人高迁移率组蛋白B 1对人卵巢癌耐药株A2780/DDP细胞迁移及侵袭的影响

目的探讨人高迁移率组蛋白B 1(HMGB1)靶向糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)对卵巢癌耐药株A2780/DDP细胞迁移及侵袭能力作用的影响。方法实验分为对照组(A2780细胞正常培养)、顺铂耐药组(A2780/DDP细胞培养在含1μg·mL-1顺铂的培养基)、转染对照组(A2780/DDP细胞转染si-NC)、siHMGB1组(A2780/DDP细胞转染siRNA-HMGB1)。Transwell细胞迁移、侵袭实验检测细胞的迁移和侵袭能力。蛋白质印迹法检测细胞中HMGB1、GSK-3β、p-GSK-3β、E-cadherin及Vimentin的蛋白表达水平。结果顺铂耐药组、转染对照组、siHMGB1组的迁移细胞数分别为(249.70±5.47)、(239.30±4.91)和(44.00±2.08)个;细胞的侵袭细胞数分别为(212.70±7.69)、(218.70±10.11)和(44.33±2.67)个;HMGB1蛋白相对表达水平分别为1.00±0.12、0.95±0.02和0.22±0.03;p-GSK-3β蛋白相对表达水平为1.00±0.15、0.97±0.11和0.38±0.09;Vimentin蛋白相对表达水平为1.00±0.17、1.01±0.19和0.31±0.13;E-cadherin的蛋白表达水平为1.00±0.14、1.13±0.15和2.55±0.31,siHMGB1组的上述指标与顺铂耐药组、转染对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论人卵巢癌A2780/DDP细胞中高表达的HMGB1靶向GSK-3β促进细胞发生上皮间质转化(EMT)增强细胞的迁移及侵袭的能力。

切除修复交叉互补基因1调控卵巢癌耐药株A2780/顺铂迁移及侵袭的作用

目的探讨切除修复交叉互补基因1(ERCC1)调节卵巢癌耐药株A2780/顺铂(DDP)细胞迁移及侵袭能力的作用及其机制。方法根据细胞对顺铂的耐药性,分为普通组A2780、顺铂耐药组A2780/DDP。细胞计数试剂盒(CCK-8)检测A2780、A2780/DDP细胞活性及顺铂耐药性。Transwell细胞迁移、侵袭实验检测A2780、A2780/DDP细胞的迁移和侵袭能力。蛋白质印迹法(Western blot)检测A2780、A2780/DDP细胞中ERCC1、上皮表型E-钙黏蛋白(E-cadherin)及间质表型波形蛋白(Vimentin)的表达。小干扰RNA(siRNA)-ERCC1转染A2780/DDP中ERCC1表达后,Transwell细胞迁移、侵袭实验检测细胞迁移和侵袭能力的改变,Western blot检测细胞中ERCC1、E-cadherin及Vimentin表达的改变。两组间比较采用Student’s-t检验。结果A2780/DDP的半抑制浓度(IC50)值为17.66 mg/L,A2780的IC50值为2.236 mg/L,A2780/DDP较A2780的IC50提高了7.898倍。A2780/DDP细胞的迁移和侵袭能力明显高于非耐药株,且A2780/DDP中ERCC1和间质表型Vimentin的表达明显高于非耐药株A2780,而上皮表型E-cadhetin表达明显低于A2780。干扰A2780/DDP中ERCC1表达后,细胞的迁移和侵袭能力明显低于对照组,且细胞中ERCC1和间质表型Vimentin的表达低于对照组,而上皮表型E-cadhetin表达高于对照组。结果差异均有统计学意义。结论A2780/DDP中高表达的ERCC1通过促进细胞发生上皮-间充质转化增强细胞的迁移及侵袭的能力。