活动期与静止期牙周炎患牙龈沟液中IL-6的含量

目的 探讨白细胞介素 - 6(IL- 6)与牙周炎活动性的关系。方法 应用 EL ISA免疫夹心法检测牙周炎活动期 2 9颗患牙和静止期 31颗患牙龈沟液 (GCF)中 IL- 6的含量。结果 活动期患牙组龈沟液中 IL- 6的浓度 (10 .65± 2 2 .0 5 ng/ ml)显著高于静止期患牙组 (1.73± 0 .5 3ng/ ml,P<0 .0 5 )。结论 牙周炎患牙龈沟液中 IL-

人釉原蛋白基因转染对人牙龈成纤维细胞生物学活性的影响

分析釉原蛋白基因转染对牙龈成纤维细胞生物学活性的影响,为其进一步应用于基因增强牙周组织工程奠定实验基础。[方法]脂质体转染法将人釉原蛋白基因转入人牙龈成纤维细胞内,Zeoin筛选获得阳性克隆。以ELISA法检测重组釉原蛋白在转染细胞内以及培养上清液中的表达;进一步以MTT比色法分析基因转染对细胞增殖和分化的影响。[结果]釉原蛋白基因转染后,人牙龈成纤维细胞可以在胞内合成重组人釉原蛋白并将其分泌至胞外,表达浓度分别为0.277μg/mL和0.147μg/mL;与未转染组相比,釉原蛋白基因转染可显著促进牙龈成纤维细胞增殖(P<0.05),并且差异随时间增大。转染后的牙龈成纤维细胞碱性磷酸酶活性也较对照组有显著提高(P<0.05)。[结论]外源性釉原蛋白基因能够在人牙龈成纤维细胞获得表达,并显著促进其增殖以及向成骨细胞方向转化,可以应用于基因增强牙周组织工程。

吸烟对牙周病宿主反应的影响

吸烟是牙周病的一个重要危险因素。在吸烟人群中,牙周病的流行广度及严重程度均明显增高。烟草中的化学成分,尤其是尼古丁,对机体产生众多不良影响,包括改变炎症吞噬细胞的数目及功能,影响细胞因子和炎症介质的合成、分泌以及免疫球蛋白的生成等。从而干扰了正常的宿主反应,影响了牙周病的发生、疾病的进程以及预后。

PcDNA3/sIL-1RⅠ重组载体体外表达产物生物学活性的检测

目的:检测构建的PcDNA3/sIL-1RⅠ真核表达载体在体外的表达产物是否具有生物学活性。方法:脂质体介导PcDNA3/sIL-1RⅠ体外转染CHO细胞,MTT法检测重组质粒转染的CHO细胞上清液能否阻断IL-1β生物学活性。结果:重组质粒转染的CHO细胞上清液中表达的sIL-1RⅠ能阻断不同浓度IL-1β抑制A375细胞生长的作用。结论:PcDNA3/sIL-1RⅠ重组质粒在体外导入哺乳动物细胞后能够表达具有相应生物学活性的目的产物。

白细胞介素折-6与牙周病

白细胞介素-6(IL-6)是一种多功能的细胞因子,在牙周病的发生、发展和组织破坏中,尤其是在牙槽骨吸收过程中发挥着重要作用。牙周组织中的大多数细胞类型都可以组成性地和(或)在多种因素的刺激下反应性地生成IL-6,并且产生的IL-6量也受到众多因素的影响和调控。

釉原蛋白基因表达质粒PcDNA3.1-AMG在小鼠肌肉组织中表达的研究

目的研究釉原蛋白(amelogenin,AMG)重组质粒PcDNA3.1AMG能否在小鼠肌肉组织中获得正确表达。方法采用裸质粒直接注射法将溶于200μL磷酸缓冲液中的100μg质粒PcDNA3.1(对照组)或PcDNA3.1AMG(实验组)分别导入Balb/C小鼠的胫前肌内,注射后第3、7、14天分批处死小鼠,采用免疫组织化学染色法检测肌肉组织内釉原蛋白的表达。结果注射PcDNA3.1AMG的肌肉组织的肌细胞和细胞间质中均检测到釉原蛋白的表达;而注射PcDNA3.1的肌肉组织的肌细胞和细胞间质中均未检测到釉原蛋白的表达。结论PcDNA3.1AMG成功地转染了肌肉细胞,并且外源基因能够在肌细胞内转录、翻译并正确表达釉原蛋白。

牙周治疗前后龈沟液中白细胞介素-6水平的变化

目的 :探讨牙周洁刮治对患牙龈沟液中IL 6水平的影响。方法 :选取 12例成人牙周炎患者的重度牙周炎患牙 12颗 ,采集治疗前患牙的龈沟液并记录相关的临床指标 ,然后对患牙进行龈上洁治和龈下刮治。两周后 ,再次采集患牙的龈沟液并记录相关的临床指标。采用双抗体夹心ELISA法对牙周炎患牙龈沟液中IL 6水平进行检测 ,比较牙周洁刮治前后龈沟液中IL 6水平的差异。结果 :经过牙周洁刮治 ,患牙龈沟液中IL 6的水平明显降低 ,同时患牙的牙周临床指标也有明显的改善。结论 :牙周基础治疗在缓解牙周炎患牙局部炎症的同时 ,也对患牙局部的IL 6水平产生明显影响。

牙龈沟液中白细胞介素-6含量与牙周炎关系的研究

为探讨白细胞介素 - 6 (IL- 6 )与牙周炎的关系 ,采用双抗体免疫酶联法检测 10名非牙周炎患者的19颗牙周健康牙和 39名成人牙周炎患者的 6 0颗牙周炎患牙龈沟液 (GCF)中 IL- 6的含量。采集观察牙的 GCF样本 ,同时 ,记录观察牙的牙龈指数 (GI)、牙周袋深度 (PD)、附着丧失程度 (AL)。结果显示 ,牙周炎患牙 GCF中可检出高浓度的 IL- 6 (x=6 .0 379ng/m l) ,而 19颗牙周健康牙 GCF中均未检出 IL- 6 ,两者差异显著 (P<0 .0 5 )。经相关性分析 ,GCF中 IL- 6含量与 GI无相关关系 (r=0 .0 7,P>0 .0 5 ) ,与 PD及 AL 呈正相关关系 (r=0 .8,P<0 .0 0 1;r=0 .45 2 ,P<0 .0 1)。以上表明 ,IL- 6可能与牙周炎的发生和病变的严重程度之间具有密切关系。

人釉原蛋白基因的扩增及其真核表达克隆的构建

目的 构建人釉原蛋白基因真核表达克隆。方法 从胚龄 2 0周的引产胎儿牙胚中提取总 RNA,RT- PCR法扩增人釉原蛋白编码区基因 ,重组到真核表达载体 Pc DNA3.1中 ,经酶切和 DNA序列分析验证。结果经 RT- PCR扩增后 ,得到大小约 5 70 bp的特异性产物 ,与预期的人釉原蛋白 m RNA编码区碱基长度一致 ,重组克隆 Pc DNA3.1- AMG的测序结果显示 ,与 Gen Bank中的人釉原蛋白基因 (AMEL X)序列仅在第 4 85位碱基发生错配 (G→ C) ,但不影响氨基酸组成。结论 本研究成功的构建了人釉原蛋白基因真核表达克隆 ,为进一步研究牙周组织再生的基因治疗奠定了基础。

广泛型侵袭性牙周炎患者龈沟液中白介素-17的检测

目的比较广泛型侵袭性牙周炎患者与健康人龈沟液中白介素-17(IL-17)的表达水平及与临床指标的关系。方法选择广泛型侵袭性牙周炎患者18例和健康人16例,共68颗牙,记录临床牙周检查指标,用滤纸条法收集龈沟液。采用抗体夹心ELISA法测定广泛型侵袭性牙周炎患者治疗前、治疗后3个月及健康对照者龈沟液中IL-17总量和浓度。结果广泛型侵袭性牙周炎患牙治疗前龈沟液中IL-17的总量和浓度高于牙周健康牙,基础治疗3个月后广泛型侵袭性牙周炎患牙龈沟液中IL-17的总量和浓度较治疗前下降。广泛型侵袭性牙周炎患牙龈沟液中IL-17浓度与探诊深度、附着丧失和出血指数呈正相关关系,而IL-17总量仅与探诊深度呈正相关关系。结论龈沟液中IL-17浓度可能与广泛型侵袭性牙周炎牙周破坏及炎症的严重程度相关。

人釉原蛋白编码区基因真核表达载体PsecTaq2A-AMG的构建

目的 构建人釉原蛋白 (AMG)编码区基因真核表达载体PsecTaq2A_AMG。方法 采用PCR技术体外扩增AMG完整分泌肽编码区。将扩增产物与PsecTaq2A分别用BamHI和XholI行双酶切 ,将获取的AMG目的基因片段连接到双酶切后的PsecTaq2A ,构建重组质粒PsecTaq2A_AMG ,并对重组质粒进行鉴定。结果 ①PCR扩增产物经 1 5 %琼脂糖凝胶电泳 ,可见大小约 5 19bp的特异性条带 ,与预期结果一致。②重组克隆PsecTaq2A_AMG酶谱分析与预期结果一致 ,序列测定结果与GenBank中的人釉原蛋白序列完全一致。结论 用此方法可成功构建AMG编码区基因真核表达载体PsecTaq2A_AMG。

实验性牙周炎大鼠牙周组织、龈沟液及外周血中IL-22的检测

目的:在大鼠实验性牙周炎模型上检测炎症性牙周组织、龈沟液、外周血中白细胞介素22(IL-22)及其受体(IL-22R1)的表达水平。方法:取16只SD大鼠随机分为2组(n=8),实验组采用丝线结扎及牙龈卟啉单胞菌液涂抹法建立牙周炎模型;对照组无任何干预措施。8周后采集外周血、龈沟液及颌骨样本,体视显微镜及光镜下观察牙周组织病理改变,免疫组化分析牙周组织中IL-22、IL-22R1的表达水平,实时荧光定量PCR检测牙周组织中IL-22、IL-22R1 mRNA的表达水平,酶联免疫吸附法检测外周血及龈沟液中IL-22的水平。结果:实验组大鼠牙周组织病理改变符合牙周炎病理改变特征,牙槽骨吸收显著高于对照组(P<0.05);牙周组织中IL-22、IL-22R1及其mRNA表达较对照组显著上调(P<0.05);龈沟液及外周血清中IL-22浓度均较对照组显著升高(P<0.05)。结论:IL-22参与牙周炎免疫反应。

浅析移动互联网时代电子渠道的作用

随着移动互联网时代的到来,客户价值的长尾效应、电子渠道在运营商渠道体系中起着越来越重要的作用,本文在判断移动互联网时代到来的特征的基础上,分析梳理现有电子渠道分类和定位,提出如何利用电子渠道提升营销服务水平,助力移动互联网业务的推广。

基于CDIO理念的CBL模式在口腔住培医师牙周教学中的探索

口腔住院医师规范化培训是培养合格执业医生的综合诊疗能力和岗位胜任力,以独立完成临床工作。牙周病学是口腔临床基础学科,其临床教学质量关乎口腔医学整体教育质量。目前牙周临床教学多以专科疾病为脉络展开讲解,住培医师存在综合病例的序列性诊疗能力不足,沟通协作、创新管理和应变能力欠缺等问题,因此对以往的教学模式进行适当的改良尤为必要。基于CDIO教育理念的CBL模式是以协作小组为中心,病例完成为任务驱动,通过构思设计实施运行,融合技术能力和职业素质训练,培养创新型和实用型人才的带教新模式。本文针对口腔住培医师的特点,就基于CDIO教育理念的CBL模式在牙周临床教学中的应用进行探索和讨论。

Notch通路对牙龈卟啉单胞菌脂多糖诱导人牙周膜细胞表达RANKL/OPG的影响

目的:探讨牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)刺激人牙周膜成纤维细胞(human periodontal ligament cells,hPDLCs)后Notch信号通路的表达及其对RANKL/OPG表达的影响。方法:酶消化法结合组织块法原代培养hPDLCs,取第三代至第五代细胞给予0.1、1、10μg/ml Pg-LPS刺激72h,Real-time PCR检测RANKL/OPG mRNA的表达,并选择最佳诱导浓度1μg/ml组,采用Real-time PCR检测Notch通路Notch1-2、Notch4、Jagged-1、Jagged-2、DLL-1以及Hey-1表达受体配体及目的基因表达。随后,以γ-分泌酶抑制剂DAPT预处理hPDLCs 1h,予1μg/ml Pg-LPS刺激72h后,Real-time PCR、Western-Bloting检测Notch通路目的基因Hey-1及RANKL/OPG m RNA、蛋白水平的表达。结果:1μg/ml Pg-LPS可显著上调hPDLCs RANKL、Notch通路受体Notch4、配体DLL-1、Jagged-1及目的基因Hey-1的表达(P<0.05);而对OPG、Nocth1-2、Jagged-2 m RNA水平表达无明显影响(P>0.05)。此外,γ-分泌酶抑制剂DAPT可抑制Pg-LPS诱导RANKL及Hey-1 m RNA及蛋白的表达上调,而仅对OPG m RNA表达有影响(P<0.05)。结论:Notch信号通路参与调控Pg-LPS诱导的hPDLCs RANKL/OPG表达。

人釉原蛋白重组质粒Psec Taq2A-AMG在人牙龈成纤维细胞表达的研究

目的 研究釉原蛋白重组质粒PsecTaq2A -AMG在人牙龈成纤维细胞 (GFB)中的表达 ,为牙周再生的基因治疗奠定基础。方法 采用酶解 -组织块法体外培养得到人牙龈成纤维细胞 ,用釉原蛋白重组质粒PsecTaq2A-AMG瞬时转染牙龈成纤维细胞 ,分别在第 4 8小时、第 5天、第 7天、第 14天收集细胞及细胞液 ,经ELISA连续测定釉原蛋白的表达。结果 转染后 4 8小时即检测到表达产物 ,表达量在第 5天和第 7天达到高峰 ,持续到第 14天仍可检测到釉原蛋白的表达。结论 实验结果为利用牙龈成纤维细胞为靶细胞 。

重组质粒PcDNA3.1/sTNFRⅠ在小鼠体内表达的初步研究

目的检测构建的PcDNA3.1/sTNFRⅠ真核表达载体在小鼠体内能否有效表达目的产物,为探索利用该载体基因治疗TNFα介导的炎性疾病奠定一定的实验基础。方法将PcDNA3.1/sTNFRⅠ载体直接注入小鼠胫前肌,ELISA法检测肌肉匀浆中的sTNFRⅠ表达。结果在注射后7d与10d,PcDNA3.1/sTNFRⅠ注射组小鼠肌肉匀浆中sTNFRⅠ表达的量均显著高于PcDNA3.1注射组(P<0.01),注射后第10天sTNFRⅠ表达量高于第7天sTNFRⅠ表达量(P<0.01)。结论采用直接注射法将PcDNA3.1/sTNFRⅠ载体转移入肌肉内可以使目的基因得到一定的表达。

人釉原蛋白重组质粒PcDNA3-AMG在COS-1细胞系中的表达

目的研究人釉原蛋白(AMG)重组质粒PcDNA3-AMG在COS-1细胞系中的表达。方法采用脂质体载体法将釉原蛋白重组质粒PcDNA3-AMG导入COS-1细胞系,用Zeoin筛选得到稳定转染克隆,并经ELISA检测细胞内和细胞培养液中重组釉原蛋白AMG的表达。结果在未经转染的对照组细胞内和细胞培养液中均未检测到AMG的表达,而经转染的实验组不论细胞内或细胞培养液中均检测到AMG的较高表达,重组质粒PcDNA3-AMG转染组细胞内AMG浓度达0.253μg/ml。结论PcDNA3-AMG具有较强的在真核细胞系中表达和分泌AMG的能力,适宜基因工程体外制备重组釉原蛋白。

软件企业应用六西格玛管理体系的研究

六西格玛管理体系是由全面质量管理演变而来的一套卓有成效的企业流程设计、改造和优化的管理体系。六西格玛管理体系由此而闻名于全球,成为世界级优秀企业竞相采用的先进模式。然而在我国IT界,6σ管理体系还鲜为人知,本文提出"软件企业应用六西玛管理体系"的命题并加以分析,以期引起IT业界人士的广泛注意和思考。

一次性全口超声龈下刮治与分区超声龈下刮治疗效比较

目的 比较一次性全口超声龈下刮治和分区超声龈下刮治治疗中度慢性牙周炎的临床疗效和工作效率.方法 48例慢性牙周炎患者随机分为两组: FM-UD组进行一次性全口的超声龈下刮治;QW-UD组分四个区段每隔一周进行一个区段的超声龈下刮治,记录治疗时间和VAS值,并分别在基线、3个月时全口检查和记录探诊出血指数和探诊深度.结果 3个月时两组的BOP%、PD较基线时均有显著下降(P＜0.05),而3个月时BOP%FM-UD组低于QW-UD组 (p＜0.01).VAS值FM-UD组显著高于QW-UD组(p＜0.05),治疗所需时间FM-UD组低于QW-UD组(p＜0.05).结论 FM-UD和 QW-UD两种方法均可有效治疗中度慢性牙周炎, 临床医生可根据实际需要选择合适的治疗方式.