VEGF基因沉默对肝癌HepG2细胞侵袭和迁移的影响

目的观察VEGF基因沉默对人肝癌细胞株HepG2迁移和侵袭的影响。方法采用siRNA技术沉默HepG2细胞内血管内皮细胞生长因子(VEGF)基因。体外成功构建针对VEGF的3种siRNA表达载体和1个阴性对照,分别命名为pGenesil-1-VEGF-shRNA-1、2、3和pGenesil-1-VEGF-shRNA-scramble。Lipofectamine 2000介导转染HepG2,用RT-PCR筛选出沉默效果最好的siRNA片断(pGenesil-1-VEGF-shRNA-2),将其重组质粒转染HepG2(观察组),以空质粒细胞(空载组)和空白细胞(空白组)作为对照。采用细胞创伤愈合试验、Transwell小室体外侵袭试验分别检测三组细胞迁移、侵袭能力。结果细胞创伤愈合试验显示,观察组细胞迁移速度为(3.02±0.03)μm/h,显著慢于空载组的(8.67±0.02)μm/h和空白组的(8.78±0.03)μm/h,P均<0.05;细胞侵袭试验显示,观察组穿膜细胞数为(14.0±1.3)个,显著低于空载组的(35.0±2.3)个和空白组的(36.0±2.5)个,P均<0.05。结论 VEGF基因沉默可抑制肝癌细胞株HepG2的迁移和侵袭能力。

慢性乙肝病毒感染者血清血管内皮生长因子的研究

目的:检测慢性乙型肝炎病毒感染患者血清中血管内皮生长因子(VEGF)的水平,探讨其临床意义。方法:采用双抗体夹心ELISA法对50例肝细胞癌、40例乙型肝炎肝硬化、36例乙型肝炎肝纤维化、40例慢性乙型肝炎患者血清中VEGF进行检测,并以43例健康者作为对照。同时采用全自动生化分析仪检测所有人员的肝功能常规指标。结果:慢性乙型肝炎、肝纤维化、肝硬化、肝细胞癌组患者血清VEGF浓度明显高于正常对照组(P<0.01,P<0.05,P<0.05,P<0.05),同时四组患者之间比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。四组患者血清VEGF水平与肝功能指标AST、ALT无相关性,与GGT成正相关(r=0.337,P<0.05)。结论:VEGF与慢性乙型肝炎病毒感染者病情密切相关,可作为病情发展动态监测的指标。VEGF与GGT联合检测,可显著提高肝细胞癌的检出率。

闽东地区77222例抗-HCV检测结果调查分析

目的了解闽东地区人群丙型肝炎病毒(HCV)感染的性别、年龄分布状况及变化趋势。方法酶联免疫吸附法(ELISA)检测抗丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV),χ2检验进行统计分析。结果本地区HCV感染阳性率平均为0.27%,男性和女性分别为0.29%和0.26%,未成年人、成年人和老年人分别为0.07%、0.30%和0.23%,2010年至2012年,HCV感染阳性率呈下降趋势,2013年略有增高。结论 HCV感染者性别、年龄分布有一定规律,可为丙型肝炎的预防、诊断和治疗提供参考。

血清CEA、CY21-1、NSE检测对原发性肺癌治疗后复发的诊断价值

目的探讨癌胚抗原(CEA)、细胞角蛋白19片段(CY21-1)、神经特异性烯醇化酶(NSE)3种标志物对原发性肺癌治疗后复发的诊断指导意义。方法回顾性分析我院2000—2005年268例原发性肺癌患者的CEA、CY21-1和NSE浓度变化。结果肺鳞癌CY21-1增高明显,肺腺癌CEA增加明显,小细胞肺癌NSE增加明显,联检阳性率比单项检查阳性率高。结论联合检测CEA、CY21-1、NSE对于诊断肺癌复发具有重要临床意义。

PKCθ激活γδT细胞转录因子NF-κB的作用

目的:探讨经T细胞受体(TCR)途径激活人γδT细胞时,新型蛋白激酶PKCθ在促进转录因子NF-κB活化中的作用。方法:常规分离健康人外周血单个核细胞(PBMC),用结核杆菌耐热性多肽抗原(MtbAg)诱导扩增,获得Vγ9Vδ2 T细胞富集的细胞群(MtbAT)。PKCθ抑制剂(Rottlerin)预处理MtbAT,抗CD3单克隆抗体(mAb)刺激后收集细胞,通过电泳迁移率变动分析(EMSA)检测转录因子NF-κB活性变化;经流式细胞术(FCM)检测T细胞活化分子CD69的表达情况。结果:γδT细胞经抗CD3 mAb刺激,NF-κB活性增强;Rot-tlerin预处理使抗CD3 mAb诱导的NF-κB活化程度显著减弱,并抑制T细胞活化分子CD69的表达。结论:PKCθ在人γδT细胞经TCR途径激活NF-κB过程中具有重要作用。

我国商业银行金融营销发展策略研究

随着全球环境问题的日益严峻和社会对可持续发展的强烈呼唤,商业银行作为金融机构,在推动经济可持续发展方面扮演着重要角色。金融营销发展策略研究能够帮助商业银行更好地适应和满足可持续发展需求。政府政策的引导和监管的支持对商业银行的绿色金融和可持续发展产生了积极影响。政府提出的相关政策和标准,激励商业银行在金融营销中关注绿色金融和可持续发展领域,从而提高市场认可度和竞争力。

基于DSP系统的视觉伺服涂胶机器人设计

当前涂胶机器人存在涂胶胶线不均匀、工件涂胶路径设定较复杂等缺点。文章使用动态数字图像采集和图像处理技术实现实时捕获图像;将获取图像转换成匹配特征矢量,通过与标准图库进行比较正确判断工件型号;引入零件骨架提取和零件骨架拟合,实现零件信息矢量化;将视觉伺服应用于涂胶过程中,把视觉系统嵌入涂胶机器人系统的反馈回路中,实现机器人高精度控制;在图像信息中进行胶线曲线提取,使用形态学的方法进行胶线曲线细化,得到胶线骨架信息,判断胶线闭合性,检测胶线的质量。实验证明,所设计的算法效率较高,所研制的系统功能强、效果好。

去甲斑蝥酸钠的红外吸收光谱与质谱特征

合成样品的红外吸收光谱、质谱分析表明合成样品符合去甲斑蝥酸钠的结构特征.

吸收放散试验以及抗体增强方法在ABO疑难血型鉴定中的有效性研究

目的分析ABO疑难血型鉴定中吸收放射试验及抗体增强方法的应用效果。方法选取2020年1—7月南京市溧水区人民医院32例ABO血型鉴定正反定型不符血标本,采用吸收放射试验、抗体增强方法,分析ABO血清抗体效价降低、抗原减弱及亚型检测结果,同时分析血清中含冷凝集素检测结果。结果21例患者中,A、B、AB抗原减弱分别为10例、4例和2例,A、B亚型分别为3例、2例。3例A亚型、2例B亚型患者分别检测出IgM型抗A不规则抗体、IgM型抗B不规则抗体。ABO血型抗原减弱凝集强度为MF~1+,对患者红细胞行吸收放射检验,凝集强度增加至2+~3+;A型血患者血清抗A抗体、抗B抗体出现效价降低2例,O型血患者血清中抗B抗体及抗AB抗体出现效价降低2例,B型血患者血清中抗A抗体、抗B抗体出现效价降低2例,ABO血型正反定型相符;冷凝集素效价为1∶256~1∶4096共5例样本,于室温环境下,红细胞、ABO型试剂红细胞及血清出现1+~4+凝集反应;于温度为37℃环境中进行水浴,并维持5 min后,2例冷凝集素效价为1∶256~1︰512的血液样本可见凝集消失,3例1∶1024~1∶4096的血液样本中仍可见±~1+弱凝集反应,将其放置于温度为4℃冰箱中,对冷凝集素进行吸收,可见冷凝集素消失,不规则抗体筛查结果呈现阴性,ABO血型正反定型相符。结论ABO疑难血型鉴定中吸收放射试验及抗体增强方法的应用效果显著,吸收放射试验可初步纯化抗体,并具有浓缩血清作用,抗体增强方法可增加低效价抗体凝集强度。

Trim6结合并降解接头蛋白TAB2抑制NF-κB活化

观察Trim6是否与接头蛋白TAB2存在蛋白相互作用,进而影响TAB2介导的NF-κB荧光素酶报告基因的活化。在HEK293T细胞中共转染Trim6及TAB2的真核表达载体,免疫共沉淀法验证两者是否存在蛋白相互作用;用蛋白印迹法验证Trim6是否能降解TAB2;同时用双荧光素酶报告基因系统检测Trim6是否影响TAB2介导的NF-κB荧光素酶报告基因活化。免疫共沉淀结果证明Trim6与TAB2存在蛋白相互作用;蛋白印迹检测发现Trim6能显著降解TAB2,进而明显抑制TAB2介导的NFκB荧光素酶报告基因的活化。

小鼠Trim30α人同源基因的生物信息学筛选及初步鉴定

目的 通过生物信息学方法寻找Trim30α的人同源基因,观察候选Trim蛋白对TAB2诱导的NF-κB荧光素酶报告基因活性的影响.方法 经MEGA4软件对具有RBCC和SPRY结构域的Trim分子行进化树分析,用DNAMAN 6.0软件对候选Trim与Trim30α进行氨基酸序列比对,比较Trim30α相毗邻基因在小鼠和人染色体上的排列分布规律.构建Trim22的真核表达载体,用双萤光素酶报告基因系统检测Trim22对TAB2诱导的NF- κB报告基因活化的影响.结果 Trim30α与人Trim5α.、Trim6、Trim22、Trim34α来自进化树的同一分支节点；Trim22、Trim5α与Trim30α的氨基酸序列同源性分别为42.51％、45.47％；Trim22可以抑制TAB2诱导的NF-κB报告基因的活化,而Trim5α无显著抑制作用.结论 Trim22对TAB2诱导的NF-κB报告基因活化有负向调节作用,可能与Trim30α具有相类似的生物学功能.

寡聚蛋白Trim34α对NF-κB报告基因的负向调节作用

目的构建人Trim34α的真核表达载体，观察其对接头蛋白TAB2诱导的NF-κB启动子荧光素酶报告基因活性的影响。方法以HeLa细胞eDNA为模板扩增Trim34α全长基因，克隆到5’-Flag-peDNA3．1（＋），并通过酶切、菌落PCR及测序进行鉴定。转染HEK293T细胞，蛋白印迹检测Trim34α蛋白的表达特点，双荧光素酶报告基因系统检测Trim34α对TAB2诱导的NF-κB报告基因活化的影响。结果经鉴定成功构建Trim34α真核表达载体，该载体表达的Trim34α蛋白能相互聚集形成寡聚体（Trim小体）；Trim34α可显著抑制TAB2诱导的NF-κB荧光素酶报告基因活化。结论Trim34α可以在胞内形成寡聚体，Trim34α能显著抑制TAB2诱导的NF-κB报告基因活化。

PKCθ在活化诱导T细胞死亡中的作用

为初步探讨PKCθ在αβT细胞活化诱导细胞死亡(AICD)中的作用,采用PKCθ选择性阻断剂Rottlerin(粗糠柴毒素)预处理,抗CD3单抗再刺激αβT细胞,分别选用流式细胞术AnnexinV/PI法检测细胞早期凋亡,琼脂糖凝胶电泳检测细胞晚期凋亡。结果表明,抗CD3单抗刺激6 h后,αβT细胞早期凋亡率为28.27%±2.96%;Rottlerin(10μmol/L)预处理组,αβT细胞早期凋亡率为17.30%±2.30%。用抗CD3单抗刺激αβT细胞12 h后,出现较明显的DNA梯形条带,18 h后DNA梯形条带明显增强;用Rottlerin预处理后,DNA梯形条带明显减弱。提示PKCθ信号通路参与αβT细胞AICD的发生。

过敏性皮肤病患者血清过敏原检测分析

目的了解本地区过敏性皮肤病患者过敏原的种类,为诊断和预防过敏性皮肤病提供依据。方法用免疫印迹法检测120例过敏性皮肤病患者血清总IgE及特异性IgE,对检测结果进行分析。结果 120例中有90.8%的患者血清总IgE升高,所有患者均检出至少1种过敏原;户尘螨、屋尘、桑树、猫毛皮屑、狗毛皮屑、蟑螂、鸡蛋白、牛奶等均可成为过敏原而引起过敏性皮肤病,其中户尘螨、蟑螂和混合霉菌最为常见。结论不同地区过敏原存在差异,诊断单纯依靠过敏原检测有可能造成漏诊,应依据相关实验室检查并结合病史和临床表现进行。

类风湿因子与抗环瓜氨酸肽抗体联合检测对类风湿关节炎诊断的意义

目的研究类风湿因子（rheumatoid factor，RF）和抗环瓜氨酸肽抗体（anti—cyclic cirtrullinated peptide，抗-CCP）联合检测在类风湿关节炎（rheumatoid arthritis，RA）诊疗中的价值。方法2010年1月-2013年5月收集RA患者327例，空腹取静脉血3-5ml，采用ELISA检测抗-CCP，用速率散射比浊法检测RF。比较不同检测方法对患者诊断的敏感性与特异性。计量资料采用t检验，计数资料采用，检验，P〈0．05为差异有统计学意义。结果RF联合抗-CCP（RF、抗-CCP有一项阳性）检测的阳性率（90．2％）显著高于单纯RF（70．0％）和抗-CCP检测（59．3％），也高于RF＋抗-CCP（RF、抗-CCP均为阳性）阳性率（39．1％），两两比较差异均有统计学意义（均P〈0．05）。RF检测对RA诊断的特异性为84．4％，抗-CCP为95．8％，两者联合检测为96．6％，两者联合检测特异性高于单纯检测，两两比较差异均有统计学意义（均P〈O．05）。结论抗-CCP、RF联合检测可提高对RA诊断的敏感性和特异性。