rIFNα-2b对小鼠脾脏NK细胞活性的影响

目的 研究重组干扰素 α- 2 b(r IFNα- 2 b)对小鼠脾脏 NK细胞杀伤活性的影响 ,了解该干扰素的生物学活性。方法 采用皮下给药的体内实验及 3 H- Td R掺入抑制法检测小鼠脾脏 NK细胞活性。结果 r IFNα- 2 b能显著提高小鼠脾脏 NK细胞杀伤活性 ,且呈剂量依赖性 ,其高、中、低剂量各组的 NK活性分别为 65 .19± 17.5 6、44 .19± 14.30、35 .46± 17.49,与空白对照及阴性对照均有显著性差异。结论 r IFNα- 2 b能提高 NK细胞活性 ,并有剂量依赖性。

用人抗HBs在体内诱导主动免疫的研究

作者对103名健康志愿者注入高价人抗HBs(Ab_1)3次后,观测其体内产生的抗独特性抗体(Ab_2)和抗-抗-独特性抗体(Ab_3)水平的动态变化。结果发现,当Ab_3水平升高时,则Ab_2水平下降。从而再一次证明用于被动免疫的人抗HBs,可以激活体内独特型免疫网络,诱导出主动免疫的保护效果。

细胞因子受体-嵌合抗体真核表达载体的构建

目的:构建细胞因子受体-抗人AFP嵌合抗体基因真核表达载体。方法:用RT-PCR方法从人胚肝组织中扩增EpoR胞外区基因及gp130跨膜区基因,并用限制性酶切连接方法拼接。用PCR方法从抗人AFP单链抗体表达载体中扩增VL、VH基因,分别与人kappa轻链和人gammal重链恒定区基因重组,获得人鼠嵌合轻链和重链,再将EpoR-gp130与嵌合重链连接,最后将嵌合轻链和H-EpoR-gp130分别连接到质粒pVITRO上,构建pVITRO-E-g-Ig载体。结果:获得EpoR胞外区基因750bp,gp130跨膜区基因900bp。重组真核表达载体经限制性酶切鉴定示EpoR、gp130基因、嵌合重链基因和嵌合轻链基因正确连接到载体pVITRO。结论:成功构建细胞因子受体-抗人AFP嵌合抗体基因表达载体。

改良MTT法检测自然杀伤细胞的活性

采用经作者改良的ＭＴＴ比色测定自然杀伤细胞（ＮＫＣ）活性。结果显示：在效应细胞（ＥＣ）和靶细胞（ＴＣ）活性均≥９５％，ＥＣ≥３．０×１０２／Ｗｅｌ、ＴＣ≥１．６×１０２／Ｗｅｌ时，细胞还原ＭＴＴ产生的甲瓒溶解后的ＯＤ５７０ｎｍ值与细胞数成线性相关（ｒｅ＝０．９４，ｒｔ＝０．９７，Ｐ＜０．００１）。本法在测得ＥＣ∶ＴＣ为４０∶１时，正常人外周血ＮＫＣ活性为４５．６４％。用本法和３Ｈ－ＴｄＲ掺入抑制试验同时测定１０份白血病患者外周血ＮＫＣ活性，分别为３４．８６±７．８０％和３５．１６±８．４０％，两者呈良好的正相关（ｒ＝０．８７６，Ｐ＜０．００１）。本法简便、稳定可靠，是一种很有价值的测定ＮＫＣ活性的方法。

细胞因子受体-抗人AFP嵌合抗体融合蛋白的构建及表达

用RT-PCR方法从人胎肝组织中扩增EpoR胞外区基因及gp130跨膜区基因,并用酶切连接方法将其与抗人AFP嵌合抗体拼接,连接到质粒pVITRO上,构建真核表达载体.将重组质粒转染CHO细胞,以RT-PCR、Western blot和ELISA方法检测融合蛋白的表达.结果显示稳定转染细胞株有约150kDa的融合蛋白表达.