公众考古视域下霸陵遗址的保护与展示利用

霸陵遗址蕴含的文化内涵和多元价值使其在中华文明发展史上具有典型性意义,是当前推动区域社会经济高质量发展的核心资源。在公众考古的视域下对霸陵遗址保护与展示利用展开研究,应从公众考古三方主体的角度出发,剖析霸陵遗址的价值,明晰三方主体的职责和定位,进而从革新保护理念、保护当地居民利益,革新阐释方法、实现考古成果展示利用,寻找开发特色、拓展展示内容三个方面提出保护与展示利用策略,以推动霸陵遗址有效保护与可持续利用,实现霸陵遗址赓续发展与区域社会经济的协调联动。

番茄NP24基因超表达载体的构建

根据NCBI上提供的NP24基因(Gen Bank登录号为543979)的序列,设计全长引物,扩增编码区c DNA,通过克隆至中间载体p MD18-T,将类甜蛋白基因NP24插入植物表达载体PBI121,构建超表达载体PBI121-NP24,采用Ca Cl2冻融法将其转入农杆菌EHA105菌株中。酶切鉴定表明,目的基因已经正确地插入到PBI121载体中,超表达载体构建成功。菌液PCR鉴定,超表达载体已转入农杆菌中。

ProDH基因反义表达载体的遗传转化

利用农杆菌介导的叶盘法将ProDH基因反义表达载体分别导入番茄品种‘耐运2000’和烟草中,建立并优化了番茄子叶再生体系。同时采用操作简单、再生周期短、转化效率较高的烟草进行了遗传转化体系的建立。试验获得49个烟草抗性芽和177个番茄抗性芽,用特异性引物对其做PCR扩增验证,共获得9个PCR呈阳性的抗性芽,其中7个烟草抗性芽、2个番茄抗性芽,因此证明外源基因已成功转入番茄的基因组中,为番茄转基因工程的进一步研究奠定基础。

番茄NP24基因的遗传转化

本研究旨在通过将类甜蛋白基因NP24导入番茄,提高番茄品种的抗病能力。通过对‘京乐502’、‘耐运2000’以及‘Bolgogragsky’3个番茄品种进行抗病性的鉴定及防御酶活性测定,选取抗病性最弱的番茄品种‘Bolgogragsky’,采用农杆菌介导法将类甜蛋白基因NP24导入番茄。接种晚疫病7天后测得‘Bolgogragsky’、‘耐运2000’和‘京乐502’病情指数分别为81.7、48.7、16.0。‘Bolgogragsky’POD酶活性在第1天达到高峰,‘京乐502’、‘耐运2000’在第5天到达最高峰,但‘京乐502’的酶活性一直较其他2组高。PAL酶活性先升高后降低,‘京乐502’升得最快降得最慢,‘Bolgogragsky’升得最慢降得最快。‘京乐502’SOD酶活性在0~5天升高而后降低,‘耐运2000’、‘Bolgogragsky’接种后第1天SOD酶活性明显降低,后续第3、5、7天在波动中上升。实验结果表明接种晚疫病菌后3个品种番茄的POD、PAL酶活性均高于对照,且酶活性与病情指数呈负相关;而处理组SOD酶活性均较对照组有所降低。此外,经PCR验证NP24基因已经整合到番茄‘Bolgogragsky’基因组中。