｉｐｌｏｄｉｅｌｌａ （Ｓｐｅｇ．） Ｓａｃｃ ．） 。该菌分生孢子器内基部具垫状结构，产孢方式内壁芽生瓶梗式，分生孢子光滑。

健康与罹病黄瓜根际微生物数量及真菌区系研究

对健康与罹病黄瓜根际微生物数量及真菌区系研究结果表明 ,健康与罹病黄瓜植株根际微生物数量存在明显差异 ,其中罹病黄瓜植株根际真菌、细菌数量明显高于健康黄瓜植株 ;而健康与罹病黄瓜植株放线菌数量无明显差异 ;健康黄瓜植株根系真菌种类为 8种左右 ,常见真菌 3～ 4种 ,优势种的菌落数占总菌落数的 2 5 %～ 5 6 %。罹病植株根系真菌种类为 2～ 4种 ,仅有稀少真菌和优势种 ,且优势种的菌落数占其总菌落数的 88%以上 ,处于绝对优势 。

番茄灰霉病在果实上的侵染部位及防治新技术

通过发病规律及人工接种研究，明确了番茄灰霉病菌Ｂｏｔｒｙｔｉｓｃｉｎｅｒｅａ初侵染番茄果实的主要部位为残留的花瓣处及柱头处，随后扩展到果蒂部、脐部，最后蔓延到果实的其它部位。据此，在国内外首次提出了一种防治番茄果实灰霉病的新方法，在番茄用２，４－Ｄ蘸花后７～１５ｄ（幼果直径１０～２０ｍｍ）摘除残留的花瓣及柱头，防效达８０％以上，对番茄单果重无影响。

生防细菌SY286的筛选及其对葡萄霜霉病的防治效果研究

从辽宁省9个地区葡萄园采集葡萄叶片36份，分离获得303株细菌，并筛选出对葡萄霜霉病菌Plasmopara viticola具有抑制作用的12株细菌，其中抑制作用最强的为菌株SY286，其在离体叶片上对葡萄霜霉病防效可达93.18%。在2012-2013年进行2次田间防效试验，结果表明菌株SY286发酵原液对葡萄霜霉病防效可达80%以上。抑菌谱试验表明，该菌株对供试的10种植物病原真菌均有较好的抑菌作用，抑菌带宽度为5.93～24.90 mm。经形态观察、生理生化特征和16S rDNA 同源性分析，鉴定为苍白杆菌Ochrobactrum sp.。

葡萄白腐病菌生物学特性研究

对葡萄白腐病菌生物学特性研究结果表明:该病菌生长的最适温度为25～30℃;具有较宽的酸碱度适应范围,最适pH值为3～5;PDA是病原菌培养的较好培养基;在营养方面,不同碳源对病菌生长快慢顺序是:单糖>双糖>多糖,葡萄糖是较佳的碳源;不同氮源影响病菌生长速度的顺序是:无机氮>有机氮,最适氮源为NH4Cl。碳源比氮源更适合该病菌分生孢子萌发,碳源中葡萄糖、氮源中NH4Cl和KNO3溶液最适合分生孢子萌发,适宜孢子萌发的温度范围为15～30℃,最适温度为25℃左右。适宜孢子萌发的pH范围为pH值4～6,最适pH值为5。光暗交替有利于分生孢子萌发。

黄瓜细菌性白枯病CU-PV07菌株鉴定及16SrDNA序列分析

由CU-PV 07菌株引起的黄瓜细菌性白枯病已成为黄瓜生产上的主要病害。弄清该致病菌株分类地位及基因序列,对做好病害诊断和防治有重要意义。通过症状观察与对致病菌的生理生化分析、16S rDNA序列分析,结果表明:该病害症状为叶片病斑圆形或近圆形,中间白色膜质,四周具晕圈,病部未见菌脓;CU-PV 07菌株菌体杆状,菌体大小为(1.1～5.2)μm×(0.7～2.1)μm;革兰氏染色反应阴性,鞭毛极生1～2根;分析生理生化指标和16S rDNA序列同源性可知,该病菌CU-PV 07菌株与Pseudomonasviridiflava一致,在构建的系统演化树上应为同一个族群。可见,黄瓜细菌性白枯病菌的病原为绿黄假单胞菌[Pseudomonas viridiflava(Burkholder 1930)Dowson 1939]。

黄瓜黑星病菌致病机理的研究Ⅰ 黄瓜黑星病菌致病毒素的分离和纯化

本文明确了在接种后的黄瓜黄化子叶中能够提取到黄瓜黑星病菌(Cladosporium cucum eri-num ) 的粗毒素,最佳培养时间为接种后4 d。该毒素具有明显的生物活性,能够抑制黄瓜胚根与胚芽的生长,能使扦插的黄瓜水培幼苗致萎。通过硅胶柱层析纯化黄瓜黑星病菌的粗毒素,根据洗脱顺序和洗脱液的种类将其分为4 个洗脱组分。根据硅胶薄层层析紫外显色及生物活性分析可确定,活性物质主要集中在无色的洗脱组分Ⅱ中,该洗脱组分中有 3 组活性物质:CCⅠ:Rf= 0.51; CCⅡ:Rf=0.25; CCⅢ:Rf= 0.06。

东北地区大白菜根肿病菌生理小种鉴定

采用Williams鉴别系统的4个鉴别寄主(2个芜菁甘蓝品种Laurentian和Wilhelmsburger,2个结球甘蓝品种Jersey Queen和Badger Shipper),于2011—2012年连续2年对采自黑龙江、吉林、辽宁的11个大白菜根肿病主要发病区域的病原菌进行了生理小种鉴定。结果表明,东北地区大白菜根肿病菌主要种群均为4号生理小种。

葡萄果穗附生微生物区系分析

对3个抗病性不同的葡萄品种贝达、夕阳红、87-1果穗附生微生物的分离计数和优势丝状真菌鉴定的结果表明,3个品种自幼果膨大期到成熟期,丝状真菌和酵母菌数量逐渐增加,细菌数量为先增加后下降;在幼果膨大期和着色期均为细菌占优势,成熟期时酵母菌占优势。不同品种在同一生育期酵母菌的出现频率和其他丝状真菌的种类及出现频率无明显差异,同一品种在不同生育期真菌的数量和种类差异显著,幼果膨大期的优势丝状真菌为盾壳霉属,成熟期的优势丝状真菌为交链孢属、芽枝霉属和茎点霉属。筛选出一株生长速度快、能在葡萄果穗表面定殖的瘦果红酵母(Rhodotorulaacheniorum)。

大葱提取物对黄瓜枯萎病菌抑菌活性研究

以黄瓜枯萎病菌为供试菌,采用孢子萌发率和菌丝生长速率法研究了大葱总提取物、蛋白成分、多糖成分等各成分及大葱挥发性物质的抑菌作用。结果表明:大葱总提取物和挥发性成分对供试菌孢子萌发及菌丝生长都有很好的抑制效果,大葱总提取物在浓度达500mL·L-1时,对孢子萌发抑制率及菌丝生长抑制率分别为100%和38.6%;大葱挥发性成分在浓度达5g·dm3时,对孢子萌发抑制率为100%,对菌丝生长的抑制率为42%,大葱蛋白及多糖成分对供试菌均无抑制效果。

辽宁省辣椒疫霉菌生理小种鉴定

辣椒疫病是辽宁省辣椒生产上的重要病害,开展辽宁省辣椒疫病病菌生理小种鉴定,可为抗疫病辣椒新品种的选育提供理论依据。对来源于辽宁省不同辣椒产区的30个病样进行了分离鉴定,经致病性测定和形态特征观察,确定所分离的病菌均为辣椒疫霉菌(Phytophthora capsici Leonian);利用中国辣椒疫霉菌生理小种鉴别通用寄主,对其进行了生理分化鉴定。根据供试菌株在鉴别寄主上的抗感反应,鉴定结果表明:辽宁地区辣椒疫霉菌划分为1号、2号和3号生理小种,发生频率分别为3.33%、26.67%和70%;其中3号生理小种为辽宁省辣椒疫霉菌的优势小种。从不同地区测定结果表明不同生理小种的分布与地域间的相关性不强。