厚唇裂腹鱼性腺发育周期及血清中性激素含量变化

为探明厚唇裂腹鱼的精巢、卵巢周年发育及血清中性激素含量的变化,2020年8月—2021年8月,每月在克孜勒河采样,获得样本共计194尾,采用常规石蜡切片方法对其精巢和卵巢进行观察,以耳石为鉴定材料对厚唇裂腹鱼最小性成熟个体年龄进行研究,选取成熟鱼卵描绘卵径分布判断其产卵类型,采用酶联免疫法测定厚唇裂腹鱼各发育周期的雌二醇和睾酮的质量浓度。试验结果显示:厚唇裂腹鱼精巢和卵巢发育分为6个时期;雄鱼最小性成熟个体年龄为2龄,雌性最小性成熟个体年龄为3龄,精巢发育早于卵巢;厚唇裂腹鱼产卵期在3—5月,卵粒的数量百分比在直径2.9~<3.1 mm时出现峰值,产卵后的Ⅵ期卵巢中极少存在成熟的卵粒,判断其产卵类型为完全同步产卵类型;雌鱼与雄鱼血清中雌二醇和睾酮的质量浓度均在Ⅴ期时达到最高。厚唇裂腹鱼属于完全同步产卵类型,性腺于2017年3—5月发育成熟并产卵,雌二醇和睾酮的质量浓度在厚唇裂腹鱼繁殖期间显著增加。

基于COⅠ基因的5种新疆土著鱼类DNA条形码鉴定及聚类分析

为探讨DNA条形码技术在新疆土著鱼类物种鉴定中的有效性并保护本土渔业重要种质资源,本研究采用DNA条形码技术对裂腹鱼亚科(Schizothoracinae)和高原鳅属(Triplophysa)鱼类进行COⅠ基因序列扩增,并与NCBI数据库进行序列比对,结合遗传距离和系统发育树进行物种鉴定分析。结果表明,33尾个体分属4属5种,其中有13个单倍体;COⅠ基因序列中(G+C) mol%值为46.7%,远小于(A+T) mol%值53.3%,表现出明显的反G偏倚,第三位密码子处的(G+C) mol%值为55.9%,远高于第一和第二密码子处的(G+C) mol%值,R值(转换/颠换)为2.10;种间平均遗传距离(11.55±0.95)%,为种内平均、遗传距离(0.14±0.10)%的43.8倍,远远大于Hebert所提出的“10倍法则”;系统发育树表明,裂腹鱼亚科和高原鳅属鱼类分为两支,其中,裂腹鱼亚科的塔里木裂腹鱼(Schizothorax biddulphi)、宽口裂腹鱼(Schizothorax eurystomus)、扁吻鱼(Aspiorhynchus laticeps)、斑重唇鱼(Diptychus maculatus)的同种不同个体各自独立聚为一支,显示出明显的单系性;高原鳅属中的长身高原鳅(Triplophysa teunis)也独自立为一支,所有物种都被区分开。综上,基于COⅠ基因的DNA条形码技术可以有效鉴定新疆5种土著鱼类。

水温、光周期和光照强度对塔里木裂腹鱼幼鱼存活、摄食和生长的影响及其盐碱耐受能力研究

文章采用实验生态学方法探究了水温、光周期和光照强度对塔里木裂腹鱼(Schizothorax biddulphi)幼鱼存活、摄食和生长的影响,使用Box-Benhnken实验设计法预测幼鱼最佳生长环境条件,并通过单因子静态毒性急性实验法对其盐碱耐受能力进行了研究。结果显示,水温5~25℃时幼鱼成活率均在85%以上;水温20℃时摄食率、体长增长率和特定生长率达到最高;光周期16 L∶8 D或光照强度500 lx时,各水平均达到最高;水温12.98℃、每天光照15.07 h、光照强度670.27 lx时,幼鱼达到理论最佳存活、摄食、生长条件;幼鱼24、48、72和96 h的氯化钠(NaCl)盐度半致死浓度(LC50)分别为4.01、3.62、3.29和2.92 g·L^(−1),安全浓度(SC)为0.89 g·L^(−1);24、48、72和96 h碳酸氢钠(NaHCO3)碱度LC50分别为97.14、86.75、80.26和74.52 mmol·L^(−1),SC为20.75 mmol·L^(−1)。

3个地理群体宽口裂腹鱼形态差异分析

采用多变量形态度量学方法,对托什干河、塔什库尔干河和渭干河宽口裂腹鱼(Schizothorax eurystomus)65尾个体框架结构测量中的31个形态比例指标进行了多元统计分析。结果显示:3个群体在4个可变量上存在显著差异,在12个变量上存在极显著差异。主成分分析前3个主成分贡献率分别为22.28%、13.428%和8.90%,累计贡献率为44.60%;根据前3个主成分构建的散点图显示,3个地理群体不同个体之间有个体发生重叠,3个地理种群并未形成明显的独立组群;聚类分析发现,托什干河群体和塔什库尔干河群体距离最近,最先聚为一支,后与渭干河群体汇为一大支。结果表明,托什干河群体与塔什库尔干河群体最为接近,与渭干河群体存在较大差异。

塔里木裂腹鱼人工繁殖、胚胎发育和早期仔鱼发育研究

为了实现塔里木裂腹鱼(Schizothorax biddulphi)的人工养殖和资源增殖,于2020年进行塔里木裂腹鱼人工繁殖试验,探索塔里木裂腹鱼繁殖时期、雌雄鉴别、人工催产和人工孵化等关键技术,结果显示,催产塔里木裂腹鱼亲鱼44组,获受精卵25.08万粒,获水花鱼苗14.9万尾,其中塔里木裂腹鱼人工催产药物最适浓度为鲤鱼脑垂体(PG) 13.47 mg/kg、马来酸地欧酮(DOM) 15.27mg/kg和促黄体素释放激素A_(2)(LRH-A_(2)) 19.28μg/kg;塔里木裂腹鱼的繁殖期在新疆南疆地区主要集中在4月下旬至6月上旬,塔里木裂腹鱼产微粘沉性卵,成熟卵卵径为(1.7±0.15) mm,吸水膨胀后达(2.8±0.16) mm;其胚胎发育过程经历胚盘、卵裂、囊胚、原肠胚、神经胚、器官形成和出膜7个阶段;在水温19~19.2℃的条件下,受精卵发育经过93 h 36 min孵化,总积温为1 785.24℃·h;初孵仔鱼全长(7.19±0.15) mm,具心跳和血液循环;早期仔鱼发育分为卵黄囊期、弯曲前期、弯曲期和弯曲后期4个时期,出膜后7 d,卵黄囊完全吸收。通过对塔里木裂腹鱼进行人工繁殖试验,掌握催产塔里木裂腹鱼最适药物浓度,描述塔里木裂腹鱼的胚胎和早期仔鱼发育特征,以期进一步丰富塔里木裂腹鱼早期生活史资料,为其资源保护提供基础数据。

新疆克孜勒河厚唇裂腹鱼人工繁殖及胚胎、早期仔鱼发育研究

为实现厚唇裂腹鱼Schizothorax irregularis的人工养殖和资源增殖,于2019年4—5月进行了新疆克孜勒河厚唇裂腹鱼人工繁殖试验,以探究该鱼的繁殖时期、雌雄鉴别、人工催产和人工孵化等关键技术,试验设催产厚唇裂腹鱼亲鱼35组,采用人工干法授精和孵化缸淋浴式孵化方法,获受精卵20.69万粒,获水花鱼苗14.12万尾。结果表明:厚唇裂腹鱼人工催产最适水温为18.5℃,最适孵化水温为17.0~17.5℃;厚唇裂腹鱼的繁殖期在新疆维吾尔自治区南疆地区主要集中在4月下旬—5月中旬,该鱼产微黏沉性卵,成熟卵的卵径为(2.95±0.15)mm,吸水膨胀后卵径为(3.53±0.12)mm;厚唇裂腹鱼胚胎发育过程经历胚盘、卵裂、囊胚、原肠胚、神经胚、器官形成和出膜7个阶段;在水温为(17.14±0.01)℃条件下,受精卵发育经过147 h 31 min孵化,总积温为2513.01℃·h;初孵仔鱼全长(8.72±0.26)mm,具心跳和血液循环,多数时间静卧水底,偶有窜动;早期仔鱼发育分为眼球色素出现期、体色素出现期、鳔充气期和卵黄囊完全吸收期4个时期,出膜后432 h卵黄囊完全吸收,仔鱼全长为(21.51±0.75)mm。本研究结果可为厚唇裂腹鱼的资源保护和人工繁殖提供基础资料和科学依据。

南疆地区四种土著裂腹鱼类幼鱼对氯化钠和碳酸氢钠的急性耐受能力

为了解新疆土著鱼类幼鱼氯化钠和碳酸氢钠胁迫下机体耐受性,本研究采用单因子急性毒性实验法,以斑重唇鱼(Diptychus maculates)、厚唇裂腹鱼(Schizothorax irregularis)、宽口裂腹鱼(S.eurystomus)、重唇裂腹鱼[S.(Racoma)davidi]4种5月龄裂腹鱼幼鱼为研究对象,对其氯化钠和碳酸氢钠的急性耐受能力进行研究。实验结果显示,4种裂腹鱼的24 h和96 h的氯化钠半致死浓度(LC_(50))分别为9.9、12.8、9.3、12.6 g/L和6.5、8.6、6.2、10.0 g/L,安全质量浓度分别为0.7、0.9、0.6、1.0 g/L,氯化钠急性耐受能力为:重唇裂腹鱼>厚唇裂腹鱼>斑重唇鱼>宽口裂腹鱼。4种裂腹鱼的24 h和96 h的碳酸氢钠半致死浓度(LC_(50))分别为112.3、107.2、110.9、86.3 mmol/L和88.5、81.3、94.3、72.1 mmol/L,安全质量浓度分别为8.9、8.1、9.4、7.2 mmol/L,碳酸氢钠急性耐受能力为:宽口裂腹鱼>斑重唇鱼>厚唇裂腹鱼>重唇裂腹鱼。

塔里木裂腹鱼尾鳍细胞系的建立及盐碱度对其增殖的影响

为了建立塔里木裂腹鱼(Schizothorax biddulphi)尾鳍细胞系,本研究采用组织块法,分别用含胎牛血清(FBS)的DME/F12培养基体外培养塔里木裂腹鱼尾鳍组织,初步建立了塔里木裂腹鱼尾鳍细胞系(BICF1)。采用MTT法测定分析盐度(NaCl)和碱度(NaHCO_(3))对其增殖的影响。结果显示,BICF1悬浮培养传至45代,最适培养液为DME/F12,最适FBS浓度为20%,最适温度为25℃。第10代BICF1的群体倍增时间为28.11 h,呈“S”型生长。第6代BICF1液氮冻存180 d后复苏,经台盼蓝染色计数,BICF1有(87.85±0.66)%的细胞具有活性,复苏后可增殖并传代。BICF1无细菌、真菌、支原体污染。第10代BICF1线粒体16S rRNA测序结果与GenBank基因序列进行一致性对比,结果显示,BICF1与JQ844133.1的一致率为100%,表明BICF1来自于塔里木裂腹鱼。BICF1增殖数量在盐度为1、2、4、6时呈上升趋势,在盐度为6、8、10时呈下降趋势;盐度为6时,BICF1增殖数量最高。BICF1增殖数量在碱度为2、3、4、5、6 g/L时呈上升趋势,在碱度为6、7、8、10 g/L时呈下降趋势;碱度为6 g/L时,BICF1增殖数量最高。细胞增殖数量随盐碱度增加呈现先升高后下降的趋势。本研究旨在为合理开发和利用塔里木裂腹鱼遗传资源以及建立和保护其种质资源提供一定的科学依据。

新疆克孜尔河斯氏高原鳅形态学及年龄鉴定研究

2018年在新疆克孜尔河拜城县黑英山乡河段采集30尾斯氏高原鳅(Triplophysa stoliczkae),测量其可数、可量等形态学性状,用偏相关分析方法分析其相关性;比较矢耳石、鳃盖骨和脊椎骨鉴定年龄的效果,研究斯氏高原鳅形态学和年龄。结果表明:斯氏高原鳅背鳍iii-6~8,臀鳍iii-5,胸鳍i-9~11,腹鳍i-5~7,尾鳍分支鳍条13~16,第一鳃弓内侧鳃耙数17~23,脊椎骨数4+35~40;全长与叉长、尾柄长与臀鳍长之间呈极显著相关;体长-体质量的关系式为W_(♂)=0.0001L^(3.1594),W_(♀)=0.0001L^(3.1157),W_(♂+♀)=8E-05L^(3.2343)。在3种年龄鉴定材料中,耳石是斯氏高原鳅年龄鉴定的最佳材料,判别能力达到95.65%;脊椎骨可作为辅助鉴定材料,判别能力52.17%;鳃盖骨无明显可辨的年轮标志。本研究丰富了斯氏高原鳅生物学研究内容,对其种群生物资源保护与利用具有重要指导意义。

新疆克孜勒河浮游生物群落特征及其与环境因子关系

为探明克孜勒河浮游生物群落结构及生态环境现状,于2020年5月(丰水期)和9月(枯水期)对克孜勒河上、中、下游的水体理化指标和浮游生物进行采样分析,结果表明:浮游植物有4门28种,主要为硅藻门和绿藻门,分别占总种类数的71.43%和14.29%;浮游动物3类14种,其中轮虫有7种,原生动物4种,桡足类3种;克孜勒河丰水期优势生物有水绵(Spirogyra communis)、表壳虫(Arcella sp.)和懒轮虫(Rotaria tardigrada);枯水期优势生物主要为水绵(Spirogyra communis)、长圆舟形藻(Navicula oblonga)、扁圆舟形藻(Navicula simplex)、胡梨壳虫(Nebela barbata)和表壳虫(Arcella sp.),浮游生物群落结构趋于简单化;枯水期浮游植物和浮游动物平均密度和平均生物量均高于丰水期;克孜勒河浮游生物Shannon多样性指数在丰水期为1.83,属于中等污染;在枯水期为2.27,属于轻度污染;冗余分析显示,pH、透明度和氨氮是影响克孜勒河浮游植物群落结构的重要环境因子,pH、总磷和总氮是影响浮游动物群落结构的主要环境因子。本研究可为克孜勒河水资源保护提供基础数据。