纤维素降解菌的分离筛选及产酶条件优化

【目的】为获得秸秆降解的应用型菌株,自制秸秆腐熟菌剂。【方法】从林下土壤和堆肥样品中,采用羧甲基纤维素钠和刚果红培养基进行分离筛选,并对菌株纤维素酶活性、滤纸酶活性和木聚糖酶活性进行测定。【结果】获得1株羧甲基纤维素酶活力最高的菌株,经形态学和分子生物学鉴定为地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)。该菌株对滤纸有崩解效果,滤纸酶活性14.21 U·mL^(−1),木聚糖酶活性24.03 U·mL^(−1),玉米秸秆降解率为21.2%。【结论】菌株TB1滤纸崩解试验效果较好,纤维素酶活性、滤纸酶活性和木聚糖酶活性均较高,具有秸秆降解开发应用价值。

粘质沙雷氏菌FZSF02中转录调控因子OmpR的生物学功能

【目的】探索EnvZ/OmpR双组分调控系统的效应蛋白OmpR对粘质沙雷氏菌FZSF02灵菌红素合成及其他生物学特性的影响。【方法】同源重组法构建ompR敲除菌株,琼脂平板产色试验和qPCR检测OmpR对菌株灵菌红素合成的影响,结晶紫染色法和琼脂平板法等研究基因敲除菌株生物被膜形成能力,运动性和对不同环境胁迫因素的耐受性。【结果】序列分析显示OmpR为序列高度保守的蛋白。PCR验证证明ompR基因敲除成功;与野生型菌株相比ΔompR失去灵菌红素合成能力,qPCR试验显示灵菌红素合成基因簇中3个关键基因pigA、pigF和pigN转录水平分别降低为野生型菌株的3.8%,2.0%和2.1%;ΔompR菌株生物被膜生成能力较野生型降低37.5%(37℃)和15.1%(27℃);OmpR对该菌的生长能力、运动能力和响应环境胁迫的能力无明显影响。【结论】ompR为一新报道的特异性调控粘质沙雷氏菌灵菌红素合成的基因,且该基因对该菌生物被膜的形成有重要影响。

黏质沙雷氏菌灵菌红素合成基因簇异源表达及其潜在的温度调控机制

【目的】构建黏质沙雷氏菌FZSF02灵菌红素合成基因簇的异源表达菌株,探究其合成灵菌红素可能的温度调控机制。【方法】构建3种携带不同启动子的异源表达大肠杆菌菌株,并利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测FZSF02中pig基因簇pigA、pigF、pigN基因在37℃与28℃培养条件下的转录水平差异。【结果】在28℃低温条件下,3种不同的启动子均能在大肠杆菌中启动各自重组质粒所携带的pig基因簇表达并合成灵菌红素,其中携带T7强启动子的重组菌株经IPTG诱导后可以在37℃少量合成色素,其余菌株37℃不能合成色素。RT-qPCR结果显示在黏质沙雷氏菌中上述基因转录水平在37℃条件下较28℃出现下调。【结论】黏质沙雷氏菌FZSF02之所以能够在28℃合成灵菌红素而在37℃无法合成灵菌红素,一方面由于pig基因簇的编码基因转录水平下调,另一方面是由基因簇编码的合成灵菌红素所需前体MBC和MAP的一种或者几种关键酶在相对较高的温度(37℃)条件下活性受到抑制导致。

洋为中用的新蔬菜

曾几何时，“洋荤”是普通百姓开不得的，而今天，从国外引进来的蔬菜已成了人们的盘中物，这种不断引进、同化的过程从来没停止过。到了今天这个经济全球化的时代，中国人的“菜篮子”垦又开始多了一些新面孔。