纪律检查机关开展制度执行监督检查的工作路径研究——基于苏州市的实践探索

以习近平同志为核心的党中央高度重视制度执行工作。全面提高党内法规制度执行力,充分发挥制度刚性约束和治本功能具有重要的现实意义。苏州市纪委紧密结合实际,加强工作实践,初步形成了具有特色的制度执行监督检查方式方法,并立足执行工作实际,探索构建了制度执行监督检查指标体系,为提升制度执行监督检查工作质量提供了有益借鉴。

几种不同来源食用明胶的蛋白二级结构分析及安全性能比较

用傅里叶变换红外光谱仪和圆二色谱仪对四种不同来源食用明胶的蛋白二级结构组成、重金属含量进行了分析。结果表明,四种食用明胶的二级结构均以β-sheet为主,且含有β-turn结构,其中鱼鳞明胶和猪皮明胶还含有大量的310-helix结构,鱼皮明胶和猪皮明胶含有α-helix结构,鱼鳞明胶和牛骨明胶的无序结构含量较高。四个明胶样品的重金属指标均符合国内相关标准,其中牛骨明胶的重金属含量最低,安全性最高。

EF-Hand蛋白研究进展

EF-hand蛋白作为钙离子结合蛋白家族中的特殊成员和钙离子一起参与了从细胞增殖到细胞凋亡各方面的功能调节,EF-hand蛋白调节信号的异常也被认为是人类多种疾病的诱因。按照功能分类,EF-hand蛋白可以分为具有调控功能的Ca2+信号蛋白和只参与Ca2+转运、缓冲的Ca2+缓冲蛋白两大类。EF-hand蛋白功能的多样性与EF-hand结构的构象、组织形式、对钙离子的响应程度等密切相关。本文就EF-hand蛋白结构与功能的差异以及与疾病的关系进行简要综述。

干旱诱导AtGSTF14基因DNA去甲基化

DNA甲基化在调控植物基因表达方面起重要作用。干旱、低温和盐胁迫严重地影响了植物的生长发育。然而,DNA甲基化是否在干旱诱导的AtGSTF14基因表达过程中起作用还不清楚。本研究揭示了干旱诱导AtGSTF14基因启动子重复序列的DNA去甲基化,并激活了AtGSTF14基因的表达。本研究采用实时荧光定量PCR技术(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测目的基因的表达,结果表明干旱处理的拟南芥植物中AtGSTF14基因表达水平显著增加,野生型拟南芥(Col-0)被作为对照。亚硫酸盐测序分析表明与野生型拟南芥中AtGSTF14基因DNA甲基化水平相比,干旱处理的拟南芥植物中AtGSTF14启动子区重复序列的DNA甲基化水平显著降低。本研究为进一步探索非生物胁迫诱导植物基因表达的分子机制奠定了基础。

醋酸铅暴露致小胶质细胞系BV-2细胞铁死亡的机制研究

[背景]铅暴露可诱导小胶质细胞死亡,但是机制尚不清楚。铁死亡是新发现的一种细胞死亡方式,在铅暴露导致的小胶质细胞死亡中的作用还未见报道。[目的]探讨铁死亡在铅暴露致小胶质细胞死亡中的作用,以期为铅的神经毒性机制研究提供理论依据。[方法]小胶质细胞系BV-2细胞与0、10、20、40μmol·L^(-1)醋酸铅共同培养24 h,40μmol·L^(-1)醋酸铅组中加入铁螯合剂(DFO),即为40+DFO组;用倒置显微镜观察铅暴露后BV-2细胞形态的变化;组织铁试剂盒、谷胱甘肽试剂盒分别检测细胞内铁、谷胱甘肽(GSH);流式细胞术检测脂质活性氧(ROS)荧光强度。Western Blotting、qPCR检测谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、溶质载体家族7成员11(SLC7A11)、转铁蛋白受体1(TFR-1)、二价金属转运蛋白1(DMT1)、膜铁转运蛋白1(FPN1)蛋白及mRNA的表达。[结果]与对照组比较,随着铅染毒剂量的增加,BV-2细胞数量减少,且形态呈大而圆的阿米巴状;10、20、40μmol·L^(-1)醋酸铅组BV-2细胞内铁的水平分别为(1.08±0.04)、(1.29±0.03)、(1.72±0.10)mg·g^(–1)(以蛋白计,后同),均高于对照组(P<0.05),且40+DFO组细胞内铁水平为(1.34±0.10)mg·g^(–1),低于40μmol·L^(-1)醋酸铅组的(1.72±0.03)mg·g^(–1)(P<0.05);与对照组比较,10、20、40μmol·L^(-1)醋酸铅组的BV-2细胞中TFR-1、DMT1蛋白和mRNA表达均增加,差异有统计学意义(P<0.05),且40μmol·L^(-1)醋酸铅组尤为显著;FPN1蛋白表达无明显变化,但10、20、40μmol·L^(–1)醋酸铅组BV-2细胞中FPN1 mRNA的表达均明显下降(P<0.05)。与对照组比较,三个铅染毒组BV-2细胞内GSH水平均下降,脂质ROS水平升高;相比于40μmol·L^(−1)醋酸铅组,40+DFO组中GSH升高了12.30%,脂质ROS含量下降了13.00%(P<0.05)。10、20、40μmol·L^(−1)醋酸铅组中GPX4蛋白表达分别降低为对照组的50.00%、35.00%、17.00%,同时GPX4 mRNA表达也下降;20、40μmol·L^(−1)醋酸铅组中SLC7 A11蛋白和mRNA表达均低于对照组,其中,40μmol·L^(−1)醋酸铅组下降最为明显(P<0.05)。[结论]铅暴露诱导BV-2细胞发生铁死亡,铁转运失衡及氧化损伤可能参与了铅诱导BV-2细胞铁死亡的发生发展。

铁死亡在铅暴露致小鼠小脑损伤中的作用

目的 探究铁死亡在铅暴露致小鼠小脑损伤中的作用。方法 SPF级雄性C57小鼠40只按体重随机分为对照组和低、中、高浓度铅染毒组,每组10只。铅染毒组小鼠分别饮用0.25、0.50和1.00 g/L乙酸铅溶液共12周,对照组自由饮水。应用电感耦合等离子质谱仪检测小脑中铅含量;应用平衡木和旷场实验检验小鼠的运动平衡能力,用HE染色法观察小鼠小脑病理变化。应用试剂盒检测小鼠小脑组织中铁、丙二醛(malondialdehyde, MDA)和谷胱甘肽(glutathione, GSH)含量;Western blotting法检测小鼠小脑组织中转铁蛋白受体1(transferrin receptor-1, TFR-1)、铁转运蛋白(ferroportin, FPN-1)、溶质载体家族7成员A11 (solute carrier family 7 member A11, SLC7A11)、谷胱甘肽过氧化物酶4 (glutathione peroxidase 4, GPX4)、核因子-E2相关因子(NF-E2-related factor 2,Nrf2)和血红素加氧酶1(heme oxygenase-1, HO-1)蛋白表达情况。结果 低、中、高浓度铅染毒组小鼠小脑铅含量分别为(1.05±0.11)、(1.21±0.10)和(1.48±0.10)μg/g,均显著高于对照组(0.48±0.05)μg/g(P<0.05);平衡木通过时间各染毒组分别为对照组小鼠的1.34、1.64和2.02倍。旷场实验结果显示,各铅染毒组小鼠的中央停留时间和站立次数显著低于对照组。不同剂量铅染毒组小鼠小脑均可见浦肯野细胞排列不规则,胞体变小,深染,其中以高铅组最为明显。低、中和高浓度铅染毒组小鼠小脑中铁含量分别为对照组的1.77、2.29和3.77倍,各铅染毒组小鼠小脑中MDA含量均显著升高,而GHS含量明显下降。与对照组比较,铅染毒组小鼠小脑中铁转入蛋白TFR-1蛋白表达均显著升高,而铁转出蛋白FPN-1蛋白只有中和高浓度铅染毒组的表达下降明显,为对照组的60%和50%。此外,中和高浓度铅染毒组小脑中氧化应激调控蛋白SLC7A11和GPX4蛋白表达均显著下降;各铅染毒组小鼠小脑中Nrf2和HO-1蛋白的表达均降低,但高铅组下降最为显著。结论 本试验条件下,铅暴露可能是通过调控Nrf2/HO-1信号通路介导小鼠小脑铁死亡,进而导致小鼠运动平衡能力减弱。