基于肿瘤干细胞学说探究天花粉蛋白干预乳腺癌耐药株SP细胞的实验研究

目的:研究天花粉蛋白(TCS)对乳腺癌紫杉醇耐药株侧群细胞(MCF-7/PTX-SP细胞)的诱导凋亡作用,从干细胞角度探讨其作用机理。方法:FACS分选MCF-7/PTX细胞中的SP细胞,流式细胞仪检测SP细胞、非SP细胞中CD44^+CD24^-细胞比例、软琼脂克隆形成实验对其进行鉴定;流式细胞仪检测不同浓度TCS对SP细胞的促凋亡作用;RT-PCR法检测不同浓度TCS对SP细胞内Bcl-2和Bax基因表达的影响。结果:非SP细胞及SP细胞中CD44^+/CD24^细胞的比例分别为0.47%和59.14%;与非SP细胞相比,SP细胞具有更高的体外克隆形成能力;TCS对SP细胞具有凋亡诱导作用,随着药物浓度的增高,SP细胞的凋亡率也随之升高,差异有统计学意义(t1=-13.751,P<0.01;t2=-10.892,P<0.01;t3=-6.999,P<0.01);不同浓度TCS处理后SP细胞内BaxmRNA的表达量呈明显的剂量依赖性上升趋势(P<0.01),而Bcl-2mRNA的表达变化无统计学差异(P>0.05)。各浓度组Bcl-2/Bax值呈减少趋势(P<0.01)。结论:天花粉蛋白对乳腺癌耐药株侧群细胞具有凋亡诱导作用,其机制可能与上调Bax基因的表达有关。

游泳加抚触及不同喂养方式对新生儿体重的影响

目的探讨新生儿游泳和抚触对新生儿体重的影响。方法将正常足月新生儿200例分为游泳抚触母乳喂养、游泳抚触混合喂养、游泳抚触人工喂养、纯母乳喂养4组,每组50例,纯母乳喂养组为对照组,观察新生儿出生时及出生后的体重变化。结果四组新生儿出院的体重有差异。结论游泳加抚触有助于新生儿体重增加。

基于蛋白质相互作用网络探讨天花粉蛋白对乳腺癌MCF-7/PTX细胞的耐药逆转作用

目的:构建人乳腺癌MCF-7/PTX细胞的蛋白质相互作用网络,预测细胞关键靶点,从凋亡耐药途径观察天花粉蛋白对MCF-7/PTX细胞的耐药逆转作用。方法:通过在线基因银行数(GenBank)筛选获得MCF-7/PTX细胞相关基因;使用STRING进行文本挖掘并构建蛋白质相互作用网络;应用插件Centiscape 2.2实现拓扑分析;基于拓扑分析所得的关键因子,选取Bcl-2基因为研究指标;MTT法检测TCS对MCF-7/PTX细胞的增殖抑制作用,Western Blot检测TCS对MCF-7/PTX细胞Bcl-2蛋白表达的影响。结果:通过"GenBank"筛选获得MCF-7/PTX细胞相关基因134个,软件STRING挖掘出MCF-7/PTX细胞的蛋白质相互作用网络包含1194个节点(蛋白质)、19733条边(相互作用关系);插件Centiscape 2.2分析得出关键节点Bcl-2。实验表明TCS对MCF-7/PTX细胞有明显的增殖抑制作用,且随着药物浓度的升高和作用时间的延长,对细胞的增殖抑制率升高,具有时间-剂量依赖性。不同浓度TCS作用于MCF-7/PTX细胞72 h,Bcl-2蛋白的表达下调,且呈剂量依赖性。结论:TCS通过下调MCF-7/PTX细胞Bcl-2蛋白的表达来发挥耐药逆转作用。

游泳加抚触及不同喂养方式对新生儿黄疸的影响

目的探讨新生儿游泳和抚触对新生儿黄疸的影响。方法将正常足月新生儿200例分为游泳抚触母乳喂养、游泳抚触混合喂养、游泳抚触人工喂养、纯母乳喂养4组,每组50例,纯母乳喂养组为对照组,观察四组新生儿经皮测黄疸指数的变化。结果游泳抚触母乳喂养、游泳抚触混合喂养、游泳抚触人工喂养组与对照组比较,差异有统计学意义。结论游泳加抚触有助于新生儿胎便的尽早排出,降低新生儿黄疸。

自拟固冲汤联合福乃得治疗冲任不固型缺铁性贫血临床观察

【目的】观察自拟固冲汤联合福乃得治疗冲任不固型缺铁性贫血(IDA)的临床疗效。【方法】将70例冲任不固型IDA患者随机分为治疗组和对照组,每组各35例。对照组给予服用福乃得治疗,治疗组在对照组治疗基础上加用自拟固冲汤口服治疗,2组均以1个月为1个疗程,共治疗2个疗程。治疗前后观察2组患者的血常规[红细胞(RBC)、血红蛋白(HGB)、平均红细胞体积(MCV)、平均红细胞血红蛋白量(MCH)、平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)、白细胞(WBC)、血小板(PLT)]+网织红细胞计数(Ret)、铁代谢指标[血清铁(SI)、血清铁蛋白(SF)、总铁结合力(TIBC)]等,治疗期间密切观察2组患者出现的不良反应,疗程结束后评价2组患者的西医临床疗效及中医证候疗效,治疗结束后3个月随访观察2组患者的复发情况。【结果】(1)脱落情况:治疗组因患者短期停药脱落1例,对照组相同原因脱落2例。(2)疗效情况:治疗2个月,2组均取得较好疗效,治疗组与对照组西医疗效的临床治愈率分别为82.4%和60.6%,中医证候疗效的临床治愈率分别为94.1%和51.5%,治疗组的西医疗效和中医证候疗效均优于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。(3)血常规情况:治疗后,2组患者的RBC、HGB、Ret、MCV、MCH、MCHC、WBC水平均明显升高(P<0.01),PLT水平明显降低(P<0.01),但治疗后组间比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。(4)铁代谢指标情况:治疗后,治疗组患者的SF、SI水平较治疗前明显升高(P<0.01),TIBC水平较治疗前明显降低(P<0.01),而对照组患者治疗后仅SF、SI水平升高(P<0.01),治疗组在升高SF、SI水平和降低TIBC水平方面均优于对照组(P<0.05或P<0.01),表明治疗组对铁代谢指标的改善作用优于对照组。(5)治疗组患者的不良反应发生率及复发率均明显低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.01)。【结论】应用自拟固冲汤联合福乃得治疗冲任不固型IDA疗效肯定,可加快临床症状恢复,减轻胃肠道副反应,降低疾病复发率。

金正均Q值法评价苦参碱联合阿霉素对人乳腺癌细胞的协同作用

目的利用金正均Q值法评价苦参碱联合阿霉素对人乳腺癌细胞是否存在协同增效作用。方法 MTT法检测各组对MCF-7细胞的生长抑制率,确定苦参碱及阿霉素的IC50,采用金正均Q值法计算联合用药各组的Q值;克隆形成实验检测各组对人乳腺癌细胞的克隆抑制能力;免疫蛋白印迹法检测各组对人乳腺癌细胞bax蛋白的表达。结果苦参碱、阿霉素及联合用药对MCF-7细胞的抑制作用呈浓度依赖性,经苦参碱联合阿霉素处理后的细胞生长抑制作用,与单用苦参碱或阿霉素相比,细胞抑制率明显增高,其中,苦参碱0.5mg/ml联合阿霉素0.5μg/ml组的抑制率明显增高,为(75.50±1.55)%,Q值为1.16,表现为协同作用,其余组Q值为0.96~1.10,表现为相加作用;苦参碱和阿霉素对MCF-7细胞的抑制作用呈浓度依赖性,其对MCF-7细胞的IC50值分别为(2.00±0.17)mg/ml和(0.36±0.03)μg/ml。经苦参碱0.5mg/ml联合阿霉素0.5μg/ml处理后的细胞克隆形成率,与单用苦参碱或阿霉素相比,细胞克隆形成率明显降低,为(13.68±1.76)%。经苦参碱0.5mg/ml联合阿霉素0.5μg/ml处理后的bax蛋白的表达,与单用苦参碱或阿霉素相比bax蛋白表达水平明显升高,为(60.85±2.34)%。结论苦参碱联合阿霉素对MCF-7在抑制生长、抑制增殖以及诱导凋亡方面起协同作用,其原因可能与协同上调bax蛋白的表达有关,具体原因有待进一步研究。

卵巢癌组织ALDH1表达与预后相关性Meta分析

目的乙醛脱氢酶1(Aldehyde dehydrogenase 1,ALDH1)在卵巢癌患者中的预后价值仍是有争议的。因此,采用Meta分析方法评价ALDH 1表达水平与卵巢癌患者预后的相关性。方法利用计算机检索PubMed、EMBASE、中国知网、万方数据库资源系统、中国生物医学文献数据库和维普中文期刊全文数据库从建库至2017-07公开发表的中英文文献,纳入符合标准的文献,提取基本信息,并进行方法学质量评价。选用Stata 12.0对所提取的数据进行Meta分析,并进行亚组分析、敏感性分析及发表偏倚的检测。结果最终纳入13篇原始文献,共2 141个病例。对所有卵巢癌患者总生存率进行Meta分析,风险比(hazard ratio,HR)的合并值为1.50(95%CI:1.17~1.91),P=0.001。Begg’s检验显示不能说明发表偏倚存在,P=0.06。亚组分析结果示,ALDH1表达程度分组、组织学类型、染色标准、患者来源都可能影响ALDH1表达与卵巢癌患者预后的关系。结论 ALDH1高表达可能是卵巢癌患者不良预后的危险因素。

乳腺癌多柔比星耐药细胞的生物学特性

目的 :探讨乳腺癌多柔比星(adriamycin,ADR)耐药细胞的生物学特性。方法 :以人乳腺癌MCF-7细胞为亲本细胞,建立对ADR耐药的人乳腺癌MCF-7/ADR细胞。应用刃天青法检测ADR对MCF-7/ADR和MCF-7细胞的半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC50)值,应用平板克隆形成实验检测MCF-7/ADR和MCF-7细胞的克隆形成能力。FCM法和免疫荧光法分析MCF-7/ADR和MCF-7细胞中CD44+/CD24-和乙醛脱氢酶1(acetaldehyde dehydrogenase 1,ALDH1)+干细胞亚群所占百分比,蛋白质印迹法检测ALDH1蛋白及调控干细胞的Hedgehog信号通路中Smo(Smoothened)和Gli1蛋白的表达。结果 :ADR对MCF-7/ADR细胞的IC50值明显高于MCF-7细胞(P<0.01),耐药倍数约为385倍。MCF-7/ADR细胞的克隆形成能力显著高于MCF-7细胞(P<0.01)。MCF-7/ADR细胞中CD44+/CD24-和ALDH1+干细胞亚群所占百分比显著高于MCF-7细胞(P值均<0.01)。MCF-7/ADR细胞中ALDH1蛋白及Hedgehog信号通路中Smo和Gli1蛋白的表达水平显著高于MCF-7细胞(P<0.01,P<0.01,P<0.05)。结论:乳腺癌ADR耐药细胞中CD44+/CD24-和ALDH1+干细胞亚群所占百分比以及Hedgehog干细胞调控信号通路相关蛋白Smo和Gli1的表达水平升高,可能与乳腺癌细胞对ADR的耐药相关。

乳腺癌干细胞相关信号通路及其抑制剂的研究进展

乳腺癌干细胞是乳腺癌组织中少数具备自我更新能力与多向分化潜能的细胞,与乳腺癌的发生发展密切相关。目前,乳腺癌治疗后易转移、易复发与乳腺癌干细胞的存在相关。乳腺癌干细胞信号通路在激活乳腺癌细胞功能、乳腺癌调控细胞分化以及控制乳腺癌细胞分裂方面起着关键作用,打破其平衡状态将导致乳腺癌细胞失控性增长及肿瘤发生。针对相应通路进行阻断性靶向治疗可能成为乳腺癌治疗的新视角。全文主要就乳腺癌干细胞相关信号通路及其抑制剂的研究进展进行阐述,以期为乳腺癌患者获得更加有效的临床治疗提供参考。

治疗前淋巴细胞减少与恶性实体瘤患者预后相关性Meta分析

目的越来越多的临床研究显示,治疗前淋巴细胞减少能够影响血液系统恶性肿瘤肿瘤患者的抗肿瘤治疗疗效和生存预后。然而,其在恶性实体瘤患者中的预后价值仍然存在一定争议。因此,本研究探讨治疗前淋巴细胞减少与非血液性恶性实体瘤患者预后的关系,以进一步指导临床工作。方法计算机检索PubMed、Web of Science、Medline和EMBASE四大数据库从建库至2017-12公开发表的相关文献。纳入研究确定治疗前淋巴细胞减少与恶性实体瘤患者总生存(overall survival,OS)和无进展生存(progression-free survival,PFS)的关系。计算风险比(hazard ratio,HR)和95%的置信区间(confidence interval,CI),采用Stata 12.0进行Meta分析。结果 32项符合标准的研究共计5 322例恶性实体瘤患者纳入分析。结果显示,治疗前淋巴细胞减少与患者较短的OS相关,HR合并值为1.50,95%CI为1.26~1.78,P<0.001;并且与患者较短的PFS也具有相关性,HR合并值为1.34,95%CI为1.18~1.54,P<0.001。结论治疗前淋巴细胞减少可能是恶性实体瘤患者预后差的一个独立危险因素。