CXC趋化因子配体10对肝细胞癌SMMC-7721细胞增殖和迁移的影响及其机制

目的:探讨外源性CXC趋化因子配体10 (CXCL10)对肝细胞癌(HCC) SMMC-7721细胞增殖和迁移的影响,并阐明其作用机制。方法:按照CXCL10作用浓度,将人HCC SMMC-7721细胞分为0 mg·L^(-1)CXCL10组、10 mg·L^(-1)CXCL10组和30 mg·L^(-1)CXCL10组。上述部分细胞给予细胞外调节蛋白激酶(ERK)抑制剂PD98059 (80μmol·L^(-1))后,将SMMC-7721细胞分为0 mg·L^(-1)CXCL10+PD98059组、 10mg·L^(-1)CXCL10+PD98059组和30mg·L^(-1)CXCL10+PD98059组。CCK-8法检测各组SMMC-7721细胞增殖率,EdU法检测各组SMMC-7721细胞中EdU阳性表达率,Transwell小室实验检测各组SMMC-7721细胞迁移率,Western blotting法检测各组SMMC-7721细胞中ERK、磷酸化ERK (p-ERK)和细胞周期蛋白D1 (Cyclin D1)蛋白表达水平。结果:CCK-8法检测,培养24h后,与0mg·L^(-1)CXCL10组比较,10mg·L^(-1)CXCL10和30mg·L^(-1)CXCL10组SMMC-7721细胞增殖率升高(P<0.05或P<0.01)。EdU法检测,与0mg·L^(-1)CXCL10组比较,10mg·L^(-1)CXCL10和30mg·L^(-1)CXCL10组SMMC-7721细胞中EdU阳性表达率升高(P<0.01);Transwell小室实验检测,培养48 h后,与0 mg·L^(-1)CXCL10组比较,10 mg·L^(-1)CXCL10和30 mg·L^(-1)CXCL10组SMMC-7721细胞迁移率升高(P<0.01)。Western blotting法检测,细胞培养24 h后,采用CXCL10溶液处理24h,与0mg·L^(-1)CXCL10组比较,10mg·L^(-1)CXCL10组和30 mg·L^(-1)CXCL10组SMMC-7721细胞中ERK、p-ERK及Cyclin D1蛋白表达水平升高(P<0.01)。CCK-8法检测,加入ERK抑制剂PD98059后,与0 mg·L^(-1)CXCL10组比较,10 mg·L^(-1)CXCL10+PD98059组和30 mg·L^(-1)CXCL10+PD98059组SMMC-7721细胞增殖率降低(P<0.05);与10 mg·L^(-1)CXCL10组比较,10 mg·L^(-1)CXCL10+PD98059组SMMC-7721细胞增殖率降低(P<0.05);与30 mg·L^(-1)CXCL10组比较,30 mg·L^(-1)CXCL10+PD98059组SMMC-7721细胞增殖率降低(P<0.05)。结论:CXCL10能够促进HCCSMMC-7721细胞增殖和迁移,其作用机制与上调ERK/p-ERK/Cyclin D1通路蛋白表达有关。

齐墩果酸聚乙二醇修饰自组装及其对白血病细胞K562的增殖抑制作用

目的用聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)对齐墩果酸(oleanolic acid,OA)进行修饰,并探讨其衍生物对人慢性粒细胞白血病细胞K562的抑制作用。方法以OA和PEG为原料,酯化法、纳米沉淀法合成齐墩果酸聚乙二醇衍生物,核磁共振、电子显微镜、动态光散射检测衍生物表征。CCK-8法检测齐墩果酸聚乙二醇衍生物对K562细胞增殖抑制的影响,倒置显微镜检测齐墩果酸聚乙二醇衍生物对K562细胞形态的影响,流式细胞术检测齐墩果酸聚乙二醇衍生物对K562细胞凋亡的影响,Western blot检测K562细胞凋亡蛋白(Caspase-3、Caspase-9、PARP-1)及其剪切后蛋白表达。结果成功合成了齐墩果酸聚乙二醇自组装颗粒OAP5,粒径为(584.49±76.2)nm,结构为核-壳结构,电位趋近于0 mV。OAP5对白血病细胞K562具有增殖抑制作用,处理48 h后的IC_(50)为(16.10±0.64)μg/ml。OAP5处理K562细胞后,细胞密度降低,萎缩变形,折光性变差。OAP5能够促进K562细胞凋亡,剪切Caspase-3、剪切Caspase-9、剪切PARP-1表达增多(P<0.05)。结论OAP5能够通过诱导白血病细胞K562凋亡作用而抑制K562细胞增殖,为齐墩果酸抗肿瘤临床应用提供了依据。

齐墩果酸聚乙二醇修饰的研究进展

齐墩果酸是一种五环三萜类化合物,具有药用价值高、药物来源广等特点,是非常有开发潜力的天然药物之一,但因其在水中溶解度低,溶出速度慢,从而导致其在体内生物利用度低,因此,以齐墩果酸为先导化合物对其进行结构修饰成为了近年来国内外研究的热点。聚乙二醇是一种高分子聚合物,目前被广泛应用于药物结构修饰。将疏水的齐墩果酸与亲水的聚乙二醇通过化学键键合,形成双亲型齐墩果酸的聚乙二醇修饰产物,具有结构稳定、载药量高等特点,大大提高了齐墩果酸的水溶性,增强其体内的生物利用度,为临床药物治疗尤其是抗肿瘤药物研发提供了新思路。本文主要对齐墩果酸和聚乙二醇的结构修饰以及国内外研究进展进行综述。