脓毒性心肌病发病机制研究进展

脓毒症是人体对炎症反应失调引起机体系统或器官功能障碍,如果不能早期识别及时治疗,将导致休克、多器官功能衰竭,甚至死亡。具有高发病率、高病死率的特点,已成为急危重症患者死亡的第一大原因。脓毒性心肌病(sepsis cardio myopathy, SCM)是脓毒症引起的常见的并发症之一,导致可逆性的左心室收缩功能障碍,引起心输出量下降、休克、左心室扩张伴或不伴有右心衰竭,使脓毒症患者死亡率增加至70%~90%,是脓毒症患者主要死亡原因之一。目前,脓毒性心肌病的发病机制尚无统一阐述,但深入研究脓毒性心肌病的发病机制,发现其潜在的治疗靶点,可能会降低脓毒性心肌病患者的死亡率,为临床带来福音。脓毒性心肌病的发病机制多样且尚无统一阐述,本文将从氧化应激、线粒体自噬、钙稳态失衡、炎性细胞因子、一氧化氮、Toll样受体、免疫抑制等以上方面对脓毒性心肌病的发病机制进行综合论述。

HPLC法测定大鼠血浆中葛根素含量

目的:建立反相高效液相色谱法测定大鼠血浆中的葛根素浓度。方法:取大鼠血浆,加入乙腈沉淀蛋白,吸取上清液N2吹干,残渣用20μL流动相溶解后进行HPLC分析。DiamonsilODSC18色谱柱,流动相为甲醇:水:磷酸盐缓冲液(20:78:2,v:v:v),流速:1.0mL/min,荧光检测器激发波长470nm,发射波长350nm。结果:葛根素标准曲线在(50～600)ng/mL内线性关系良好(r=0.9992,n=7)。日内和日间精密度RSD均在10%内,低、中、高3种浓度下样品的回收率均>95%。结论:该方法准确,无干扰,可用于药代动力学研究。

青海大学医学院本科实验教学改革探索与实践

生物化学是生物学领域各专业学生必修的一门重要专业基础课，是学习其他相关专业课的基础。生物化学实验是学好本课程的关键环节。结合生物化学实验教学的现状，从培养适应社会发展所需要的高素质人才角度出发，在生物化学实验课教学改革上进行了一些初步的尝试。实践证明，这样的改革可提高生物化学实验课的教学质量。

盐酸川芎嗪通过干预GABAR和FOXP2的表达保护低压低氧大鼠学习记忆

目的探讨盐酸川芎嗪对低压低氧大鼠学习记忆功能的影响及其作用机制。方法将120只SD大鼠随机分为2组,低氧对照组(5 500 m)、低氧药物组(5 500 m),按时间段不同又分为1 d、3 d、7 d、15 d、30 d组,每组12只;对照组和药物组在模拟海拔5500 m的低压氧仓造模,对照组腹腔注射生理盐水,药物组用同样的方法注射盐酸川芎嗪进行干预。用Morris水迷宫实验检测大鼠行为学变化;Western blot检测大鼠海马GABAAα1R、GABAB1R、FOXP2表达情况。结果(1)通过计算对照组和药物组定位航行实验中的总路程和穿越平台次数可以得出,两组1 d结果差异无统计学意义(P>0.05),从3 d组开始,药物组总路程较对照组逐渐缩短(P<0.01),而穿越中心平台次数较对照组逐渐增多(P<0.01);(2)Western blot检测海马GABAAα1R受体,不同时间段对照组与药物组海马中该受体表达差异无统计学意义(P>0.05);GABAB1R受体和FOXP2蛋白,1 d对照组药物组表达没有差异,从3 d组开始,对照组该受体和蛋白表达量均低于药物组(P<0.05);(3)对照组海马中GABAB1R与水迷宫总路程呈负相关(r=-0.738,P<0.05);对照组海马中FOXP2蛋白与水迷宫总路程呈负相关(r=-0.693,P<0.05);对照组海马中GABAB1R、FOXP2蛋白表达呈正相关(r=0.834,P<0.05)。结论盐酸川芎嗪对低压低氧大脑学习记忆能力起到一定的保护作用,其机制可能与增加大鼠脑内递质GABAB1R和蛋白FOXP2表达量有关。

局灶性脑缺血预处理上调大鼠梗死区周围巢蛋白的表达

目的观察局灶性脑缺血预处理(IP)对巢蛋白(NESTIN)表达的影响,探讨NESTIN与脑缺血耐受(BIT)的关系及可能的内源性神经保护机制。方法 45只SD雄性大鼠随机分为脑缺血预处理(CIP)组、大脑中动脉阻塞(MCAO)组、假手术(sham)组。采用TTC染色测定脑梗死体积,光镜下观察脑组织病理改变,免疫组织化学染色和图像分析评价各组NESTIN的表达。结果再灌注24及72 h,CIP组脑梗死体积比分别为12.4%±3.2%、9.8%±1.9%,较MCAO组的18.5%±3.7%、15.8%±3.5%明显减小(P<0.05),免疫组化NESTIN阳性细胞数及Western blot测定缺血侧脑组织的NESTIN蛋白表达水平,均高于同时间段的MCAO组(P<0.05)。结论 CIP可有效减小局灶性脑缺血再灌注后的脑梗死体积,并促进梗死区周围脑组织表达敏感的胚性蛋白NESTIN,后者可能与BIT的脑保护机制有关。

miR-873与miR-525对血红素加氧酶-1的调控作用

本文抑制miRNA的表达后,检测血红素加氧酶-1(HO-1)的表达,证明HO-1的表达受miRNA的调控。之后用生物信息学软件预测与HO-1基因作用的miRNA的种类、作用的位点。构建验证质粒,使用荧光素酶报告基因的方法,验证miR-873-5p及miR-525-5p能够直接作用于HO-1基因的3′UTR区域,抑制HO-1的表达。

藏药丹葛颈舒胶囊中丹参酮ⅡA的RP-HPLC测定法建立

目的建立藏药丹葛颈舒胶囊中丹参酮ⅡA的含量测定方法。方法采用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)摸索实验条件,建立藏药丹葛颈舒胶囊中丹参酮ⅡA的RP-HPLC测定法。结果该方法的线性范围为2.0～64.0 mg.L-1,r为0.9998,平均回收率为102.14%,RSD为1.22%。结论本法简便、准确、重现性好,可用于藏药丹葛颈舒胶囊的质量控制。

TRPC_3参与缺氧诱导人脐静脉血管内皮细胞凋亡

目的:探讨瞬时受体电位通道蛋白3(TRPC3)在缺氧诱导人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)凋亡中的作用。方法:采用HUVECs细胞株,复苏传代后计数稀释,接种于6孔培养板中,实验组分为常氧对照组(5%CO2+95%空气)和缺氧组(1%O2+5%CO2+94%N2),处理24h后,应用实时荧光定量RT-PCR法及WesternBlot法检测TRPC3mRNA和蛋白水平的表达变化。构建靶向TRPC3基因的siRNA和无关序列质粒表达载体,分别转染至HUVECs,缺氧处理后再用四甲基偶氮唑盐比色法(Methods the tetrazolium,MTT)检测各组细胞存活率,Hoechest33342荧光染色观察细胞凋亡。结果:缺氧处理24h,HUVECs中TRPC3mRNA和蛋白表达明显升高,细胞存活率为67.4%,与常氧对照组有显著性差异(P<0.05);缺氧+TRPC3干扰组细胞存活率为92.7%,与缺氧组有显著性差异(P<0.05);缺氧+TRPC3假干扰组与缺氧组无显著性差异(P>0.05)。荧光显微镜下观察,常氧对照组胞核均匀蓝染;缺氧处理组和缺氧+TRPC3假干扰组胞核明显固缩、凝聚,可见凋亡小体;而缺氧+TRPC3干扰组胞核均匀蓝染。结论:TRPC3参与缺氧诱导HUVECs凋亡。

融合蛋白TOP_3原核表达载体的构建、表达及纯化研究

目的:利用HIV病毒TAT蛋白转导结构域、人缺氧诱导因子1α氧依赖降解结构域以及CASPASE3构建融合蛋白的原核表达载体,并在大肠杆菌中表达及纯化。方法:分别构建原核表达质粒pET-28a(+)-TAT、pET-28a(+)-TAT-ODD、pET-28a(+)-TAT-ODD-CASPASE3(pET-28a(+)-TOP3);在大肠杆菌BL21(DE3)pLysS内,利用镍-亚硝胺乙酸-组氨酸(Ni-NTA-His)亲和层析法对重组蛋白TOP3进行纯化。结果:成功构建了pET-28a(+)-TOP3的原核表达载体,经过优化表达和纯化条件,融合蛋白在IPTG诱导下获得特异性表达,纯化得到了高纯度的目的蛋白。结论:融合蛋白TOP3的成功表达及纯化,为该融合蛋白应用于肿瘤的治疗研究奠定了理论基础。

M_3受体在低氧引起H9c2细胞损伤中的作用及其机制

目的探讨M3受体激动对低氧诱导H9c2细胞损伤的作用及机制。方法采用三气培养建立H9c2细胞低氧损伤模型。实验组分为对照组(A)、低氧组(B)、CCh+低氧组(C)、4DAMP+CCh+低氧组(D)。采用CCK-8法测定细胞存活率,通过流式细胞术检测H9c2细胞凋亡情况;Western blot法检测凋亡蛋白Caspase-3、抗凋亡蛋白Bcl-2及HIF-1α和HO-1的表达。结果 M_3受体激动剂CCh(10mmol/L)可减少低氧诱导的心肌细胞损伤,并可增加心肌Bcl-2、HIF-1α、HO-1的表达,减少Caspase-3表达。但预先应用4DAMP(10nmol/L)阻断M3受体可逆转胆碱作用。结论激动M3受体对低氧诱导H9c2细胞的损伤有保护作用,其机制可能与HIF-1α、HO-1的表达增加有关。

塔斯品碱在Caco-2细胞模型中的吸收机制研究

目的研究塔斯品碱在Caco-2细胞模型中的吸收机制。方法用Caco-2细胞单层模型研究塔斯品碱的双向转运,考察时间、药物质量浓度对塔斯品碱吸收的影响。采用高效液相色谱法检测塔斯品碱的质量浓度,计算其表观渗透系数(Papp)。结果塔斯品碱在Caco-2细胞模型中,从单层细胞层顶端到基底端的转运与基底端到顶端的转运大致相同。结论塔斯品碱在Caco-2细胞模型中的吸收主要是被动转运。

红细胞特异性δ-氨基γ-酮戊酸合成酶转基因小鼠尿液代谢组学分析

目的通过对红细胞特异性δ-氨基γ-酮戊酸合成酶(5-aminolevulinic acid synthtase E,ALASE)转基因小鼠尿液代谢组学的研究,探究转基因小鼠尿液代谢组学上的变化及其意义。方法应用超高液相-四极杆-飞行时间/质谱检测分析系统,采用主成分分析和偏最小二乘-判别分析方法,筛选出差异性的物质。结果将3月龄的雌性转基因小鼠及其同窝阴性鼠的尿液进行聚类分析,发现了23种可能成为该小鼠模型特异性代谢产物。结论 ALASE转基因小鼠代谢状态通过代谢组学方法可以得到很好的体现,因而代谢组学技术为转基因小鼠的研究提供了良好的研究手段。

lncRNA TDRG1、miR-194-3p在直肠癌组织中的表达变化及其对直肠癌细胞凋亡和放疗敏感性影响观察

目的观察长链非编码RNA睾丸发育相关基因1(lncRNA TDRG1)、微小RNA-194-3p(miR-194-3p)在直肠癌组织中的表达变化,及其对直肠癌细胞凋亡、放疗敏感性的影响。方法收集直肠癌组织及癌旁组织,采用RT-qPCR法检测直肠癌组织及癌旁组织中lncRNA TDRG1、miR-194-3p。使用Lnc Base Predicted v.2在线预测网站分析lncRNA TDRG1的靶基因,采用双荧光素酶报告基因实验验证lncRNA TDRG1的靶基因。取人直肠癌细胞系SW1643分别转染si-TDRG1、si-NC、miR-194-3p mimics、miR-NC、si-TDRG1+anti-miR-194-3p、si-TDRG1+anti-miRNC,记为si-TDRG1组、si-NC组、miR-194-3p组、miR-NC组、si-TDRG1+anti-miR-194-3p组、si-TDRG1+anti-miR-NC组,采用流式细胞术测算各组细胞凋亡率,采用Western blotting法检测各组细胞中Bcl-2、Bax蛋白表达,采用克隆形成实验测算各组细胞放疗敏感性[以细胞存活分数、放射增敏比(SER)表示]。结果直肠癌组织中lncRNA TDRG1的相对表达量高于癌旁组织,miR-194-3p的相对表达量低于癌旁组织(P均<0.05)。转染WT-TDRG1、miR-194-3p mimics的SW1643细胞荧光素酶活性低于转染WT-TDRG1、miR-NC的SW1643细胞(P<0.05)。siTDRG1组细胞凋亡率高于si-NC组,miR-194-3p组细胞凋亡率高于miR-NC组,si-TDRG1+anti-miR-194-3p组细胞凋亡率低于si-TDRG1+anti-miR-NC组(P均<0.05)。si-TDRG1组Bcl-2蛋白相对表达量低于si-NC组,Bax蛋白相对表达量高于si-NC组(P<0.05);miR-194-3p组Bcl-2蛋白相对表达量低于miR-NC组,Bax蛋白相对表达量高于miR-NC组;si-TDRG1+anti-miR-194-3p组Bcl-2蛋白相对表达量高于si-TDRG1+anti-miR-NC组,Bax蛋白相对表达量低于si-TDRG1+anti-miR-NC组(P均<0.05)。si-TDRG1组、si-NC组细胞存活分数分别为0.330、0.657,SER为2.016;miR-194-3p组、miR-NC组细胞存活分数分别为0.370、0.669,SER为1.913;si-TDRG1+anti-miR-194-3p组、si-TDRG1+anti-miR-NC组细胞存活分数分别为0.547、0.320,SER为0.574。结论直肠癌组织中lncRNA TDRG1高表达、miR-194-3p低表达;干扰lncRNA TDRG1可能是通过靶向miR-194-3p促进直肠癌细胞凋亡、提高放疗敏感性。

激活M_3受体减轻CoCl_2诱导的大鼠心肌细胞系H9c2低氧损伤

目的探讨卡巴胆碱(CCH,毒蕈碱受体亚型3特异性激动剂)激活毒蕈碱受体亚型3(M_3-mAChR)在氯化钴(CoCl_2)诱导的大鼠心肌细胞系H9c2低氧损伤中的作用及机制。方法正常大鼠心肌细胞系H9c2作为对照组,利用CoCl_2建立低氧损伤模型,选用M_3受体特异性激动剂CCH及其特异性阻断剂4-二苯乙酰氧基-N-甲基-哌啶甲碘化物(4-DAMP)对低氧损伤组进行干预。噻唑蓝比色法(MTT)检验细胞增殖活力;流式细胞计量术检测细胞凋亡;Western blot检测M_3受体、HIF-1α、HO-1和caspase-3蛋白表达水平。结果低氧模型组细胞凋亡率显著增高(P<0.01),细胞增殖显著降低(P<0.01);HIF-1α、caspase-3和HO-1蛋白表达水平显著上调(P<0.01)。用CCH干预后细胞凋亡率明显下降(P<0.01),细胞增殖活力明显增加(P<0.01);M_3受体、HIF-1α和HO-1蛋白表达水平显著上升(P<0.01);caspase-3蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。应用4-DAMP干预后,由CCH介导的上述相关作用被抑制。结论 CCH激活M_3受体抑制CoCl_2诱导的大鼠心肌细胞系H9c2的低氧损伤,机制可能与HIF-1α和HO-1的蛋白表达水平上调有关。

藏药德孜阳新醇提物对胃癌细胞SGC-7901迁移的影响

目的通过体外细胞实验探讨藏药德孜阳新(DZYX)醇提物对胃癌细胞SGC-7901迁移的影响,并探讨其可能的作用机制,为藏药DZYX的临床应用提供理论依据。方法采用CCK-8法检测药物作用后的细胞活性;采用RTCA实验、Wound healing实验、Transwell实验探讨DZYX醇提物对胃癌细胞SGC-7901迁移的影响;利用共聚焦显微镜观察被DZYX醇提物作用后的细胞骨架变化;用Western Blot法检测被DZYX醇提物作用胃癌细胞后其信号通路蛋白p-AKT、p-mTOR及迁移相关蛋白MMP-2表达水平。基于转录组学进一步验证DZYX醇提物对胃癌细胞迁移的影响,并初步探究DZYX抗胃癌作用的可能机制。结果CCK-8结果显示,DZYX醇提物呈浓度依赖性抑制SGC-7901细胞的增殖(P<0.05);RTCA实验结果表明,不同浓度DZYX醇提物均能抑制SGC-7901迁移,并呈浓度依赖性(P<0.05);Wound healing实验结果显示,DZYX醇提物组伤口愈合率下降;Transwell实验结果显示,药物组迁移细胞数量明显减少(P<0.05);细胞骨架染色结果显示,DZYX醇提物能够影响SGC-7901细胞中肌动蛋白的聚合,抑制微丝形成,重塑细胞骨架;Western Blot结果显示,DZYX醇提物处理胃癌细胞SGC-7901后,PI3K/AKT信号通路中的关键蛋白p-AKT、p-mTOR的表达水平均下降(P<0.05),DZYX醇提物可抑制胃癌细胞SGC-7901中的MMP-2蛋白表达。转录组学结果进一步验证了DZYX醇提物对胃癌细胞迁移的影响,GO功能注释及KEGG通路富集结果显示,DZYX醇提物抗肿瘤机制主要与PI3K/AKT信号通路有关。结论DZYX醇提物可抑制胃癌细胞SGC-7901迁移,作用机制与PI3K/AKT信号通路有关。

基于Rho/Rho-kinase信号通路探讨丙泊酚减轻大鼠脑缺血再灌注损伤的效果

目的基于Rho/Rho-kinase信号通路探讨丙泊酚减轻大鼠脑缺血再灌注损伤的效果。方法 SD大鼠100只分成:对照组、模型组、丙泊酚低、中、高剂量组(20.0、40.0、80.0 mg/kg),模型组、丙泊酚低、中、高剂量组建立脑缺血再灌注损伤模型,建模成功后,丙泊酚低、中、高剂量组给予相应剂量丙泊酚灌胃,对照组和模型组给予等体积生理盐水,持续给予4周,实验结束后,对每只大鼠进行神经功能缺损评分,行贴纸去除及平衡木行走实验,对大鼠海马区进行病理评分,同时测定大鼠脑组织中Rho、Rho-kinase mRNA和蛋白水平。结果模型组神经功能缺损评分、双侧贴纸去除时间、平衡木过杆时间、海马组织病理评分、脑组织海马区Rho、Rho-kinase mRNA和蛋白表达水平明显高于对照组(P<0.05);丙泊酚各剂量组神经功能缺损评分、双侧贴纸去除时间、平衡木过杆时间、海马组织病理评分、脑组织海马区Rho、Rho-kinase mRNA和蛋白表达水平明显低于模型组(P<0.05);且随着丙泊酚给药剂量的增加,神经功能缺损评分、双侧贴纸去除时间、平衡木过杆时间、海马组织病理评分、脑组织海马区Rho、Rho-kinase mRNA和蛋白表达水平逐渐降低,剂量-效应关系明显(P<0.05)。对照组海马区神经元细胞完整,排列紧密;模型组海马区神经元排列松散,细胞深染固缩,有片状坏死,神经细胞间质隔离;丙泊酚高剂组神经元细胞趋于正常;丙泊酚中、低剂量组较模型组而言,神经细胞疏松、固缩程度轻,神经元细胞核仁清楚可见。结论丙泊酚能减轻大鼠脑缺血再灌注神经功能损伤;其机制与丙泊酚能抑制Rho、Rho-kinase mRNA和蛋白的表达进而抑制Rho/Rho-kinase信号通路的激活有关。

低氧训练中过表达血红素加氧酶1促进小鼠骨骼肌线粒体的生物合成

背景:近年对低氧训练机制的研究主要围绕低氧训练对机体血液系统的调节作用展开,但结果具有两面性,提示还有非血液系统调节机制。目的:探讨血红素加氧酶1在低氧训练中对小鼠骨骼肌线粒体含量及生物合成的调节作用。方法:SPF级8周龄雄性过表达血红素加氧酶1转基因小鼠20只,野生型小鼠20只,由兰州大学医学院提供。2种小鼠分别被随机分为2组(共4组):野生小鼠低氧静息组、野生小鼠低氧训练组、转基因小鼠低氧静息组和转基因小鼠低氧训练组。低氧训练组小鼠在青海大学基础医学研究中心进行跑台运动(速度20 m/min,坡度5°,60 min/d,5 d/周,共4周)。各组小鼠均于末次训练结束3 d后行速度20 m/min,坡度5°持续跑台运动并记录各组小鼠力竭运动时间,电镜检测骨骼肌线粒体数量,JC-1荧光探针检测线粒体膜电位,萤光素酶发光法检测线粒体ATP合成活性,Western blot检测骨骼肌血红素加氧酶1、COX Ⅳ和PGC-1α蛋白表达量。结果与结论:①与野生小鼠低氧静息组相比,野生小鼠低氧训练组和转基因小鼠低氧训练组力竭运动时间增加,线粒体数目略有增多,线粒体膜电位和ATP合成增加,血红素加氧酶1、COX Ⅳ和PGC-1α蛋白表达量增加;②与野生小鼠低氧训练组相比,转基因小鼠低氧训练组力竭运动时间明显增加,线粒体数目显著增多,线粒体膜电位和ATP合成增加,COX Ⅳ和PGC-1α蛋白表达量显著增加;③结果说明,血红素加氧酶1在低氧训练中具有延长小鼠力竭运动时间的作用,其机制可能与增加骨骼肌线粒体数量和生物合成有关。

过表达血红素加氧酶-1对低氧训练小鼠骨骼肌纤维组成的影响

目的探讨过表达血红素加氧酶-1(Heme Oxygenase-1,HO-1)对低氧训练小鼠骨骼肌纤维组成的影响。方法将8 w雄性过表达HO-1转基因小鼠和野生小鼠分为6组:野生小鼠低氧静息组(C)、过表达HO-1转基因小鼠低氧静息组(H)、野生小鼠低氧训练30 d组(C+T30)、野生小鼠低氧训练60 d组(C+T60)、过表达HO-1转基因小鼠低氧训练30 d组(H+T30)和过表达HO-1转基因小鼠低氧训练60 d组(H+T60)。低氧训练(海拔2261m。20m/min,坡度5°,60min/d,5d/w,30d和60d)结束后记录各组小鼠力竭运动时间;行ATP酶染色后计算各型肌纤维的面积百分比;用real time PCR、western blot法检测骨骼肌肌红蛋白(myoglobin)及PGC-1α表达量。结果与各自静息组相比,低氧训练30 d组和60 d组小鼠力竭运动时间均延长(P<0.05);与野生小鼠相比,过表达HO-1的转基因小鼠经低氧训练后力竭运动时间延长显著(P<0.01)。与C组相比,C+T60组小鼠红肌纤维增多(P<0.05);与H组相比,H+T30组和H+T60组小鼠红肌纤维均显著增多(P<0.01);过表达HO-1转基因小鼠经过低氧训练后红肌纤维较野生小鼠增多显著(P<0.01)。与静息组小鼠相比,低氧训练后各组小鼠骨骼肌中myoglobin的表达增加(P<0.05),同时伴随PGC-1α表达增加(P<0.05),尤以过表达HO-1小鼠显著(P<0.05)。结论过表达HO-1在低氧训练中可显著提高小鼠运动耐力,其机制可能是HO-1通过增加PGC-1α的表达促进骨骼肌红肌纤维增加实现的。

长链非编码RNA NR2F1-AS1靶向微小RNA-145-5p调控结肠癌细胞增殖、迁移和侵袭的分子机制

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)核受体亚族2F组成员1反义RNA(NR2F1-AS1)对结肠癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及作用机制。方法收集2015年3月至2017年5月青海省第五人民医院外科手术切除并经病理证实为原发性结肠腺癌组织25例,另留取距肿瘤边缘3 cm的癌旁组织(正常结肠组织)。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测结肠癌组织和癌旁组织中NR2F1-AS1和微小RNA-145-5p(miR-145-5p)表达水平。以结肠癌细胞HCT116为研究对象,双荧光素酶报告基因实验验证NR2F1-AS1和miR-145-5p调控关系。转染NR2F1-AS1小干扰RNA或miR-145-5p模拟物至HCT116细胞,细胞计数试剂盒(CCK-8)和Transwell分别检测干扰NR2F1-AS1表达或过表达miR-145-5p对HCT116细胞增殖、迁移和侵袭的影响。结果与癌旁组织比较,结肠癌组织中NR2F1-AS1表达升高[(3.39±0.33)比(1.01±0.11),P<0.05],miR-145-5p表达降低[(0.55±0.05)比(1.00±0.08),P<0.05]。与共转染WT-NR2F1-AS1的miR-NC组比较,miR-145-5p组细胞荧光素酶活性降低P<0.05)。过表达NR2F1-AS1后细胞中miR-145-5p表达水平降低(P<0.05),干扰sNR2F1-AS1表达后细胞miR-145-5p表达水平升高(P<0.05)。干扰NR2F1-AS1表达或过表达miR-145-5p后,HCT116细胞光密度(OD)值、迁移和侵袭数降低(P<0.05)。干扰miR-145-5p表达逆转了干扰NR2F1-AS1表达对HCT116细胞OD值、迁移和侵袭数的影响。结论NR2F1-AS1在结肠癌组织中呈高表达,干扰NR2F1-AS1表达可能通过上调miR-145-5p表达来抑制结肠癌细胞恶性行为,是结肠癌治疗的潜在靶点。

大型多功能破拆救援机研究

通过对多种灾害现场的救援需求分析,以及国内大型救援装备的局限性,提出了大型破拆救援装备的研究课题,开发设计出国内第一台多功能破拆救援设备,通过作业性能测试,满足灾害救援需求。本课题研究的多功能破拆救援机相比现有救援设备具有一机多能、智能化程度高、安全节能控制等优势。