非洲猪瘟病毒D1133 L蛋白单克隆抗体抑制其复制

旨在探究非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)D1133L单克隆抗体对病毒复制的调控效应。在制备了ASFV D1133L单克隆抗体的基础上,将ASFV和不同浓度的单克隆抗体同时接种于PAMs,通过红细胞吸附试验(HAD 50)、实时荧光定量PCR(RT-qPCR)、蛋白质印迹(Western blot)和荧光观察分析D1133L单克隆抗体对病毒复制的影响。结果显示:不同浓度的单克隆抗体在不同的感染时间对ASFV的病毒效价(P<0.01),蛋白表达水平,基因转录水平(P<0.01),ASFV-GFP绿色荧光蛋白的表达水平(P<0.05)均有显著抑制,且这种抑制作用具有剂量依赖性。综上所述,D1133L单克隆抗体可显著抑制ASFV的复制,试验结果在ASFV药物靶点的选择上具有一定的参考意义。

基于L-CNG加气站冷能利用的蓄冰槽性能模拟与分析

本文根据L-CNG加气站的特点提出了基于L-CNG加气站冷能利用的蓄冷系统,并根据蓄冰槽管外结冰的特点提出了蓄冰槽管外结冰模型并对模型进行简化。本文结合影响蓄冰槽管外结冰的因素对管外结冰特性进行了分析计算,并研究了不同的载冷剂进口温度、流速、浓度以及蓄冰槽内水的初温等因素对蓄冰槽蓄冷特性的影响。根据计算分析结果,本文提出了适合L-CNG冷能利用系统的蓄冰槽最佳运行工况,为L-CNG冷能利用提供理论基础。

红嘴鸥产酸克雷伯菌的生物学特性

采集红嘴鸥的粪便并进行细菌分离培养,首次分离到产酸克雷伯菌。红嘴鸥产酸克雷伯菌在普通琼脂、麦康凯、伊红美蓝(EMB)、营养肉汤及SS琼脂培养基上均可生长,多数为单个存在或两两相连,少数依傍聚堆成锯齿状排列。本菌为无鞭毛、无芽孢的革兰氏阴性杆菌,能利用葡萄糖(产酸产气)、可发酵乳糖、甘露醇、麦芽糖及蔗糖;靛基质试验为阳性,MR阴性,VP试验阳性,不产生H2S,可利用尿素及西蒙氏柠檬酸盐,但半固体琼脂(动力)试验为阴性;本菌对氧氟沙星最为敏感;小白鼠对本菌易感,且腹腔接种易感性高。

大熊猫源致病大肠杆菌CCHTP全基因组测序及耐药和毒力基因分析

致病性大肠杆菌是引起动物泌尿系统感染的重要病原菌,本研究对泌尿生殖道感染出现潜血的大熊猫尿液中分离的一株致病性大肠杆菌(Escherichia coli CCHTP)进行全基因组测序,检测其中耐药基因和毒力因子的情况,同时对基因岛上耐药和毒力基因及其基因环境进行研究。研究发现,大肠杆菌CCHTP中存在多种类型的耐药基因,其中外排泵系统基因数量最多,包括mdf A、emr E和mdt N等介导多重耐药外排泵的基因。此外,该菌还携带166种毒力因子及563个相关毒力基因,其中属于黏附与侵袭类的毒力因子及相关基因数量最多。对19个基因岛分析发现,基因岛GIs011和GIs017中各有一段包含耐药和毒力基因的序列,两侧与可移动遗传元件(转座酶和插入序列)相连,这些结构可能介导耐药及毒力基因水平转移。本研究通过全基因组测序分析了大熊猫源致病性大肠杆菌中存在的耐药及毒力基因情况,对大熊猫相关疾病的科学治疗、合理用药有重要意义。

互联网思维情景下体育产业发展路径思考

本文通过剖析互联网思维的内涵,理解定义互联网思维,结合体育产业中的现实案例,分析互联网思维对体育产业发展的影响。

社会互动距离理论下我国大众冰雪运动的现状与发展

以第六次全国体育场地普查的数据为基础,在社会几何学的理论视域下,从距离的视角出发,分析冰雪运动与参与者之间的社会互动距离对冰雪运动价值的影响。东北地区作为冰雪互动密集、社会距离较近的地区,进行现状分析,认为社会互动的相对距离影响冰雪运动价值。因此对于冰雪运动发展而言,首先,应关注冰雪社会互动对象的社会距离,加大冰雪人才的培养;其次,由于“互联网 +”模式的出现,社会距离的具体实在性逐渐向抽象虚拟性转变;最后,北冰南展战略促进了冰雪运动的地域协调发展,通过“市场南展、人才北上”弥补南北冰雪运动的非平衡性,减少阻碍缩短冰雪运动发展的社会互动距离。

浅析电视综艺节目在新媒体崛起时代的困境和出路

新媒体崛起时代,电视综艺节目面临诸多困境,如观众对传统收看渠道的依赖程度下降、电视单位不再是唯一有能力制作和播出节目的主体等.电视综艺节目应当寻求出路,敢于逆向思维,认清自身优势,提高核心竞争力,使新媒体和传统媒体得到良性融合,互惠互利.

浅析《爸爸去哪儿》对国内电视真人秀节目的启示

《爸爸去哪儿》第二季是2014年备受瞩目的综艺节目。第一季的余音绕梁至今，绵绵不绝。 《爸爸去哪儿》自2013年10月11日开播以来，收视率连续10期只升不降，从开播初期的1.423到第10期的5.330，再到收官之作的4.916，最终以全国网平均收视2.16，平均份额15.25%，最高单期份额20.37%的成绩，成为年度上星频道中收视最高的季播节目。甚至电影版票房也取得12天破6亿的成绩。

大型综艺晚会先进工作模式探析——以2018浙江卫视秋季盛典为例

2018年10月19日,浙江卫视举办了2018秋季盛典,大量电视观众和网友参与到本次晚会中来,收视率最高时段破1。本文对2018浙江卫视秋季盛典的先进工作模式进行了解析,在此基础上进一步探究其对于本省广电平台晚会工作的启示。

打造特色老年电视文艺节目的可行性探析

今年8月1日起，我国将进行第四次中国城乡老年人生活状况抽样调查。这次法定调查是我国最大规模的老龄国情调查。我国60岁以上人口在1999年就达到总人口的10．41％．比例到了2011年则达到13．7％．到了2012年底我国老年人口已缩到总人口的14.3％。以黑龙江省为例，黑龙江省正面临“人口断崖”“未富先老”的困局。据预测．2020年黑龙江省老龄化水平将达到19％：2045年黑龙江省老龄化水平将达33％以上。

宿主OAS2蛋白抑制非洲猪瘟病毒体外复制的研究

为了探究宿主蛋白2′,5′-寡腺苷酸合成酶2(OAS2)与非洲猪瘟病毒(ASFV)复制之间的关系,本研究通过蛋白免疫印迹(Western-blot)和实时荧光定量PCR(RT-qPCR)分析了ASFV感染对宿主OAS2的调控作用;构建并合成OAS2真核表达质粒以及siRNA干扰序列,通过RT-qPCR、Western-blot方法探究在MA-104细胞中外源过表达OAS2及在PAMs细胞中下调OAS2表达对ASFV体外复制的影响。结果显示,ASFV感染PAMs细胞后,OAS2的蛋白水平和转录水平皆上调,并且外源过表达OAS2显著抑制了ASFV的复制,下调OAS2表达促进了ASFV的复制。本研究通过对宿主蛋白OAS2进行过表达和敲低,证实了OAS2可以抑制ASFV体外复制,该结果为进一步研究宿主对ASFV的抗病毒免疫研究提供了理论基础。

抑制宿主脂肪酸合成关键酶活性影响O型口蹄疫病毒的复制

为探究宿主脂肪酸合成对O型口蹄疫病毒(FMDV)复制的影响,以猪肾细胞PK-15和IBRS-2细胞为模型,监测脂肪酸合成的关键酶抑制剂对FMDV复制的调控作用;通过CCK-8试剂盒检测抑制剂对细胞的毒性作用,筛选合适的抑制剂预处理浓度;用Western-blot和实时荧光定量PCR(qPCR)方法检测添加外源C75和TOFA对FMDV复制的调控作用。结果显示,和对照组相比,添加脂肪酸合成的关键酶抑制剂C75和TOFA后,口蹄疫病毒蛋白水平和转录水平均显著下调。结论,抑制宿主细胞脂肪酸合成会降低FMDV在宿主细胞中的复制效率,这为进一步深入研究FMDV的致病机制开辟了新的方向。

宿主蛋白BST-2抑制非洲猪瘟病毒体外复制的研究

非洲猪瘟(African swine fever,ASF)是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)感染引起的高致死率传染病。骨髓基质细胞抗原2(BST-2,也称为Tetherin/HM1.24/CD317)被鉴定为一种抑制包膜病毒释放的新型宿主限制因子,它可以将病毒颗粒结合到细胞表面,随后在溶酶体中进行内化和降解,从而抑制病毒复制。因此,它对宿主的抗病毒作用十分重要。本实验室前期研究表明,怀孕猪血清会促进ASFV的复制。ITRAQ分析表明,BST-2蛋白属于下调前十的蛋白之一。为探究宿主蛋白BST-2与ASFV复制之间的关系,本试验通过蛋白免疫印迹(Western-blot)和实时荧光定量PCR(RT-qPCR)分析了ASFV感染对BST-2表达的影响;构建并合成了BST-2真核表达质粒以及siRNA干扰序列,通过RT-qPCR、Western-blot去探究外源过表达BST-2及敲低BST-2对ASFV体外复制的调控作用。结果显示,外源过表达BST-2显著抑制了ASFV的复制,敲低BST-2促进了ASFV的复制。本研究通过对BST-2进行过表达和敲低,证实了BST-2作为一种宿主抗病毒分子能抑制ASFV的体外复制,为进一步深入研究宿主蛋白抗ASFV功能提供了新的途径,也为ASF的防控提供了新思路。

宿主蛋白SIRT5在代谢和疾病进程中的作用

SIRT5作为Sirtuins家族的成员之一,是一种依赖于烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamide adenine dinucleotide,NAD)的赖氨酸去酰化酶,具有去乙酰化、去琥珀酰化、去丙二酰化、去戊二酰化酶活性。SIRT5是细胞稳态的重要调节因子,参与调节不同代谢过程中蛋白质的活性,例如:糖酵解、三羧酸循环(TCA循环)、脂肪酸-β氧化、活性氧(ROS)解毒等。SIRT5还可以充当肿瘤激活或抑制因子,在神经退行性疾病中发挥重要作用。此外,SIRT5亦可在抗病毒天然免疫反应中起关键作用。本文通过对SIRT5的结构、酶活性、生物学功能以及在疾病进程中发挥的作用进行综述,以全面了解SIRT5研究现状。

非洲猪瘟病毒调控宿主免疫应答分子机制的研究进展

非洲猪瘟(African swine fever,ASF)是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)感染引起猪的一种高死亡率的病毒性传染病,给养猪业造成了巨大的经济损失。ASFV与宿主相互作用过程中,通过调控宿主干扰素应答、炎症反应、细胞凋亡、自噬等过程逃避机体免疫监视,从而有利于病毒的致病性和复制。但目前ASF防控产品的研发受到限制,其中关键因素之一可能是对ASFV调节宿主免疫应答的机制知之甚少。本文针对近年来ASFV感染后涉及的调控宿主免疫应答研究进行综述,以期有利于深入了解ASFV免疫调控的分子机制,为ASF相关防控产品的研发提供参考和帮助。

猪源SIRT5促进O型口蹄疫病毒在PK-15细胞复制

目的探究猪源SIRT5对O型口蹄疫病毒(Foot and mouth disease virus serotype O,FMDV-O)复制的影响及其调控FMDV-O复制的初步机制。方法利用Western Blotting和RT-qPCR检测FMDV-O感染PK-15细胞后内源性SIRT5表达情况;设计合成3对SIRT5特异性siRNA,通过Western Blotting和RT-qPCR检测SIRT5、FMDV-O蛋白水平、转录水平及病毒拷贝数的变化情况;构建SIRT5真核表达质粒转染至PK-15细胞,运用Western Blotting、RT-qPCR实验方法探究过表达SIRT5对FMDV-O复制的影响,同时利用RT-qPCR检测过表达SIRT5对SeV、FMDV-O诱导的I型干扰素刺激基因mRNA表达水平的影响。结果FMDV-O感染PK-15细胞后内源性SIRT5的表达上调;siRNA干扰SIRT5抑制FMDV-O的复制;过表达SIRT5促进FMDV-O复制;过表达SIRT5降低了SeV、FMDV-O诱导的干扰素刺激基因mRNA的表达水平。结论FMDV-O感染刺激宿主SIRT5表达,而猪源SIRT5通过抑制I型干扰素刺激基因的产生进而促进FMDV-O复制。本研究为进一步探究猪源SIRT5促进FMDV-O复制的机制提供参考依据。

圈养孔雀禽流感H5亚型免疫抗体监测与分析

为了解云南边境及昆明某孔雀养殖园的孔雀禽流感H5亚型的免疫接种效果,从云南边境及昆明某孔雀养殖园共随机采集303份血清,试验采用HI试验方法对血清样本进行禽流感H5免疫抗体检测。结果表明:303份孔雀血清中禽流感H5亚型免疫抗体的平均合格率为43.23%(131/303),其中边境地区某孔雀养殖园200份样品,禽流感H5亚型免疫抗体的合格率为20.50%(41/200),昆明某孔雀养殖园103份样品,禽流感H5亚型免疫抗体的合格率为87.38%(90/103);其中绿孔雀血清中的禽流感H5亚型免疫抗体的合格率为29.65%(67/226),蓝孔雀血清中的禽流感H5亚型免疫抗体的合格率为83.12%(64/77)。昆明某孔雀养殖园的孔雀免疫抗体的合格率高于边境地区某孔雀养殖园的孔雀免疫抗体的合格率;40月龄孔雀免疫抗体合格率﹥5月龄孔雀免疫抗体合格率﹥7月龄孔雀免疫抗体合格率。

大熊猫肠道噬菌体的多样性

噬菌体在维持宿主肠道微环境中起着重要作用.运用宏基因组学方法全面探究大熊猫肠道噬菌体的多样性.共注释到548种噬菌体,主要来自11个科38个属548个种.大多数噬菌体主要来自长尾病毒科Siphoviridae、肌尾噬菌体科Myoviridae和短尾噬菌体科Podoviridae,所占比例分别为41.7%、27.6%和19.5%.其中未分类到科的噬菌体占10.5%.38个属主要为λ样病毒属(10.3%)、T4样病毒属(8.0%)、P1样病毒属(7.1%)、Phieco32样病毒属(5.3%)、T5样噬菌体属(3.4%)等.548个噬菌体中有22种丰度超过了1%,主要为肠细菌噬菌体P1(7.0%)、链球菌噬菌体LYGO9(6.1%)、肠细菌噬菌体λ(5.3%)、肠细菌噬菌体Phieco32(5.2%)、链球菌噬菌体phi30c(3.8%)等.此外,不同大熊猫繁育基地之间噬菌体群落结构存在显著差异(科水平:R=0.168,P<0.01;属水平:R=0.128,P<0.01;种水平:R=0.291,P<0.01),在α多样性指数方面SSP基地的Chao1指数与其他两个基地之间存在着显著差异.本研究发现大熊猫肠道噬菌体种群丰富多样,且因生境不同而显著变化;结果有助于挖掘大熊猫肠道噬菌体在疾病防控及治疗的潜力,为保障大熊猫的肠道健康提供新的思路.