人心房肌Kv1.5钾通道稳定表达细胞系的建立

目的:建立稳定表达人心房肌细胞Kv1.5钾通道的细胞系.方法:将编码人心房Kv1.5钾通道的hKv1.5基因转染HEK293细胞,用1g/LG418筛选2wk后采用膜片钳方法筛选具有抗G418抗性的细胞克隆,电流记录模式为全细胞记录.结果:hKv1.5通道基因被成功转入HEK293细胞并稳定表达;稳定表达的hKv1.5电流是具有明显电压依赖性和超快激活特点的外向电流,其电流大小为(3.20±0.60)nA,其激活电压在-30mV左右.结论:成功构建稳定表达人心房Kv1.5钾通道蛋白的HEK293细胞系,其电流特性与人心房肌IKur相似,可以作为体外研究人心房IKur的细胞模型.

pIRES2-EGFP-hVEGF165真核表达载体的构建及在心肌细胞内的表达

目的 :构建pIRES2 EGFP hVEGF1 6 5真核表达质粒并在心肌细胞内表达 .方法 :应用限制性内切酶将目的片段VEGF1 6 5克隆入含有增强绿色荧光蛋白 (EGFP)基因的真核表达质粒pIRES2 EGFP中 .转染心肌细胞后 ,应用荧光显微镜检测EGFP的表达 ,以免疫组化法检测血管内皮生长因子 (vascu larendothelialgrowthfactor,VEGF)在体及离体表达 .结果 :构建了真核共表达载体pIRES2 EGFP hVEGF1 6 5 .转染心肌细胞后 ,荧光显微镜观察可见EGFP的表达 ,免疫组化染色证实细胞内有VEGF的表达 .结论 :外源性hVEGF1 6

猪缺血心肌内膜注射VEGF基因的长期疗效观察

目的探讨经心内膜心肌内直接注射血管内皮生长因子(VEGF)基因治疗猪心肌缺血后的远期心脏电机械活动及心功能改善情况。方法30只实验用小香猪随机均分为对照组(n=15)和治疗组(n=15)。建立心肌缺血模型后,通过NOGA系统经心内膜分别将空载质粒pIRES2-EGFP及质粒pIRES2-EGFP-hVEGF165直接注射至对照组或治疗组缺血部位心肌内。在注射前及注射后1年,分别应用左心室电机械标测(LVEMM)监测局段线性缩短率(LLS)和单极电压(UpV),并用超声监测M型局部室壁运动幅度和背向散射积分的心动周期变异(CVIB)、左心室射血分数(LVEF)。1年后处死动物,组织学切片观察心肌组织中毛细血管生成情况。结果LVEMM监测显示,注射后1年治疗组LLS显著高于注射前及对照组(P<0.05),而UpV与注射前及对照组比较无显著差异(P>0.05);超声监测显示,治疗组注射后1年的局部室壁运动幅度和CVIB、LVEF均显著高于对照组(P<0.05)。组织学检查显示,治疗组心肌内毛细血管数目(38.1±4.8/HP)显著高于对照组(13.2±5.1/HP,P<0.01)。结论经心内膜直接注射pIRES2-EGFP-hVEGF165可增加猪远期缺血心肌部位的血管新生,改善局部电机械特性,从而改善心功能。

经心内膜注射血管内皮生长因子基因治疗猪心肌缺血模型的远期效果观察

目的:探讨经心内膜心肌内直接注射血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)基因治疗猪心肌缺血模型后,远期心功能以及局部超微结构的变化。方法:将30只实验用小香猪均分为对照组(n=15)和治疗组(n=15)。以冠状动脉内球囊建立心肌缺血模型后,通过NOGA系统经心内膜将空质粒和pIRES2-EGFP-hVEGF165质粒分别直接注射至对照组和治疗组猪的缺血部位心肌内。在注射前及注射后1年,应用超声检测M型局部室壁的运动幅度和背向散射积分的心动周期变异(cardiac cycle variation of integrated backscatter,CVIB)和左心室射血分数(Left ventricular ejection fraction,LVEF)。1年后处死动物,通过检测Ⅷ因子的SABC染色法观察心肌组织中毛细血管生成的情况,并以透射电子显微镜观察局部超微结构的变化。结果:与对照组相比,治疗组术后1年时,M型局部室壁的运动幅度和CVIB、LVEF均显著增加(P<0.05)。检测Ⅷ因子的SABC染色法显示,对照组心肌内毛细血管数目为(13±5)个/HP;而治疗组为(38±5)个/HP(P<0.01)。透射电子显微镜观察发现,对照组梗死区残存心肌存在严重的心肌细胞萎缩,缺血区心肌肌丝出现不同程度纵向断裂,线粒体排列紊乱,时有肿胀、变性;而治疗组残存心肌仅轻度萎缩,缺血区心肌的结构较为正常。结论:猪心肌缺血模型经心内膜直接注射pIRES2-EGFP-hVEGF165基因后,远期可增加缺血心肌部位的血管新生,促进局部心肌细胞结构的恢复,从而改善心功能。

复发缺血事件与心肌梗死后心源性猝死相关性质疑

心肌梗死是严重威胁人类健康的心血管疾病。心肌梗死存活者有很高的心源性猝死风险。2008年11月,《美国医学会杂志》(JAMA)发表的题为"心肌梗死后心源性猝死"的文章,探讨了人群中心肌梗死后心源性猝死的发生率及其与复发缺血事件以及心力衰竭的相关性。我们对该项研究的几处试验设计细节提出了质疑,认为心肌梗死后心源性猝死与复发缺血事件无关的结论值得商榷。

小剂量尿激酶治疗不稳定性心绞痛的疗效和安全性临床观察

目的 观察小剂量尿激酶治疗不稳定性心绞痛(U AP)患者的疗效和安全性 .方法 选择 UAP患者 5 0 (男42 ,女 8)例 ,随机分为溶栓组和对照组 ,对照组不应用尿激酶 ,余治疗与溶栓组完全相同 .患者于治疗前后各取肘静脉血 10 m L,应用自动凝血系统检测仪及发色底物法分别检测PT,APTT,Fg含量、t- PA及 PAI活性 .同时对治疗前后心绞痛发作频率、心电图改变、出血并发症及心血管意外发生情况等进行临床观察 .结果 1溶栓组 UAP患者心绞痛再发率比对照组明显地降低 (P<0 .0 5 ) ,且显效率明显高于肝素对照组 (P<0 .0 1) ;心电图改善无效率降低 (P<0 .0 5 ) ,显效率升高 (P<0 .0 5 ) ;两组出血并发症发生率及心血管意外发生率无差异 .2溶栓组 U AP患者溶栓后 PT,APTT较溶栓前显著延长 (P<0 .0 1) ,t- PA活性上升 (P<0 .0 1) ,PAI活性下降 (P<0 .0 1) ,Fg含量明显降低 (P<0 .0 1) ;对照组除 PT,APTT延长外 (P<0 .0 5 ) ,余指标治疗前后无统计学差异 ;溶栓组和肝素对照组治疗后各指标比较 ,除 PT,APTT无差异外 ,余指标均存在统计学意义 .结论 1有急性血栓形成的UAP患者进行小剂量尿激酶溶栓治疗可以改善临床症状 ,且不增加恶性事件发生率 ,提示在特定的 UAP亚组中进行合理的溶栓治疗 ,具有一定的可行性 .2 U AP?

冠心病介入治疗患者的全程健康教育模式与效果评价

目的 建立冠心病介入治疗患者入院至出院后的全程健康教育模式,评价实施效果。方法 制定冠心病的全程健康教育模式,内容包括:入院后 个别宣教,阅读、宣传栏与集体授课结合;术前 集体上课讲解、看录像、演示、训练为主,与单人指导讨论结合;术中 讲解示范指导为主;术后 床旁指导为主,听录音及陪伴管理参与结合;出院 出院指导+手册+康复教育模式,定期书信或电话随访指导,开通教育咨询热线。通过自身前后和历史对照的方法评价效果。结果 教育后冠心病及介入治疗相关知识测试优良率由教育前的16.8％提高到88.1％（P<0.01）;患者术前紧张焦虑程度有48.35下降到38.53（P<0.01）,术后并发症降低了7.5％.结论 全程冠心病介入治疗健康教育模式是提高患者冠心病及介入治疗相关知识知晓率、降低术前紧张焦虑、减少并发症的有效手段,有利于保证手术全面成功,巩固手术疗效,促进医护患建立良好关系和提高护士整体素质。

新文科背景下公共管理学科人才培养问题探析

新文科建设是中国建设高等教育强国的一项重要举措,是新形势下对我国传统人文社会科学学科建设和人才培养模式的深刻反思和超越。新文科建设要求公共管理学科人才培养树立跨界通融理念、与新科技革命相结合、立足新时代和本土化、实现国际化。针对当前我国公共管理学科人才培养中课程设置不规范、课程之间缺乏交融互通和创新、科技意识培养不足、实践能力培养不足、国际化意识培养不足等问题,要以新文科理念为指导,坚持通专结合,培养复合型人才;培养科技意识,提高学生的信息技术素养;强化实践能力培养,增强学生动手解决实际问题的能力;坚持国际化,开阔学生的国际视野,提升国际交流能力。

浅谈医学生临床复合能力培养

医学生培养的质量直接关系国家卫生事业发展和人民身心健康水平。笔者在长期临床代教过程中认为,对医学生的培养不仅应关注其业务素质,也应在职业道德、人文素质、创新能力等复合能力方面下功夫。只有如此,才能保证医学生具务良好的医德、精湛的技术和不断发展的潜力。

急性心肌梗死并发急性脑梗死危险因素及临床特点

目的分析急性心肌梗死(AMI)并发急性脑梗死(AIS)的危险因素及临床特点。方法回顾性分析2010年1月~2015年4月我院收治住院的75例AMI并发AIS患者为病例组,随机选择同期住院的单纯AMI和单纯AIS患者各80例为对照组,对比分析3组临床资料。结果单因素分析显示,AMI并发AIS组与单纯AMI组比较,既往脑梗死病史、外周血管病史、血肌酐水平显著高于对照组,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);与单纯AIS组比较,男性、既往心肌梗死病史、外周血管病史、血肌酐水平显著高于对照组,入院收缩压与舒张压显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);多因素Logistic回归分析表明,男性、既往脑梗病史、血肌酐为AMI并发AIS的独立危险因素(P<0.05,OR>1),入院舒张压为其保护性因素(P<0.01,OR<1)。临床特点分析表明,KILLIP分级≥Ⅱ级高于两对照组(44%vs.16%vs.1%,P<0.01),多发脑梗死高于单纯AIS组(46%vs.16%,P<0.01),PCI患者冠状动脉3支病变显著高于单纯AMI组(76%vs.52%,P<0.05)。结论男性、入院舒张压降低、既往脑梗病史、血肌酐水平升高为AMI并发AIS的独立危险因素,心功能不全、多发脑梗死为其临床特点,冠状动脉3支病变为PCI术后并发急性脑梗死患者的临床特点。

应用Amplatzer封堵器治疗儿童动脉导管未闭封堵术前后左心功能的变化

目的 :应用超声心动图评价 Amplatzer封堵器治疗儿童动脉导管未闭 (PDA)患者封堵前后左心功能的变化。方法 :应用超声心动图测量 PDA封堵前后左室舒张末期内径 (EDD)和收缩末期内径。应用椭圆体体积法计算出左室舒张末期容积 (EDV)、收缩末期容积 (ESV)、每搏搏出量 (SV)、射血分数 (EF)和短轴缩短率 (FS) ,将封堵前后测量数据分别用统计学配对 t检验。结果 :封堵后 EDD,EDV,ESV,SV恢复至正常 ,封堵前后差别有统计学意义(P<0 .0 5 ) ,EF和 FS变化不大。结论 :应用 Amplatzer封堵器治疗儿童 PDA是一种有效的方法 ,能缩短 EDD和改善 PDA患者的左心功能。

用透明法观察三种叶型半夏叶的表皮形态(简报)

叶表皮特征,特别是气孔器类型的研究一向为植物学家所重视,在分类学或系统学上具潜在的价值。本研究通过透明法对柳叶型,桃叶型,心叶型半夏的表皮特征进行了详细观察。结果显示,采用透明法可以清晰地观察到叶表皮形态及气孔特征,半夏上表皮的气孔分布极不均匀,离叶缘越近,气孔密度越大;且三种叶型半夏的下表皮气孔密度存在差异,心叶型半夏的气孔密度最大,柳叶型次之,桃叶型最小。本研究证明透明法可以用于半夏表皮的观察,为半夏的产业化提供新的研究手段。

国产与进口氯吡格雷对行介入治疗的不稳定型心绞痛患者抗血小板作用效果比较

目的观察国产与进口氯吡格雷对行介入治疗的不稳定型心绞痛(UAP)患者的抗血小板作用效果。方法UAP患者75例,入院后均拟行选择性冠状动脉造影检查及(或)经皮冠状动脉成形术加支架术。随机分为两组,国产药组服用国产氯吡格雷(商品名泰嘉,深圳信立泰药业公司生产,每片25mg);进口药组服用进口氯吡格雷(商品名波立维,赛诺菲公司生产,每片75mg)。两组患者均在给予阿司匹林300mg/d的基础上,第1天给予氯吡格雷负荷剂量300mg,从第2天起给予氯吡格雷常规剂量75mg/d,所有患者在服药24h之后行介入性诊治。分别在服药前、服药后2,4,6h和24h取外周静脉血,采用放射免疫法分析法检测两组患者血浆中α-颗粒膜蛋白(α-granule membrane protein,GMP-140)、血栓素B2(thromboxane B2,TXB2)和6-酮前列腺素F1α(6-keto-prostaglandin F1α,6-keto-PGF1α)的水平。结果两组服药后2,4,6和24h血浆GMP-140,TXB2,6-keto-PGF1α均较服药前显著降低(P<0.05)。两组间比较,仅在服药后2h国产药组血浆GMP-140,TXB2均高于进口药组(P<0.05);4h之后两组血浆GMP-140,TXB2,6-keto-PGF1α均无显著性差异。结论氯吡格雷起效迅速,首剂负荷剂量300mg服药后2h即可有效抑制血小板活性,国产药组仅2h稍逊于进口药组,4h后两组药物的抗血小板作用无显著性差异。

左心室电机械标测与造影对正常及梗死心肌评价的比较

目的:比较电机械标测与X线左心室造影对正常及梗死后左心室收缩功能及心肌状态的评价.方法:家猪8头,分别于栓塞冠状动脉左前降支前后进行双斜位左心室及电机械标测.结果:正常心脏电机械标测获得的左心室三维图像与双斜位左心室造影图像吻合.梗死后1h左心室造影与电机械标测图形吻合,但电机械标测可以区分缺血区域和梗死区域.结论:电机械标测可以获得与左心室造影一致的左心室三维立体图像,并且可以区分缺血与梗死心肌.

犬缺血心肌内注射血管内皮生长因子基因的疗效

目的 :了解血管内皮生长因子 (vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)基因 ,经心肌直接注射治疗犬心肌缺血模型后新生血管和侧枝循环形成以及心功能改善情况 .方法 :取实验用犬 2 4只 ,结扎左冠状动脉前降支 (LAD)近、中段 ,模型建造成功后 ,通过直接心肌注射将hVEGF1 6 5基因转染缺血部位心肌细胞 ,应用超声检查及冠状动脉造影 (coronaryangiog raphy,CAG)进行监测 ,3mo后处死 ,组织学切片观察心肌组织中毛细血管生成情况 .结果 :术后 3mo ,CAG显示 ,治疗组新生血管数目和侧枝血管形成较对照组明显增加 ,TIMI血流也较对照组明显改善 (P <0 .0 5 ) ;超声检查显示 ,治疗组射血期及舒张早期局部心肌运动速度和二尖瓣环舒张早期平均运动速度均较对照组显著增加 ;组织学检查显示 ,治疗组心肌内毛细血管数为 (4 1± 8) /HP ,而对照组为 (9± 6 ) /HP (P <0 .0 1 ) .结论 :犬心肌缺血模型经心肌直接注射pcDNA3.1 (- ) /VEGF1 6 5 ,能促进心肌血管新生 ,加速侧枝循环建立 。

急性冠状动脉综合征患者再灌注策略的选择

急性冠状动脉综合征（acute coronary syndromes， ACS）是冠状动脉粥样硬化斑块破裂或侵蚀，继发完全或不完全闭塞性血栓或冠状动脉痉挛的一组临床综合征，包括急性ST段抬高心肌梗死（ST-segment elevation myocardial infarction，STEMI）、

瑞舒伐他汀对不同血脂、C反应蛋白水平的不稳定型心绞痛患者颈动脉粥样硬化斑块的影响

目的:探讨瑞舒伐他汀对不同血脂、C反应蛋白(CRP)水平的不稳定型心绞痛(UAP)患者颈动脉粥样硬化斑块的影响。方法:测定60例UAP患者低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、超敏CRP(hsCRP)水平,并以LDL-C和hsCRP中位数水平为基础将受试者分为4组,所有入选患者口服瑞舒伐他汀10 mg/d,治疗12个月,分别于治疗前及治疗后3、6、9和12个月时测定三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、LDL-C、hsCRP水平,以及颈动脉中层厚度(IMT),并计算颈动脉斑块积分。结果:经瑞舒伐他治疗9个月,高LDL-C,高hsCRP组颈动脉斑块积分较治疗前下降(P<0.05),治疗12个月时下降更为显著(P<0.01);并且,高LDL-C低hsCRP组颈动脉斑块积分下降程度不如低LDL-C高hsCRP组明显;而低LDL-C低hsCRP组颈动脉斑块积分与治疗前相比无统计学意义。结论:hsCRP的检测可以作为是否进行他汀类药物治疗的参考指标,尤其是对于那些LDL-C降至正常水平的患者。

骨髓基质细胞结合血管内皮生长因子基因治疗猪慢性心肌缺血的疗效

目的:探讨骨髓基质细胞(BMSCs)结合血管内皮生长因子(VEGF)基因心内膜注射治疗猪慢性心肌缺血模型的疗效。方法:建立猪心肌梗塞模型,胸骨穿刺抽取骨髓,分离培养BMSCs,将VEGF165基因转染到BMSCs中,4周后进行左室心内膜电机械标测并行心内膜注射等操作,按照注射成分不同分为3组,联合组(n=8)注射转染VEGF165基因的BMSCs,细胞组(n=8)注射BMSCs,对照组(n=6)注射生理盐水。于细胞移植后4周分别进行左室心内膜电机械标测、选择性冠脉造影及超声心动图检查。结果:术后4周时联合组较细胞组及对照组的心梗面积明显缩小,侧支循环、心脏泵血功能以及心肌收缩力改善更加明显(P<0.05～<0.01)。结论:自体BMSCs结合VEGF165基因治疗心肌梗塞效果显著。

“零对比剂”经皮冠状动脉介入治疗1例

冠状动脉造影对冠心病的诊断和治疗必须使用含碘对比剂，然而，少数患者使用含碘对比剂后发生过敏性休克，甚至危及生命。因此，长期以来，造影剂过敏一直是介入治疗的“绝对禁区”。基于此，西京医院心血管内科在国内首先提出“零对比剂”介入治疗的新方法，即在介入治疗过程中，不使用造影剂，我们同时克服了无造影指引导管置放、经皮腔内冠状动脉成形术（PTCA）导丝置入、支架精确定位等困难，在血管内超声引导下，在国内完成了首例重度对比剂过敏患者”零对比剂”介入治疗，术后患者恢复良好。

形状对构建组织工程化心肌组织的影响

目的:探索形状(片层及条带)对构建工程化心肌组织(EHT)的影响.方法:原代心肌细胞与液态胶原,Matri-gel,2×DMEM混合,注入环形槽内形成心肌条带,注入方形槽内形成心肌片层,条带和片层培养1wk后行力学拉伸,继续培养1wk,行HE染色,鞣酸多彩(mason)染色,免疫组化染色以及激光共聚焦检测等对EHT进行评价.结果:拉伸前,心肌片层和心肌条带均可见点状自发性跳动,心肌片层拉伸后2d出现肉眼可见的一致性节律性跳动;心肌条带拉伸后4d形成肉眼可见的一致性跳动,14d后心肌条带仍然能维持长时间的跳动,形状和大小无明显改变,而心肌片层在去除力学拉伸后,发生明显的回缩,收缩力量减弱.HE染色,mason染色,免疫组化以及激光共聚焦检测结果显示,EHT拉伸后内部细胞均匀分布,沿拉伸方向伸展,细胞核完整,呈长梭形,含有丰富肌丝,与正常成年大鼠心肌组织类似.结论:片层和条带对构建EHT各有利弊.心肌片层易于构建,容易移植,但构建后生理性能不稳定,而心肌条带构建后生理性能较稳定,但构建成功率低.